Dung dịch nuôi cấy tế bào

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) là một môi trường cơ bản đa năng và được sử dụng rộng rãi, được thiết kế để hỗ trợ sự phát triển của nhiều loại tế bào động vật có vú trong nghiên cứu sinh học. Nó là môi trường lý tưởng để nuôi cấy các tế bào sợi nguyên phát, tế bào thần kinh, tế bào glial, tế bào nội mô mạch máu người (HUVECs), tế bào cơ trơn, cũng như các dòng tế bào phổ biến như HeLa, 293, Cos-7 và PC-12.
Điểm khác biệt của DMEM so với các môi trường khác là thành phần độc đáo của nó. Nó chứa nồng độ axit amin và vitamin cao gấp bốn lần so với môi trường Eagle's Minimal Essential Medium ban đầu. Ban đầu được phát triển với nồng độ glucose thấp (1 g/L) và natri pyruvate, DMEM thường được sử dụng với nồng độ glucose cao hơn, có thể kèm theo hoặc không kèm theo natri pyruvate. Đáng chú ý, DMEM không chứa protein, lipid hoặc yếu tố tăng trưởng, do đó cần bổ sung. Để đạt được sự phát triển tối ưu, phương pháp phổ biến là bổ sung DMEM với 10% huyết thanh bò non (FBS). Ngoài ra, DMEM sử dụng hệ đệm natri bicacbonat, yêu cầu môi trường CO2 từ 5-10% để duy trì pH sinh lý.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) được đánh giá cao trong số các môi trường nuôi cấy tế bào và mô được định nghĩa, đáp ứng nhu cầu phát triển của các loại tế bào bám dính khác nhau. Nó vượt trội so với môi trường Eagle ban đầu, được phát triển vào những năm 1950 để nuôi cấy tế bào gà, thông qua công thức bổ sung được cải tiến gọi là sửa đổi của Dulbecco. Sự sửa đổi này làm tăng đáng kể hàm lượng của một số axit amin và vitamin lên đến bốn lần so với môi trường ban đầu.
Trong lĩnh vực nuôi cấy tế bào, DMEM đóng vai trò quan trọng như một môi trường nuôi cấy cho các loại tế bào khác nhau, bao gồm tế bào nguyên thủy, tế bào gốc và tế bào biến đổi. Các nhà nghiên cứu cũng sử dụng phiên bản sửa đổi của DMEM cho nhiều ứng dụng nghiên cứu, như phát hiện thuốc, công nghệ mô và nghiên cứu các con đường tín hiệu tế bào.

Kiểm soát chất lượng

Lọc vô trùng


Bảo quản và thời hạn sử dụng

Bảo quản ở nhiệt độ +2°C đến +8°C, tránh ánh sáng.
Sau khi mở, bảo quản ở 4°C và sử dụng trong vòng 6–8 tuần.


Điều kiện vận chuyển

Nhiệt độ môi trường


Bảo quản

Bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ từ +2°C đến +8°C trong điều kiện tối. Tránh đông lạnh và làm ấm thường xuyên lên +37°C, vì điều này làm giảm chất lượng sản phẩm.
Không làm nóng môi trường vượt quá 37°C hoặc sử dụng các nguồn nhiệt không kiểm soát như lò vi sóng.
Nếu chỉ sử dụng một phần môi trường, hãy lấy lượng cần thiết và làm ấm đến nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.


Thành phần



Loại
Thành phần
Nồng độ (mg/L)


Axit amin
Glycine
30.00



L-Arginine HCl
84.00



L-Cystine 2 HCl
62.57



L-Glutamine
584.00



L-Histidine HClH₂O
42.00



L-Isoleucine
105.00



L-Leucine
105.00



L-Lysine HCl
146.00



L-Methionine
30.00



L-Phenylalanine
66.00



L-Serine
42.00



L-Threonine
95.00



L-Tryptophan
16.00



L-Tyrosine 2 Na2H₂O
103.79



L-Valine
94.00


Vitamin
Clorua choline
4.00



D-Canxi pantothenate
4.00



Axit folic
4.00



myo-Inositol
7.20



Nicotinamide
4.00



Pyridoxal HCl
4.00



Riboflavin
0.40



Thiamine HCl
4.00


Muối vô cơ
CaCl₂ 2H₂O
265.00



Fe(NO₃)₃·9H₂O
0.10



KCl
400.00



MgSO₄7H₂O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO₃
3700.00



NaH₂PO₄·2H₂O
141.73


Các thành phần khác
D-Glucose
4500.0



Muối natri của phenol đỏ
15.90



Natri Pyruvate
110.00

Môi trường tối thiểu thiết yếu của Eagle (EMEM) là một trong những môi trường cơ bản được sử dụng rộng rãi nhất để nuôi cấy nhiều loại tế bào động vật có vú, đặc biệt là các dòng tế bào bám dính. Được phát triển ban đầu bởi Harry Eagle, công thức cổ điển này chứa các axit amin thiết yếu, vitamin và muối vô cơ cần thiết để hỗ trợ sự phát triển của cả tế bào nguyên phát và các dòng tế bào đã được thiết lập trong điều kiện nuôi cấy tiêu chuẩn.

Công thức lỏng đã được lọc vô trùng và sẵn sàng sử dụng này được bổ sung Dung dịch Muối Cân bằng Earle (EBSS), 2 mM L-glutamine, D-glucose (1,0 g/L) và 2,2 g/L natri bicacbonat (NaHCO3), khiến nó phù hợp để sử dụng trong môi trường tủ ấm có kiểm soát CO2 (thường là 5% CO2). Chất phenol red có trong sản phẩm đóng vai trò là chất chỉ thị pH, cho phép theo dõi trực quan tình trạng môi trường nuôi cấy tế bào một cách thuận tiện.

Các tính năng chính

Công thức MEM cổ điển của Eagle với Dung dịch muối cân bằng Earle (EBSS)
Bao gồm 2 mM L-glutamine – sẵn sàng để sử dụng ngay
2,2 g/L natri bicacbonat – được đệm cho ủ 5% CO2
Có D-glucose (1,0 g/L) làm nguồn carbon chính
Có phenol red làm chất chỉ thị pH
Không chứa HEPES và natri pyruvate
Môi trường lỏng đã được lọc vô trùng, sẵn sàng để sử dụng
pH 7,0 – 7,6


Ứng dụng điển hình
EMEM hỗ trợ nuôi cấy nhiều dòng tế bào động vật có vú khác nhau, bao gồm HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 và nhiều tế bào nguyên phát. Các ứng dụng phổ biến bao gồm:

Bảo dưỡng và nhân giống thường xuyên các dòng tế bào bám dính
Quy trình nhân giống virus và sản xuất vắc-xin
Ứng dụng đánh giá độc tính tế bào và thử nghiệm sinh học
Các nghiên cứu về chuyển gen và biểu hiện protein
Nghiên cứu cơ bản về sinh học tế bào và sinh học phân tử

Để tế bào phát triển tối ưu, EMEM thường được bổ sung 5–10 % huyết thanh bò thai (FBS) và, tùy thuộc vào dòng tế bào, các axit amin không thiết yếu (NEAA) và kháng sinh như penicillin/streptomycin.

Xử lý & Bảo quản
Bảo quản chai chưa mở ở nhiệt độ +2 °C đến +8 °C, tránh ánh sáng. Sau khi mở, sử dụng trong điều kiện vô trùng. L-Glutamine trong dung dịch có thể bị phân hủy dần – chúng tôi khuyên bạn nên sử dụng môi trường trong vòng 4 tuần sau khi mở để đạt hiệu quả tốt nhất, hoặc bổ sung L-glutamine mới trước khi sử dụng nếu bảo quản trong thời gian dài hơn. Để môi trường ấm lên đến 37 °C trước khi thêm vào tế bào.

Chất lượng
Được sản xuất theo các tiêu chuẩn chất lượng nghiêm ngặt. Mỗi lô sản phẩm đều được kiểm tra độ vô trùng, pH, độ thẩm thấu và nồng độ nội độc tố để đảm bảo hiệu suất ổn định trong các ứng dụng nuôi cấy tế bào.

Thông số kỹ thuật



Thông số
Chi tiết



Loại sản phẩmMEM
Danh mục sản phẩmMôi trường nuôi cấy tế bào
Định dạngDạng lỏng
Vô trùngCó
Dung tích500 ml
L-GlutamineCó chứa L-glutamine (2 mM)
GlucoseCó chứa glucose (1,0 g/L)
Natri bicacbonatCó NaHCO3 (2,2 g/L)
HEPESKhông có HEPES
Pyruvate natriKhông có natri pyruvate
Phenol redCó phenol red
Dung dịch muốiDung dịch muối cân bằng Earle (EBSS)
pH7,0 – 7,6
Hàm lượng endotoxinKhông quy định
Bảo quản+2 °C đến +8 °C



Công thức (Thành phần trên mỗi lít)



Thành phần
Nồng độ (mg/L)




Muối vô cơ


Canxi clorua · 2H₂O265,00
Magie sunfat97,72
Clorua kali400,00
Natri clorua6.800,00
Natri dihydrogen photphat, khan122,00
Natri bicacbonat (NaHCO3)2.200,00


Axit amin

L-Arginine · HCl126,00
L-Cystine · 2HCl31,30
L-Glutamine292,00
L-Histidine · HCl · H₂O42,00
L-Isoleucine52,00
L-Leucine52,00
L-Lysine · HCl72,50
L-Methionine15,00
L-Phenylalanine32,00
L-Threonine48,00
L-Tryptophan10,00
L-Tyrosine · 2Na · 2H₂O51,90
L-Valine46,00


Vitamin

D-Canxi pantothenate1,00
Choline clorua1,00
Axit folic1,00
Myo-inositol2,00
Nicotinamide1,00
Pyridoxal · HCl1,00
Riboflavin0,10
Thiamine · HCl1,00


Các thành phần khác

D(+)-Glucose1.000,00
Phenol đỏ10,00

Ham's F-12 Medium, còn được gọi là Ham's F-12 Nutrient Mix, là một môi trường cơ bản được sử dụng rộng rãi, được thiết kế đặc biệt cho nuôi cấy tế bào. Nó đã được sử dụng rộng rãi cho việc gieo tế bào đơn lẻ không chứa huyết thanh của tế bào buồng trứng chuột Trung Quốc (CHO), tế bào phổi và tế bào L của chuột. Ngoài ra, Ham's F-12 là môi trường được lựa chọn cho thử nghiệm độc tính dòng tế bào (CTA).
Một trong những ưu điểm nổi bật của nó là khả năng hỗ trợ sự phát triển của tế bào mà không cần bổ sung huyết thanh. Điều này loại bỏ sự can thiệp tiềm ẩn do các thành phần huyết thanh gây ra, đảm bảo kết quả thí nghiệm nhất quán và đáng tin cậy. Bằng cách cung cấp môi trường nuôi cấy không chứa huyết thanh, Ham's F-12 Medium mang lại cho các nhà nghiên cứu sự kiểm soát tốt hơn trong các nghiên cứu của họ.
Một đặc điểm quan trọng khác của Ham's F-12 Medium là tính phù hợp cho việc gieo tế bào đơn lẻ. Điều này khiến nó trở thành lựa chọn tuyệt vời cho nhiều dòng tế bào, bao gồm tế bào CHO, tế bào phổi và tế bào L của chuột. Thành phần dinh dưỡng tối ưu của môi trường giúp tế bào bám dính và phát triển hiệu quả, cho phép thiết lập các văn hóa tế bào đồng nhất với độ tái hiện cao.
Hơn nữa, Ham's F-12 Medium đã được công nhận là môi trường ưa thích cho thử nghiệm độc tính clonal (CTA). Thử nghiệm này đóng vai trò quan trọng trong việc đánh giá tác động độc tế bào của các chất lên tế bào. Bằng cách sử dụng Ham's F-12 Medium trong CTA, các nhà nghiên cứu có thể đánh giá chính xác tác động của các hợp chất hoặc liệu pháp lên các tế bào đơn lẻ, cung cấp những thông tin quý giá về hồ sơ độc tính.
Kiểm soát chất lượng

pH = 7.2 ± 0.02 ở 20-25°C.
Mỗi lô đã được kiểm tra về độ vô trùng và sự vắng mặt của mycoplasma và vi khuẩn.

Bảo quản

Bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ +2°C đến +8°C trong điều kiện tối. Việc đông lạnh và làm ấm lên đến +37°C sẽ làm giảm chất lượng sản phẩm.
Không làm nóng môi trường lên trên 37°C hoặc sử dụng nguồn nhiệt không kiểm soát được (ví dụ: lò vi sóng).
Nếu chỉ sử dụng một phần của môi trường, hãy lấy lượng cần thiết ra khỏi chai và làm ấm ở nhiệt độ phòng.
Thời hạn sử dụng của bất kỳ môi trường nào ngoại trừ môi trường cơ bản là 8 tuần kể từ ngày sản xuất.

Thành phần




Thành phần
mg/L


Muối vô cơ
Clorua canxi x 2H₂O
44,0



Sunfat đồng(II) x 5H₂O
0,00



Sulfat sắt (II) x 7H₂O
0,83



Clorua magiê x 6H₂O
122,0



Clorua kali
223,65



Natri clorua
7599,00



di-natri hydrophosphatkhông nước
142,04



Kẽm sunfat x 7H₂O
0,86


Các thành phần khác
D(+)-Glucose khan
1801,60



Hypoxanthine
4,08



Axit linoleic
0,08



DL-α-Axit lipoic
0,21



Phenol đỏ
1,20



Putrescine x 2HCl
0,16



Natri pyruvate
110,00



Thymidine
0,73



NaHCO₃
1176,00


Axit amin
L-Alanine
8,91



L-Arginine x HCl
210,70



L-Asparagine x H₂O
15,01



L-Axit aspartic
13,31



L-Cysteine x HCl x H₂O
35,12



L-Alanyl-L-Glutamine
217,30



Axit glutamic L
14,71



Glycine
7,51



L-Histidine x HCl x H₂O
20,96



L-Isoleucine
3,94



L-Leucine
13,12



L-Lysine x HCl
36,54



L-Methionine
4,48



L-Phenylalanine
4,96



L-Proline
34,53



L-Serine
10,51



L-Threonine
11,91



L-Tryptophan
2,04



L-Tyrosine
5,44



L-Valine
11,71


Vitamin
D(+)-Biotin
0,01



D-Canxi pantothenate
0,24



Clorua choline
13,96



Axit folic
1,32



myo-Inositol
18,02



Nicotinamide
0,04



Pyridoxine x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Thiamine x HCl
0,34



Vitamin B12
1,36

DMEM:Ham's F12 là một môi trường cơ bản được công nhận rộng rãi và sử dụng phổ biến trong nuôi cấy tế bào phục vụ nghiên cứu sinh học. Nó đóng vai trò là nguồn dinh dưỡng cơ bản cho sự phát triển của các dòng tế bào động vật có vú khác nhau, đặc biệt khi được bổ sung huyết thanh bò thai (FBS).

Công thức độc đáo này kết hợp môi trường Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) và Ham's F-12 (Hỗn hợp Dinh dưỡng Ham's F-12) theo tỷ lệ chính xác 1:1. Việc bổ sung L-glutamine giúp nâng cao thành phần của nó.

DMEM, được phát triển từ Dung dịch Thiết yếu Tối thiểu của Eagle (EMEM), cung cấp nồng độ axit amin và vitamin cao hơn so với phiên bản tiền thân. Ngược lại, Ham's F-12 dựa trên dung dịch Ham's F-10, cung cấp một bộ thành phần thiết yếu bổ sung.

Để hỗ trợ sự phát triển tối ưu của tế bào, thông thường người ta bổ sung FBS vào DMEM:Ham's F12 với nồng độ điển hình là 5-10%. Việc bổ sung này là cần thiết vì môi trường thiếu các hormone tăng trưởng, lipid và protein quan trọng cho sự phát triển của tế bào.

DMEM:Ham's F12 kết hợp hệ thống đệm pH và thường được bổ sung phenol red, một chất chỉ thị pH. Các tế bào nuôi cấy trong DMEM:Ham's F12, hoặc bất kỳ môi trường nào sử dụng hệ thống đệm bicarbonate, đều yêu cầu môi trường CO2 được kiểm soát ở mức 5-10% để duy trì mức pH thích hợp. 


Kiểm soát chất lượng

Lọc vô trùng


Bảo quản và thời hạn sử dụng

Bảo quản ở nhiệt độ +2°C đến +8°C, tránh ánh sáng.
Sau khi mở nắp, bảo quản ở 4°C và sử dụng trong vòng 6–8 tuần.


Điều kiện vận chuyển

Nhiệt độ môi trường


Bảo quản

Bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ từ +2°C đến +8°C trong điều kiện tối. Tránh để đông lạnh và làm ấm thường xuyên lên đến +37°C, vì điều này làm giảm chất lượng sản phẩm.
Không làm nóng môi trường nuôi cấy quá 37°C hoặc sử dụng các nguồn nhiệt không kiểm soát được như lò vi sóng.
Nếu chỉ sử dụng một phần môi trường, hãy lấy lượng cần thiết và làm ấm đến nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.


Thành phần



Loại
Thành phần
Nồng độ (mg/L)


