HEK293 EBNA-Zellen

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
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Produktnummer: 300264

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Product sheet

Beschreibung	Die HEK293 EBNA-Zelllinie ist ein Derivat der ursprünglichen HEK293-Linie, die ihrerseits von in Gewebekultur gezüchteten menschlichen embryonalen Nierenzellen abstammt. Diese spezielle Unterlinie wurde so manipuliert, dass sie das Epstein-Barr-Virus-Kernantigen-1 (EBNA-1) stabil exprimiert. Die Expression von EBNA-1 ermöglicht die episomale Replikation von Plasmiden, die den EBV-Replikationsursprung tragen, was HEK293 EBNA-Zellen besonders wertvoll für die Produktion rekombinanter Proteine und für Genexpressionsstudien mit episomalen Vektoren macht. HEK293 EBNA-Zellen behalten viele der Eigenschaften der HEK293-Elternzellen bei, einschließlich ihrer Adhärenz an Zellkulturplastik und ihres robusten Wachstums in Standard-Säugetierzellkulturmedien. Der Zusatz von EBNA-1 erweitert ihren Nutzen in der Forschung und für biotechnologische Anwendungen, da er die Fähigkeit der Zellen zur Vermehrung von Plasmiden mit dem EBV-Ursprung der Plasmidreplikation verbessert. Diese Eigenschaft ist entscheidend für die Herstellung stabiler, ertragreicher rekombinanter Proteine, die sowohl für Forschungszwecke als auch für die industrielle Produktion unerlässlich sind.
Organismus	Menschen
Gewebe	Embryonale Niere
Synonyme	HEK293-EBNA, 293 c18, 293c18, HEK 293 c18, HEK-293 c18, HEK293-EBNA1, HEK-293-EBNA, HEK 293-EBNA, HEK 293 EBNA, HEK293EBNA, 293 EBNA, 293-EBNA1, 293-EBNA, 293/EBNA, 293EBNA, EBNA-293, EBNA293, HEK293E, HEK/EBNA, HEK-EBNA, HEK.EBNA, 293/EBNA-1

Alter	Fötus
Geschlecht	Weiblich
Morphologie	Epithelial
Wachstumseigenschaften	Adhärent

Zitat	HEK293 EBNA (Cytion Katalognummer 300264)
Biosicherheitsstufe	2

Antigenexpression	EBNA1
Viren	Adenovirus 5 (Transformant), EBV (exprimiert EBNA1)

Nährboden	DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Mittlere Supplemente	Supplemente des Mediums mit 10% FBS
Passage-Lösung	Accutase
Subkultivierung	Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Einfriermedium	Verwenden Sie als Kryokonservierungsmedium ein komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Handhabung von kryokonservierten Kulturen	Vergewissern Sie sich, dass das Fläschchen bei der Lieferung tiefgefroren ist, da die Zellen auf Trockeneis versandt werden, um während des Transports optimale Temperaturen zu erhalten. Lagern Sie das Kryofläschchen nach Erhalt entweder sofort bei Temperaturen unter -150 °C, um die Unversehrtheit der Zellen zu gewährleisten, oder fahren Sie mit Schritt 3 fort, wenn eine sofortige Kultivierung erforderlich ist. Für eine sofortige Kultivierung tauen Sie das Fläschchen schnell auf, indem Sie es in ein 37°C warmes Wasserbad mit sauberem Wasser und einem antimikrobiellen Mittel eintauchen und 40-60 Sekunden lang vorsichtig schütteln, bis ein kleiner Eisklumpen zurückbleibt. Führen Sie alle weiteren Schritte unter sterilen Bedingungen in einer Abzugshaube durch und desinfizieren Sie das Kryo-Fläschchen vor dem Öffnen mit 70%igem Ethanol. Das desinfizierte Fläschchen vorsichtig öffnen und die Zellsuspension unter vorsichtigem Mischen in ein 15-ml-Zentrifugenröhrchen mit 8 ml Kulturmedium bei Raumtemperatur überführen. Zentrifugieren Sie das Gemisch 3 Minuten lang bei 300 x g, um die Zellen abzutrennen, und verwerfen Sie den Überstand mit dem restlichen Gefriermedium vorsichtig. Das Zellpellet vorsichtig in 10 ml frischem Kulturmedium resuspendieren. Bei adhärenten Zellen die Suspension auf zwei T25-Kulturflaschen aufteilen; bei Suspensionskulturen das gesamte Medium in eine T25-Flasche überführen, um eine effektive Zellinteraktion und ein effektives Wachstum zu fördern. Halten Sie sich an die festgelegten Subkulturprotokolle, um ein kontinuierliches Wachstum und die Aufrechterhaltung der Zelllinie zu gewährleisten und zuverlässige Versuchsergebnisse zu erzielen.

Sterilität	Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
STR profile	PEZ6: Kasumi-1

HEK293 EBNA-Zellen

Allgemeine Informationen

Merkmale

Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation

Expression / Mutation

Handhabung

Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA