HEK293 suspensionsadaptiert
500,00 €*
Die Produkte werden gefroren auf Trockeneis in Kryoröhrchen versandt. Jedes Kryoröhrchen enthält in der Regel 3 ×106 Zellen für adhärente Linien oder 5 ×106 Zellen für Suspensionslinien (nähere Angaben finden Sie in der CoA der Charge)
Allgemeine Informationen
| Beschreibung | Die HEK293-Zelllinie, die an die Suspensionskultur angepasst ist, ist eine Variante der humanen embryonalen Nierenzellen 293 (HEK293), die so modifiziert wurde, dass sie in Suspensionskulturen und nicht in adhärenten Kulturen wächst. Diese Anpassung ist für industrielle Anwendungen von Bedeutung, bei denen eine Proteinproduktion in großem Maßstab erforderlich ist. Die Zellen behalten viele der Eigenschaften der ursprünglichen HEK293-Linie bei, einschließlich einer robusten transienten Transfektionseffizienz und der Fähigkeit, exprimierte Proteine in einer Weise posttranslational zu modifizieren, die derjenigen von nativen menschlichen Zellen ähnelt. Diese Zellen werden in der Biotechnologie- und Pharmaindustrie für die Produktion rekombinanter Proteine und Viren für die Gentherapie und die Entwicklung von Impfstoffen besonders geschätzt. Die Anpassung an die Suspensionskultur ermöglicht eine leichtere Skalierbarkeit und vereinfacht den Ernteprozess, wodurch sie sich besser für die Bioprozessierung im kommerziellen Maßstab eignet. Die an die Suspensionskultur angepasste HEK293-Zelllinie unterstützt verschiedene virale Produktionssysteme, darunter Adenovirus, Lentivirus und Adeno-assoziiertes Virus (AAV), die für therapeutische Anwendungen und Forschung von zentraler Bedeutung sind. Insgesamt ist die HEK293-Zelllinie in Suspensionsform ein wichtiges Instrument in den Bereichen Molekularbiologie und Bioprozessierung, das eine vielseitige Plattform für die Produktion verschiedener biologisch aktiver Moleküle bietet. Ihre einfache genetische Manipulation und ihre Fähigkeit, Proteine zu produzieren, die korrekt gefaltet und posttranslational nach menschlichen Zellmustern modifiziert sind, machen sie zu einer unverzichtbaren Ressource in vielen fortgeschrittenen therapeutischen und Forschungsbereichen. |
|---|---|
| Organismus | Menschen |
| Gewebe | Niere |
| Anwendungen | Transfektionswirt |
Merkmale
| Alter | Fötus |
|---|---|
| Geschlecht | Weiblich |
| Morphologie | rund |
| Wachstumseigenschaften | Aufhängung |
Regulatorische Daten
| Zitat | HEK293 Suspensions-adaptiert (Cytion Katalognummer 300686) |
|---|---|
| Biosicherheitsstufe | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0045 |
| GVO-Status | GMO-S1: Diese an die Suspension angepasste HEK293-Zelllinie enthält vom Adenovirus 5 abgeleitete E1-Sequenzen der elterlichen HEK293-Linie, die eine hohe Proliferations- und Proteinexpressionskapazität unterstützen. Die Modifikation ist in transformierten embryonalen Nierenzellen stabil vorhanden. Diese Klassifizierung gilt nur innerhalb Deutschlands und kann in anderen Ländern abweichen. |
Biomolekulare Daten
| Exprimierte Rezeptoren | Vitronectin |
|---|---|
| Proteinexpression | CEA negativ, p53 positiv |
| Tumorigene | In Nacktmäusen |
| Virusanfälligkeit | transformiert mit Adenovirus 5 DNA Adenovirus 5 DNA |
Handhabung
| Nährboden | Panserin 293S (PanBiotech, Deutschland) |
|---|---|
| Supplemente | Keine Zuschläge erforderlich |
| Dissoziationsreagenz | Nicht erforderlich |
| Subkultivierung | Halten Sie die Suspensionszellen bei Zelldichten zwischen 5 x105 und 2-3 x106 Zellen/ml in Eppendorf-Zellkulturflaschen auf einem Schüttler in einem Inkubator bei 37°C/5%CO2. Sobald die Zelldichte 2-3 x106 Zellen/ml erreicht hat, subkultivieren. Die Zellen vorsichtig herauslösen, um Klumpenbildung zu vermeiden. Sobald die Zelldichte von 1-2 x106 Zellen/ml erreicht ist, die Zellen durch 5-minütiges Zentrifugieren bei 200xg sammeln und den Überstand verwerfen. Verdünnen Sie sie in einem angemessenen Volumen frischen, vorgewärmten Kulturmediums und zählen Sie die Zellen, um Informationen über die Lebensfähigkeit und die Anzahl der Zellen zu erhalten. Die Zellen durch 5-minütiges Zentrifugieren bei 200xg sammeln und den Überstand verwerfen. Resuspendieren Sie die Zellen im entsprechenden Volumen des Gefriermediums und zählen Sie erneut. Die Lebensfähigkeit der Zellen sollte >>80% betragen, eine Zelldichte von 5-10 Millionen Zellen/ml wird empfohlen. Pipettieren Sie die Zellen in voretikettierte Kryovials. Verwenden Sie entweder den CoolCell-Gefrierbehälter oder einen Gefrierschrank mit kontrollierter Geschwindigkeit, um eine Abkühlungsrate von 1°C/min sicherzustellen |
| Aussaatdichte | 5 x105 Zellen/ml |
| Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
| Erholung nach dem Tauwetter | Kulturen mit einer Dichte von 5 x105 Zellen/ml anlegen und die Zellkonzentration für optimales Wachstum auf 2-3 x106 Zellen/ml halten. Bei 37°C/5%CO2 auf einem Zellschüttler bei 100-150 rpm inkubieren. |
| Einfriermedium | Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten. |