Axit amin
Glycine
18,75


L-Alanine
4,45


L-Arginine HCl
147,50


L-Asparagine H₂O
7,50


Axit L-Aspartic
6,65


L-Cysteine HCl H₂O
17,56


L-Cystine 2 HCl
31,29


Axit L-Glutamic
7,35


L-Glutamine
365,00


L-Histidine HCl H₂O
31,48


L-Isoleucine
54,47


L-Leucine
59,05


L-Lysine HCl
91,25


L-Methionine
17,24


L-Phenylalanine
35,48


L-Proline
17,25


L-Serine
26,25


L-Threonine
53,45


L-Tryptophan
9,02


L-Tyrosine 2 Na 2 H₂O
55,79


L-Valine
52,85


Vitamin
D-Biotin
0,0035


Choline clorua
8,98


D-Canxi Pantothenate
2,24


Axit folic
2,66


Myo-Inositol
12,60


Nicotinamide
2,02


Pyridoxine HCl
0,031


Pyridoxal HCl
2,00


Riboflavin
0,219


Thiamine HCl
2,17


Vitamin B12
0,68



Muối vô cơ
CaCl₂·2H₂O
154,50


CuSO₄ 5 H₂O
0,0013


Fe(NO₃)₃·9H₂O
0,05


FeSO₄·7H₂O
0,417


KCl
311,80


MgCl₂ 6 H₂O
61,20


MgSO₄ 7 H₂O
100,00


NaCl
6996,00


NaHCO3
1200,00


Na₂HPO₄
71,02


NaH₂PO₄·2H₂O
70,87


ZnSO₄ 7 H₂O
0,432



Các thành phần khác
D-Glucose
3151,00


Hypoxanthine
2,40


HEPES
3574,50


Axit linoleic
0,042


Axit lipoic
0,105


Muối natri của Phenol Red
8,63


Putrescine 2 HCl
0,081


Pyruvate natri
55,00


Thymidine
0,365

Giới thiệu Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, một phiên bản cải tiến chuyên biệt của Ham's F-12 medium, được thiết kế để đáp ứng các yêu cầu đặc thù của nghiên cứu sinh học. Loại môi trường tiên tiến này mang lại những ưu điểm nổi bật, giúp tối ưu hóa quá trình nuôi cấy tế bào gan người nguyên phát, cũng như tế bào gan chuột và gà, đặc biệt trong điều kiện giảm huyết thanh.

Ham's F-12K (Kaighn's) Medium được pha chế cẩn thận để tối ưu hóa điều kiện nuôi cấy tế bào. Nó có thành phần giàu dưỡng chất, cung cấp mức độ cao của các thành phần thiết yếu như axit amin và natri pyruvate, cùng với các yếu tố bổ sung bao gồm putrescine, thymidine, hypoxanthine và kẽm. Những thành phần này cho phép các nhà nghiên cứu bổ sung môi trường với lượng huyết thanh hoặc thành phần định nghĩa tối thiểu cho các loại tế bào cụ thể, giúp tạo ra điều kiện thí nghiệm chính xác.

Đáng chú ý, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium không chứa protein hoặc yếu tố tăng trưởng. Do đó, việc bổ sung yếu tố tăng trưởng và huyết thanh bò non (FBS) thường là cần thiết, cho phép các nhà nghiên cứu điều chỉnh môi trường nuôi cấy phù hợp với yêu cầu của từng dòng tế bào cụ thể. Để đạt hiệu suất tối ưu, nồng độ FBS phải được tối ưu hóa cẩn thận cho từng dòng tế bào, đảm bảo sự phát triển và chức năng tối ưu.

Để duy trì pH sinh lý, môi trường Ham's F-12K (Kaighn's) sử dụng hệ đệm natri bicacbonat (2,5 g/L), yêu cầu môi trường CO₂ được kiểm soát ở mức 5-10% trong quá trình nuôi cấy. Điều này đảm bảo pH của môi trường nằm trong phạm vi lý tưởng cho sự phát triển và khả năng sống sót của tế bào
Kiểm soát chất lượng

pH = 7.2 ± 0.02 ở 20-25°C.
Mỗi lô đã được kiểm tra về độ vô trùng và không chứa mycoplasma và vi khuẩn.

Bảo quản

Bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ +2°C đến +8°C trong điều kiện tối. Việc đông lạnh hoặc làm ấm lên đến +37°C sẽ làm giảm chất lượng sản phẩm.
Không làm nóng môi trường lên trên 37°C hoặc sử dụng các nguồn nhiệt không kiểm soát được (ví dụ: lò vi sóng).
Nếu chỉ sử dụng một phần môi trường, hãy lấy lượng cần thiết ra khỏi chai và làm ấm ở nhiệt độ phòng.
Thời hạn sử dụng của bất kỳ môi trường nào (trừ môi trường cơ bản) là 8 tuần kể từ ngày sản xuất.

Thành phần




Thành phần
mg/L


Muối vô cơ
Canxi clorua x 2H₂O
135,24



Sunfat đồng (II) x 5H₂O
0,00



Sulfat sắt (II) x 7H₂O
0,83



Clorua magiê x 6H₂O
105,72



Magie sunfat x 7H₂O
394,49



Clorua kali
283,29



Phosphat kali dihydrogen
58,52



Natri clorua
7597,20



di-natri hydroxit photphatkhông nước
115,02



Kẽm sunfat x 7H₂O
0,14


Các thành phần khác
D(+)-Glucose khan
1260,00



Hypoxanthine
4,08



DL-α-Axit lipoic
0,21



Phenol đỏ
3,00



Putrescine x 2HCl
0,32



Natri pyruvate
220,0



NaHCO₃
2500,00



Thymidine
0,73


Axit amin
L-Alanine
17,82



L-Arginine x HCl
421,40



L-Asparagine x H₂O
30,02



L-Axit aspartic
26,62



L-Cysteine x HCl x H₂O
70,24



L-Glutamine
292,20



L-Glutamic acid
29,42



Glycine
15,01



L-Histidine x HCl x H₂O
41,92



L-Isoleucine
7,87



L-Leucine
26,24



L-Lysine x HCl
73,04



L-Methionine
8,95



L-Phenylalanine
9,91



L-Proline
69,06



L-Serine
21,02



L-Threonine
23,82



L-Tryptophan
4,08



L-Tyrosine
10,87



L-Valine
23,42


Vitamin
D(+)-Biotin
0,07



D-Canxi pantothenate
0,48



Clorua choline
13,96



Axit folic
1,32



myo-Inositol
18,02



Nicotinamide
0,04



Pyridoxine x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Thiamine x HCl
0,34



