DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃
DMEM:Ham's F12 là một môi trường cơ bản được công nhận rộng rãi và sử dụng phổ biến trong nuôi cấy tế bào phục vụ nghiên cứu sinh học. Nó đóng vai trò là nguồn dinh dưỡng cơ bản cho sự phát triển của các dòng tế bào động vật có vú khác nhau, đặc biệt khi được bổ sung huyết thanh bò thai (FBS).
Công thức độc đáo này kết hợp môi trường Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) và Ham's F-12 (Hỗn hợp Dinh dưỡng Ham's F-12) theo tỷ lệ chính xác 1:1. Việc bổ sung L-glutamine giúp nâng cao thành phần của nó.
DMEM, được phát triển từ Dung dịch Thiết yếu Tối thiểu của Eagle (EMEM), cung cấp nồng độ axit amin và vitamin cao hơn so với phiên bản tiền thân. Ngược lại, Ham's F-12 dựa trên dung dịch Ham's F-10, cung cấp một bộ thành phần thiết yếu bổ sung.
Để hỗ trợ sự phát triển tối ưu của tế bào, thông thường người ta bổ sung FBS vào DMEM:Ham's F12 với nồng độ điển hình là 5-10%. Việc bổ sung này là cần thiết vì môi trường thiếu các hormone tăng trưởng, lipid và protein quan trọng cho sự phát triển của tế bào.
DMEM:Ham's F12 kết hợp hệ thống đệm pH và thường được bổ sung phenol red, một chất chỉ thị pH. Các tế bào nuôi cấy trong DMEM:Ham's F12, hoặc bất kỳ môi trường nào sử dụng hệ thống đệm bicarbonate, đều yêu cầu môi trường CO2 được kiểm soát ở mức 5-10% để duy trì mức pH thích hợp.
Kiểm soát chất lượng
- Lọc vô trùng
Bảo quản và thời hạn sử dụng
- Bảo quản ở nhiệt độ +2°C đến +8°C, tránh ánh sáng.
- Sau khi mở nắp, bảo quản ở 4°C và sử dụng trong vòng 6–8 tuần.
Điều kiện vận chuyển
- Nhiệt độ môi trường
Bảo quản
- Bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ từ +2°C đến +8°C trong điều kiện tối. Tránh để đông lạnh và làm ấm thường xuyên lên đến +37°C, vì điều này làm giảm chất lượng sản phẩm.
- Không làm nóng môi trường nuôi cấy quá 37°C hoặc sử dụng các nguồn nhiệt không kiểm soát được như lò vi sóng.
- Nếu chỉ sử dụng một phần môi trường, hãy lấy lượng cần thiết và làm ấm đến nhiệt độ phòng trước khi sử dụng.
Thành phần
| Loại | Thành phần | Nồng độ (mg/L) |
| Axit amin | Glycine | 18,75 |
| L-Alanine | 4,45 | |
| L-Arginine HCl | 147,50 | |
| L-Asparagine H₂O | 7,50 | |
| Axit L-Aspartic | 6,65 | |
| L-Cysteine HCl H₂O | 17,56 | |
| L-Cystine 2 HCl | 31,29 | |
| Axit L-Glutamic | 7,35 | |
| L-Glutamine | 365,00 | |
| L-Histidine HCl H₂O | 31,48 | |
| L-Isoleucine | 54,47 | |
| L-Leucine | 59,05 | |
| L-Lysine HCl | 91,25 | |
| L-Methionine | 17,24 | |
| L-Phenylalanine | 35,48 | |
| L-Proline | 17,25 | |
| L-Serine | 26,25 | |
| L-Threonine | 53,45 | |
| L-Tryptophan | 9,02 | |
| L-Tyrosine 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-Valine | 52,85 | |
| Vitamin | D-Biotin | 0,0035 |
| Choline clorua | 8,98 | |
| D-Canxi Pantothenate | 2,24 | |
| Axit folic | 2,66 | |
| Myo-Inositol | 12,60 | |
| Nicotinamide | 2,02 | |
| Pyridoxine HCl | 0,031 | |
| Pyridoxal HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Thiamine HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Muối vô cơ | CaCl₂·2H₂O | 154,50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄·7H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄ 7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0,432 | |
| Các thành phần khác | D-Glucose | 3151,00 |
| Hypoxanthine | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Axit linoleic | 0,042 | |
| Axit lipoic | 0,105 | |
| Muối natri của Phenol Red | 8,63 | |
| Putrescine 2 HCl | 0,081 | |
| Pyruvate natri | 55,00 | |
| Thymidine | 0,365 |