Dòng tế bào thần kinh Neuro-2a
Neuro-2a là dòng tế bào thần kinh được tạo ra từ chuột, được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu thần kinh học. Chủ yếu, các tế bào này được sử dụng để nghiên cứu sự phát triển thần kinh, phân hóa, độc tính thần kinh, các con đường tín hiệu tế bào và sự phát triển của trục thần kinh. Ngoài ra, chúng còn được sử dụng cho mục đích phát triển và sàng lọc thuốc.
Bài viết này tập trung vào các khía cạnh quan trọng của tế bào Neuroblastoma Neuro-2a có thể giúp bạn trước khi bắt đầu làm việc với chúng. Bài viết sẽ chủ yếu đề cập đến:
- Các đặc điểm chung và nguồn gốc của dòng tế bào Neuro-2a
- Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào Neuro-2a
- Ưu điểm và nhược điểm của dòng tế bào Neuro-2a
- Ứng dụng nghiên cứu của dòng tế bào Neuro-2a
- Các công bố nghiên cứu sử dụng tế bào Neuro-2a
- Tài nguyên cho tế bào Neuro-2a: Quy trình, video và nhiều hơn nữa
1. Đặc điểm chung và nguồn gốc của dòng tế bào Neuro-2a
Phần này của bài viết sẽ trình bày về nguồn gốc và các đặc điểm cơ bản của dòng tế bào Neuro-2a mà bạn cần biết trước khi làm việc với nó. Ở đây, bạn sẽ tìm hiểu: Dòng tế bào Neuro-2a là gì? Nguồn gốc của dòng tế bào Neuro-2a là gì? Sự biệt hóa của tế bào Neuro-2a là gì? Kích thước của tế bào Neuro-2a là bao nhiêu? Hình thái của tế bào Neuro-2a như thế nào?
- Dòng tế bào Neuro-2a có nguồn gốc từ một khối u tự phát (neuroblastoma) của một con chuột albino (giống A). Dòng tế bào này được thiết lập bởi R.J. Klebe và F.H. Ruddle.
- Các tế bào neuroblastoma Neuro-2a có hình thái tế bào thần kinh và tế bào gốc dạng amip.
- Kích thước của tế bào Neuro-2a là 12 micromet về chiều cao [1].
- Số lượng nhiễm sắc thể của tế bào Neuro-2a có thể dao động từ 59 đến 193, với số lượng trung bình là 95. Karyotype của các tế bào neuroblastoma này không ổn định trong khoảng từ 94 đến 98 nhiễm sắc thể.
2. Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào Neuro-2a
Tế bào Neuro-2a được sử dụng rộng rãi trong các phòng thí nghiệm nghiên cứu thần kinh. Trước khi làm việc với các tế bào này, bạn nên tìm hiểu các thông tin quan trọng về nuôi cấy tế bào được đề cập dưới đây. Điều này có thể giúp bạn dễ dàng hơn trong quá trình làm việc. Bạn sẽ biết: Tế bào Neuro-2a là gì? Môi trường nuôi cấy tế bào Neuro-2a là gì? Cách nuôi cấy tế bào Neuro-2a như thế nào? Thời gian nhân đôi của tế bào Neuro-2a là bao lâu? Mật độ gieo tế bào Neuro-2a là bao nhiêu? ? là bao nhiêu? Quy trình nuôi cấy tế bào Neuro-2a là gì? Dung dịch nuôi cấy tế bào Neuro-2a là gì?