Vitamin B12
1,36

McCoy's 5A Medium là một môi trường nuôi cấy chuyên dụng và được khuyến nghị cao, được thiết kế để thúc đẩy sự phát triển và nhân lên của virus trong các dòng tế bào nguyên phát. Nó đã nhận được sự công nhận đáng kể nhờ hiệu suất xuất sắc trong nhiều ứng dụng nghiên cứu sinh học. Một ứng dụng nổi bật của McCoy's 5A Medium là việc sử dụng nó trong nuôi cấy các dòng tế bào ung thư đại tràng của người. Cụ thể, nó đã được sử dụng trong nghiên cứu về thụ thể G-protein liên kết với lặp lại leucine (LGR5) và vai trò của nó trong quá trình di căn của ung thư đại tràng. Môi trường này đã được sử dụng hiệu quả trong việc nuôi cấy nhiều dòng tế bào ung thư đại tràng, bao gồm HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b và TENN, giúp các nhà nghiên cứu đi sâu vào các cơ chế cơ bản của quá trình di căn ung thư đại tràng. Ngoài ứng dụng trong nghiên cứu ung thư, McCoy's 5A Medium đã chứng minh là không thể thiếu trong nghiên cứu về osteoblasts. Các nhà nghiên cứu điều tra phản ứng ion của hydroxyapatite thiếu canxi trong môi trường nuôi cấy tế bào tiêu chuẩn đã sử dụng môi trường này để nuôi cấy osteoblasts. Ứng dụng này đã giúp hiểu rõ hơn về tương tác giữa osteoblasts và hydroxyapatite thiếu canxi, góp phần vào sự phát triển trong lĩnh vực nghiên cứu xương. McCoy's 5A Medium được điều chế cẩn thận bằng cách điều chỉnh các axit amin có trong Basal Medium Eagle để cung cấp hỗ trợ tối ưu cho tế bào ung thư gan. Công thức giàu dinh dưỡng này cho phép nó phù hợp với nhiều dòng tế bào đã được thiết lập cũng như tế bào nguyên phát, từ đó nâng cao tính linh hoạt và ứng dụng của nó trong các môi trường nghiên cứu khác nhau. McCoy's 5A Medium mở rộng tác dụng sinh hóa và sinh lý của nó vượt ra ngoài tế bào ung thư gan. Nó đã được sử dụng thành công để hỗ trợ sự phát triển trong các văn hóa nguyên phát của tủy xương, da, nướu, thận, mạc treo, tuyến thượng thận, phổi, lách, phôi chuột và các loại tế bào khác. Phạm vi ứng dụng rộng rãi này chứng minh tính hữu dụng đa dạng của McCoy's 5A Medium trong việc hỗ trợ sự phát triển và duy trì các loại tế bào khác nhau cho nghiên cứu sinh học toàn diện. Công thức McCoy's 5A Medium (đã điều chỉnh) chứa 3,0 g/L glucose, glutamine ổn định, 2,0 mM natri pyruvate và 2,2 g/L NaHCO₃. Kiểm soát chất lượng pH = 7,2 ± 0,02 ở 20-25°C.  Mỗi lô đã được kiểm tra về độ vô trùng và không chứa mycoplasma và vi khuẩn. Bảo quản Bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ +2°C đến +8°C trong điều kiện tối. Việc đông lạnh và làm ấm lên đến +37°C có thể làm giảm chất lượng sản phẩm.  Không làm nóng môi trường lên trên 37°C hoặc sử dụng nguồn nhiệt không kiểm soát được (ví dụ: lò vi sóng).  Nếu chỉ sử dụng một phần môi trường, hãy lấy lượng cần thiết ra khỏi chai và làm ấm ở nhiệt độ phòng. Thời hạn sử dụng của bất kỳ môi trường nào (trừ môi trường cơ bản) là 6 đến 8 tuần kể từ ngày mở nắp. Thành phần Thành phần mg/L Muối vô cơCanxi clorua x 2H₂O132.00 Magie sunfat97,67 Clorua kali400.00 Natri clorua6.460,00 Disodium hydrogen phosphate (không nước)504.00 Các thành phần khácD(+)-Glucose (không nước)3.000,00 Glutathione (giảm)0,50 Peptone thịt600.00 Muối natri phenol đỏ11.00 Axit aminL-Alanine13.36 L-Arginine x HCl42.14 L-Asparagine x H₂O45,03 L-Axit aspartic19,97 L-Cysteine x HCl x H₂O31,75 L-Glutamine (ổn định)219,15 Axit glutamic L22,07 Glycine7,51 L-Histidine x HCl x H₂O20,96 L-Hydroxyproline19,67 L-Isoleucine39,36 L-Leucine39,36 L-Lysine x HCl36,54 L-Methionine14,92 L-Phenylalanine16,52 L-Proline17,27 L-Serine26,28 L-Threonine17,87 L-Tryptophan3,06 Muối disodium của L-Tyrosine26,10 L-Valine17,57 VitaminAxit p-aminobenzoic1.00 Axit ascorbic0,56 D(+)-Biotin0.2 D-Canxi pantothenate0.2 Clorua choline5.0 Axit folic10.00 myo-Inositol36.00 Nicotinamide0.50 Axit nicotinic0.50 Pyridoxal HCl0.50 Pyridoxine HCl0.50 Riboflavin0.20 Thiamine HCl0.20 Vitamin B122.0