| Auftauen und Kultivierung von Zellen |
|
| Inkubationsatmosphäre | 37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre. |
| Kolbenbeschichtung | Um eine optimale Anheftung und Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten, empfehlen wir die Verwendung von kollagenbeschichteten Flaschen oder Platten. |
| Verfahren zum Einfrieren | Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager. |
| Versandbedingungen | Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager. |
| Lagerungsbedingungen | Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel. |
Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
| Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
|---|---|
| STR-Profil |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 11,12
D13S317: 12,14
D16S539: 9
D5S818: 8,9
D7S820: 11,12
TH01: 7,9.3
TPOX: 11
vWA: 16,19
D3S1358: 15,17
D21S11: 28,30.2
D18S51: 18
Penta E: 7,15
Penta D: 9,10
D8S1179: 12,14
FGA: 23
|
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Erforderliche Produkte
Erforderliche Produkte
PBSPhosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS) ist eine weit verbreitete Pufferlösung in der biologischen und chemischen Forschung. Sie spielt eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung des pH-Gleichgewichts und der Osmolarität während verschiedener experimenteller Verfahren, einschließlich Gewebeverarbeitung und Zellkultur. Unsere PBS-Lösung wird sorgfältig mit hochreinen Inhaltsstoffen formuliert, um Stabilität und Zuverlässigkeit bei jedem Experiment zu gewährleisten. Die Osmolarität und die Ionenkonzentration unserer PBS-Lösung sind denen des menschlichen Körpers sehr ähnlich, so dass sie isotonisch und für die meisten Zellen ungiftig ist.
Zusammensetzung unserer PBS-Lösung
Unsere PBS-Lösung ist eine pH-angepasste Mischung aus hochreinen Phosphatpuffern und Kochsalzlösungen. Bei einer 1fachen Arbeitskonzentration enthält sie:
8000 mg/L Natriumchlorid (NaCl)
200 mg/L Kaliumchlorid (KCl)
1150 mg/L Natriumphosphat dibasisch wasserfrei (Na2HPO4)
200 mg/L Kaliumphosphat einbasig wasserfrei (KH2PO4)
Diese Zusammensetzung gewährleistet ein optimales pH
- und Ionengleichgewicht und eignet sich für eine breite Palette biologischer Anwendungen.
Anwendungen unserer PBS-Lösung
Unsere PBS-Lösung ist ideal für verschiedene Anwendungen in der biologischen Forschung. Aufgrund ihrer isotonischen und ungiftigen Eigenschaften eignet sie sich für die Verdünnung von Substanzen und die Spülung von Zellbehältern. PBS-Lösungen, die EDTA enthalten, sind wirksam, um anhaftende und verklumpte Zellen abzulösen. Zweiwertige Metalle wie Zink sollten jedoch nicht zu PBS hinzugefügt werden, da dies zu Ausfällungen führen kann. In solchen Fällen werden Good's Puffer empfohlen. Außerdem ist unsere PBS-Lösung eine akzeptable Alternative zu viralen Transportmedien für den Transport und die Lagerung von RNA-Viren, einschließlich SARS-CoV-2.
Qualitätskontrolle
Steril gefiltert
Lagerung und Haltbarkeit
Vor Licht geschützt bei +2°C bis +25°C lagern.
Nach dem Öffnen bei 2°C bis 25°C lagern und innerhalb von 24 Monaten verbrauchen.
Versandbedingungen
Umgebungstemperatur
Pflege
Gekühlt bei +2°C bis +8°C im Dunkeln aufbewahren. Vermeiden Sie Einfrieren und häufiges Erwärmen auf +37°C, da dies die Produktqualität beeinträchtigt.
Erwärmen Sie das Medium nicht über 37°C und verwenden Sie keine unkontrollierten Wärmequellen wie Mikrowellengeräte.
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, entnehmen Sie die erforderliche Menge und erwärmen Sie sie vor der Verwendung auf Raumtemperatur.
Zusammensetzung
Kategorie
Bestandteile
Konzentration (mg/L)
Salze
Kaliumchlorid
200
Kaliumphosphat monobasisch wasserfrei
200
Natriumchlorid
8000
Natriumphosphat zweibasisch wasserfrei
115020,00 €* -
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Materialübertragungsvertrag
Wenn Sie beabsichtigen, Cytion-Zelllinien ausschließlich für die interne Forschung an einem einzigen Forschungsstandort zu verwenden, füllen Sie bitte unsere Materialtransfervereinbarung (MTA) aus, unterzeichnen Sie diese und reichen Sie sie zusammen mit Ihrer Bestellung ein.
Für kommerzielle Anwendungen - einschließlich, aber nicht beschränkt auf Dienstleistungen, Qualitätskontrolltests, Produktfreigabe, diagnostische Anwendungen oder behördliche Studien - füllen Sie bitte das Formular "Verwendungszweck" aus, damit wir eine auf Ihr Projekt zugeschnittene Vereinbarung vorbereiten können.
Bitte beachten Sie: Das MTA gilt nur für bestimmte Zelllinien. Wenn dieser Hinweis und das MTA-Dokument auf einer Produktseite erscheinen, ist die Vereinbarung anwendbar. Für Zelllinien, die nicht unter das MTA fallen, wird kein Hinweis auf die Vereinbarung angezeigt. Das MTA gilt nicht für Kunden in Nord- und Südamerika, China oder Taiwan. Bitte wenden Sie sich an unsere US-Niederlassung, um die entsprechende Vereinbarung zu erhalten.