Điểm chính khi nuôi cấy tế bào Neuro-2a
|
Thời gian nhân đôi: |
Thời gian nhân đôi của tế bào Neuro-2a là khoảng 70 giờ. |
|
Dính bám hay lơ lửng: |
Neuro-2a là dòng tế bào bám dính. |
|
Mật độ gieo tế bào: |
Mật độ gieo tế bào tối ưu cho dòng tế bào Neuro-2a là 1 x10⁴tế bào/cm². Để gieo tế bào, tế bào được rửa bằng dung dịch đệm phosphate không chứa magiê và canxi (1x). Sau đó, dung dịch chuyển tế bào (Accutase) được thêm vào, và tế bào được ủ trong 8 đến 10 phút ở nhiệt độ phòng. Sau khi tách tế bào, dung dịch nuôi cấy tươi được thêm vào, và tế bào được ly tâm. Cụm tế bào thu hoạch được tái phân tán cẩn thận, và tế bào được đổ vào bình nuôi cấy để phát triển. |
|
Dung dịch nuôi cấy: |
EMEM được sử dụng để nuôi cấy tế bào Neuro-2a. Nó chứa 10% huyết thanh bò phôi (FBS), 2 mM L-Glutamine, 1,5 g/L NaHCO₃, EBSS, 1 mM Natri pyruvate và NEAA để đảm bảo sự phát triển tối ưu của tế bào. Dung dịch nuôi cấy nên được thay thế 1 đến 2 lần mỗi tuần. |
|
Điều kiện nuôi cấy: |
Văn hóa Neuro-2a được duy trì trong tủ ấm 37°C có độ ẩm cao, kết nối với nguồn CO2 5%. |
|
Bảo quản: |
Tế bào nên được bảo quản ở nhiệt độ dưới -150°C trong tủ đông điện siêu lạnh hoặc pha hơi của nitơ lỏng cho thời gian dài. |
|
Quy trình đông lạnh và môi trường: |
Dung dịch nuôi cấy CM-1 hoặc CM-ACF được sử dụng để đông lạnh tế bào Neuro-2a. Tế bào được đông lạnh qua quá trình đông lạnh chậm, chỉ cho phép giảm 1°C mỗi phút. Điều này bảo vệ tế bào khỏi sốc và duy trì khả năng sống của chúng. |
|
Quá trình rã đông: |
Để rã đông các mẫu đông lạnh, ống nghiệm được đặt vào bể nước 37 °C trong 40 đến 60 giây cho đến khi chỉ còn một khối băng nhỏ. Sau đó, môi trường nuôi cấy được thêm vào, và tế bào được ly tâm. Bước này giúp loại bỏ các thành phần của môi trường đông lạnh. Cụm tế bào sau đó được tái phân tán và chuyển sang bình nuôi cấy mới chứa môi trường nuôi cấy. Sau đó, các tế bào được đặt trong tủ ấm ở 37 °C trong ít nhất 24 giờ. |
|
Mức độ an toàn sinh học: |
Môi trường phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1 là bắt buộc để xử lý và duy trì các văn hóa Neuro-2a. |
3. Ưu điểm và nhược điểm của dòng tế bào Neuro-2a
Tế bào Neuro-2a có một số ưu điểm và nhược điểm giúp chúng khác biệt so với các dòng tế bào thần kinh khác. Một số ưu điểm và nhược điểm đáng chú ý của các tế bào này được liệt kê dưới đây.
Ưu điểm
Các ưu điểm của dòng tế bào neuroblastoma chuột Neuro-2a là:
-
Dễ dàng duy trì
Dòng tế bào Neuro-2a không liên quan đến các quy trình nuôi cấy tế bào phức tạp hoặc phức tạp. Chúng dễ dàng nuôi cấy và duy trì trong các phòng thí nghiệm nghiên cứu.
-
Mô hình tế bào thần kinh in vitro
Neuro-2a là mô hình tế bào thần kinh tiện lợi được các nhà nghiên cứu sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu về phát triển và biệt hóa tế bào thần kinh.
Nhược điểm
Những nhược điểm của tế bào Neuro-2a là:
-
Nguồn gốc chuột
Neuro-2a có nguồn gốc từ chuột, và các nhà nghiên cứu nên thận trọng khi áp dụng kết quả từ các nghiên cứu dựa trên chuột vào sức khỏe và bệnh tật của con người, vì sinh học của chuột và con người có thể khác biệt đáng kể.
4. Ứng dụng nghiên cứu của dòng tế bào Neuro-2a
Tế bào Neuro-2a có nhiều ứng dụng trong lĩnh vực nghiên cứu thần kinh. Một số ứng dụng tiềm năng của dòng tế bào này được thảo luận dưới đây:
- Phát triển thần kinh: Neuro-2a là mô hình tế bào thần kinh in vitro được sử dụng rộng rãi để nghiên cứu phát triển thần kinh và các quá trình liên quan như biệt hóa, tăng trưởng trục thần kinh và hình thành synapse. Một nghiên cứu năm 2020 đã sử dụng tế bào Neuro-2a để khám phá vai trò của microRNA-124 trong quá trình biệt hóa tế bào thần kinh do acid retinoic gây ra [2]. Một nghiên cứu khác đã điều tra biểu hiện của thụ thể axit retinoic gamma (RARG) và miRNA-124 trong dòng tế bào neuroblastoma (N2A). Nghiên cứu này đề xuất rằng RARG là mục tiêu của miR-124 và ức chế sự phát triển của neurite [3].
- Neurotoxicity: Neuro-2a cũng được sử dụng để đánh giá tác động độc hại của thuốc, hóa chất hoặc yếu tố môi trường đối với tế bào thần kinh. Ví dụ, một nghiên cứu do Zhihong Yin và cộng sự thực hiện đã nghiên cứu độc tính thần kinh của bisphenol A (BPA), một hóa chất môi trường, bằng cách sử dụng tế bào Neuro-2a. Họ quan sát thấy BPA ức chế sự biệt hóa và tăng sinh của tế bào thần kinh bằng cách làm gián đoạn tính toàn vẹn tế bào và synap của chúng [4].