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) là một môi trường nuôi cấy tế bào phức tạp và giàu dinh dưỡng. IMDM là phiên bản cải tiến của DMEM, chứa selen và có thêm các axit amin, vitamin và muối vô cơ so với DMEM. Nó không chứa sắt và cần bổ sung huyết thanh bò non (FBS). IMDM sử dụng hệ đệm natri bicacbonat và yêu cầu môi trường CO2 5-10% để duy trì pH sinh lý.
IMDM rất phù hợp cho các dòng tế bào phát triển nhanh và có mật độ cao, bao gồm Jurkat, COS-7 và tế bào đại thực bào. Các biến thể khác nhau của IMDM dành cho các ứng dụng nuôi cấy tế bào khác nhau có thể được tìm thấy thông qua công cụ chọn môi trường nuôi cấy. Môi trường nuôi cấy lỏng cung cấp các chất dinh dưỡng thiết yếu cho tất cả các ứng dụng nuôi cấy tế bào. Mỗi loại môi trường nuôi cấy tế bào chất lượng cao của chúng tôi được sản xuất theo công thức ban đầu được công bố hoặc các biến thể cần thiết để đảm bảo hiệu suất và độ ổn định nhất quán của môi trường nuôi cấy.
IMDM so với DMEM
IMDM chứa kali nitrat thay vì sắt nitrat, cùng với HEPES và natri pyruvate. Các thành phần bổ sung trong IMDM khiến nó phù hợp hơn cho các loại tế bào chuyên biệt và các ứng dụng cụ thể so với DMEM.
IMDM so với RPMI
IMDM và RPMI có công thức khác nhau có thể liên quan đến kích thích bằng PMA/ionomycin. Một sự khác biệt đáng kể là nồng độ Ca2+. Trong khi RPMI chứa 0,42 mM Ca2+, IMDM chứa 1,49 mM.
Kiểm soát chất lượng

pH = 7.2 ± 0.02 ở 20-25°C.
Mỗi lô đã được kiểm tra về độ vô trùng và sự vắng mặt của mycoplasma và vi khuẩn.

Bảo quản

Bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ +2°C đến +8°C trong điều kiện tối. Việc đông lạnh và làm ấm lên đến +37°C có thể làm giảm chất lượng sản phẩm.
Không làm nóng môi trường lên trên 37°C hoặc sử dụng nguồn nhiệt không kiểm soát được (ví dụ: lò vi sóng).
Nếu chỉ sử dụng một phần môi trường, hãy lấy lượng cần thiết ra khỏi chai và làm ấm ở nhiệt độ phòng.
Thời hạn sử dụng của bất kỳ môi trường nào ngoại trừ môi trường cơ bản là 8 tuần kể từ ngày sản xuất.
Thành phần




Thành phần
mg/L


Muối vô cơ
Canxi clorua x 2 H₂O
219,0



Clorua kali
330,00



Kali nitrat
0.076



Magie sunfat khan
97,73



Natri clorua
4.505,00



Natri dihydrogen photphat khan
109,00



Natri selenit
0,02


Các thành phần khác
D(+)-Glucose khan
4.500,00



HEPES
5.958,00



Natri pyruvate
110,00



Phenol red
15,00


Axit amin
L-Alanine
25,00



L-Arginine x HCl
84,0



L-Asparagine x H₂O
25,0



L-Axit aspartic
30,0



L-Cystine x 2HCl
91,24



L-Glutamine
584,00



L-Glutamic acid
75,00



Glycine
30,0



L-Histidine x HCl x H₂O
42,0



L-Isoleucine
104,80



L-Leucine
104,80



L-Lysine x HCl
146,20



L-Methionine
30,0



L-Phenylalanine
66,0



L-Proline
40,00



L-Serine
42,00



L-Threonine
95,20



L-Tryptophan
16,00



L-Tyrosine x 2Na
104,20



L-Valine
93,60


Vitamin
D(+)-Biotin
0.013



D-Canxi pantothenate
4,00



Clorua choline
4,0



Axit folic
4,0



myo-Inositol
7,20

RPMI 1640 Medium, còn được gọi là RPMI medium, là một loại môi trường nuôi cấy tế bào đa năng được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu sinh học để nuôi cấy các loại tế bào động vật có vú khác nhau. Môi trường này được phát triển bởi George E. Moore, Robert E. Gerner và H. Addison Franklin vào năm 1966 tại Trung tâm Ung thư Toàn diện Roswell Park nổi tiếng, và tên của nó được đặt theo nguồn gốc từ Viện Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Ban đầu được thiết kế để hỗ trợ sự phát triển của các tế bào ung thư bạch cầu người trong cả môi trường nuôi cấy treo lơ lửng và lớp đơn, RPMI 1640 Medium đã được các nhà nghiên cứu và nhà cung cấp thương mại điều chỉnh để phù hợp với nhiều loại tế bào động vật có vú khác nhau. Nó đặc biệt tương thích với các dòng tế bào như HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, tế bào sao và tế bào ung thư.
RPMI 1640 Medium nổi bật so với các môi trường nuôi cấy tế bào khác nhờ thành phần độc đáo. Nó chứa lượng lớn phosphate, axit amin và vitamin. Đáng chú ý, nó bao gồm biotin, vitamin B12 và PABA, những thành phần không có trong Eagle's Minimal Essential Medium hoặc Dulbecco's Modified Eagle Medium. Hơn nữa, RPMI 1640 Medium có nồng độ vitamin inositol và choline cao hơn đáng kể. Tuy nhiên, nó không chứa protein, lipid hoặc yếu tố tăng trưởng. Do đó, việc bổ sung 10% huyết thanh bò non (FBS) thường được yêu cầu để tạo điều kiện tối ưu cho sự phát triển của tế bào.
Hệ thống đệm của RPMI 1640 dựa trên natri bicacbonat và yêu cầu môi trường CO2 từ 5-10% để duy trì pH phù hợp với sinh lý. Việc bổ sung chất khử glutathione cũng là điểm khác biệt của môi trường này so với các loại khác.
Kiểm soát chất lượng

Lọc vô trùng


Bảo quản và thời hạn sử dụng

Bảo quản ở nhiệt độ +2°C đến +8°C, tránh ánh sáng.
Sau khi mở, bảo quản ở 4°C và sử dụng trong vòng 6–8 tuần.


Điều kiện vận chuyển

Nhiệt độ môi trường


Bảo quản

Bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ từ +2°C đến +8°C trong điều kiện tối. Tránh đông lạnh và làm ấm thường xuyên lên +37°C, vì điều này làm giảm chất lượng sản phẩm.
Không làm nóng môi trường vượt quá 37°C hoặc sử dụng các nguồn nhiệt không kiểm soát như lò vi sóng.
Nếu chỉ sử dụng một phần môi trường, hãy lấy lượng cần thiết và làm ấm đến nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.



Thành phần




Loại
Thành phần
Nồng độ (mg/L)


Axit amin
Glycine
10.00



L-Alanyl-L-Glutamine
434.40



L-Arginine
200.00



L-AsparagineH₂O
56.82



Axit L-Aspartic
20.00



L-Cystine 2HCl
65.20



Axit glutamic L
20.00



L-Histidine HClH₂O
20.27



L-Hydroxy-L-Proline
20.00



L-Isoleucine
50.0



L-Leucine
50.00



L-Lysine HCl
40.00



L-Methionine
15.00



L-Phenylalanine
15.00



L-Proline
20.00



L-Serine
30.00



L-Threonine
20.00



L-Tryptophan
5.00



L-Tyrosine 2Na2H₂O
28.83



L-Valine
20.00


Vitamin
axit p-Amino Benzoic
1.00



D-Biotin
0.20



Clorua choline
3.00



D-Canxi Pantothenate
0.25



Axit folic
1.00



myo-Inositol
35.0



Nicotinamide
1.00



Pyridoxine HCl
1.00



Riboflavin
0.20



Thiamine HCl
1.00



VitaminB12
0.005


Muối vô cơ
Ca(NO₃)₂·4H₂O
100.00



KCl
400.0



MgSO₄7H₂O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO₃
2000.00



Na₂HPO₄
800.00


Các thành phần khác
D-Glucose
2000.00



L-Glutathione đã khử
1.00



Muối natri của Phenol Red
5.30