- Màn hình thuốc: Tế bàoNeuro-2a cũng được sử dụng để đánh giá hoạt tính điều trị của nhiều loại thuốc, hợp chất và sản phẩm tự nhiên. Ví dụ, một nghiên cứu đã sử dụng tế bào Neuro-2a để nghiên cứu tiềm năng chống oxy hóa của chiết xuất cây Ginkgo biloba. Hơn nữa, nghiên cứu đề xuất rằng nó gây giảm sự tích tụ Aβ và có thể là một phương pháp điều trị tiềm năng cho bệnh Alzheimer [5].
5. Các công bố nghiên cứu sử dụng dòng tế bào Neuro-2a
Dưới đây là một số bài báo nghiên cứu thú vị về dòng tế bào Neuro-2a.
Nghiên cứu này trên Tạp chí Y học Tự nhiên, 2018 đã điều tra tác dụng điều trị của các alkamides được tách chiết từ tiêu trắng (P. nigrum) trên các tế bào thần kinh Neuro-2a.
Sự ức chế Nkx2.1 liên quan đến sự bất thường của não do quá mức acid retinoic
Nghiên cứu này trên tạp chí Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020 đề xuất rằng gen Nkx2.1 đóng vai trò quan trọng trong sự phát triển não bộ của chuột bằng cách điều chỉnh chuỗi tín hiệu Shh.
Bài báo này được công bố trên tạp chí Toxicology and Industrial Health (2023) và đề xuất rằng hóa chất môi trường bisphenol A kích hoạt độc tính thần kinh trong tế bào Neuro-2A và gây rối loạn chức năng synap và cytoskeleton của chúng.
Bài báo này trên tạp chí Pharmaceuticals (2021) đề xuất rằng thuốc hexarelin điều chỉnh chuỗi phản ứng PI3K/AKT và MAPK trong tế bào neuroblastoma (Neuro-2a) và ức chế độc tính apoptosis do hydrogen peroxide gây ra ở tế bào Neuro-2a.
Bài báo nghiên cứu trong tạp chí Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) đề xuất rằng chiết xuất quả Emblica officinalis ức chế viêm thần kinh trong tế bào Neuro-2a và do đó có thể có lợi cho các bệnh viêm thần kinh.
6. Tài nguyên cho tế bào Neuro-2a: Quy trình, video và hơn thế nữa
Dưới đây là các tài nguyên trực tuyến có sẵn về tế bào Neuro-2a. Chúng bao gồm quy trình nuôi cấy và chuyển gen cho tế bào Neuro-2a.
- Quy trình chuyển gen cho tế bào Neuro-2a: Neuro-2a là một chủ thể chuyển gen phù hợp. Liên kết này sẽ hướng dẫn bạn về quy trình chuyển gen cho dòng tế bào này. Hiệu suất chuyển gen của Neuro-2a thay đổi tùy theo loại thuốc thử.
Liên kết sau đây chứa quy trình nuôi cấy tế bào Neuro-2a.
- Quy trình nuôi cấy tế bào Neuro-2a: Liên kết này sẽ giúp bạn tìm hiểu quy trình nuôi cấy lại tế bào Neuro-2a.
- Tế bào Neuro-2a: Trang web này cung cấp kiến thức toàn diện về môi trường nuôi cấy tế bào Neuro-2a, mật độ gieo tế bào, và các quy trình nuôi cấy lại, xử lý tế bào đông lạnh và tế bào phát triển.
Tham khảo
- Lulevich, V., et al., Cơ học tế bào đơn cung cấp một phương pháp nhạy cảm và định lượng để nghiên cứu tương tác giữa peptide amyloid-beta và tế bào thần kinh. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): tr. 13872-7.
- You, Q., et al., Vai trò của miR-124 trong điều hòa sự biệt hóa của tế bào Neuro-2A do acid retinoic gây ra. Neural Regen Res, 2020. 15(6): tr. 1133-1139.
- Su, X., et al., Receptor gamma của acid retinoic là mục tiêu của microRNA-124 và ức chế sự phát triển của neurite. Neuropharmacology, 2020. 163: tr. 107657.
- Yin, Z., et al., Tiếp xúc với bisphenol-A gây độc tính thần kinh và liên quan đến synapse và cytoskeleton trong tế bào Neuro-2a. Toxicology in Vitro, 2020. 67: tr. 104911.
- Chen, L., et al., Chiết xuất Ginkgo biloba (EGb) ức chế stress oxy hóa trong tế bào Neuro 2A biểu hiện quá mức APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.