U2OS-CRISPR-NUP96-mMaple細胞

€800.00*

製品はドライアイスで凍結保存された状態でクライオチューブにて出荷されます。各クライオチューブには通常、付着性細胞株の場合3×10⁶細胞、浮遊性細胞株の場合5×10^⁶ 細胞が含まれます（詳細はバッチごとのCoAを参照）。

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cryovial

製品番号 300461

安全データシート

製品シート

分析証明書（CoA）

第三者協定

説明	U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMapleは、ヒトU-2 OS細胞株由来の遺伝子改変骨肉腫細胞株であり、その強固な増殖特性と様々な生物学的研究における有用性で知られている。このクローンは、CRISPR/Cas9遺伝子編集技術を用いて、光変換可能な蛍光タンパク質であるmMapleをNUP96遺伝子に組み込むように改変されている。mMapleタンパク質は、ライブセルイメージングや超解像顕微鏡などの高度なイメージング技術を可能にし、核膜を介した核膜孔複合体（NPC）の挙動や細胞の輸出入機構に関するダイナミックな知見を提供する。 NPCの重要な構成要素をコードするNUP96遺伝子は、核細胞質輸送に不可欠である。NUP96の変化は、輸送機構だけでなく、核の全体的な構造と機能にも影響を及ぼす可能性がある。したがってこの細胞株は、NPC関連の病態や、細胞代謝とシグナル伝達における核輸送の役割を研究するための優れたモデルとして役立つ。mMapleをNUP96に組み込むことで、NUP96の動態をin vivoでリアルタイムに追跡・可視化することが可能になり、細胞核研究に焦点をあてる研究者や、がんやウイルス感染などの疾患におけるNPC機能不全の意味を探求する研究者にとって不可欠なツールとなる。特殊なツールとして、U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMapleクローンNo.16は高解像度イメージングをサポートし、NPC成分の空間的および時間的分布に関する実質的なデータを提供します。生理学的および病理学的条件下での遺伝子発現、タンパク質局在、核輸送の詳細な解析を必要とする実験に特に有用であり、分子レベルでの細胞プロセスのより深い理解を促進する。
生物	人間
組織	骨
病気	骨肉腫

年齢	15年
性別	女性
エスニシティ	白人
成長特性	信者

引用	U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple (Cytion カタログ番号 300461)
バイオセーフティレベル	1
NCBI_TaxID	9606
セロサウルス・アクセション	CVCL_B7FK
預金者	エレンバーグ・ラボ（EMBL）
GMOステータス	GMO-S1：このヒト骨肉腫細胞株（U2OS-CRISPR-NUP96-mMaple、クローン16）は、CRISPRを介したNUP96-mMaple融合体を含んでおり、核膜孔構造の光変換可能な標識が可能である。この構築物は安定に存在する。この分類はドイツ国内でのみ適用され、他の地域では異なる可能性がある。

タンパク質発現	NUP96-mMaple（内在性核膜孔複合体タンパク質96、mMapleタグ付き）

培地	McCoys 5a、w：3.0g/L グルコース、w：安定グルタミン、w：2.0mM ピルビン酸ナトリウム、w：2.2g/L NaHCO3 (Cytion article number 820200a)
サプリメント	培地に10％FBS、1％NEAAを添加する。
解離試薬	アキュターゼ
サブカルチャー	接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度	1 × 10⁴ ^細胞/cm^²
フルード更新	週2～3回
フリーズ・ミディアム	凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地（FBSを含む）＋10％DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1（Cytionカタログ番号800100）を使用している。
細胞の解凍と培養	輸送中の最適温度を維持するため、細胞はドライアイスで輸送される。凍結バイアルを受け取ったら、細胞の完全性を保つために-150℃以下で直ちに保存するか、直ちに培養が必要な場合はステップ3に進む。直ちに培養する場合は、バイアルを清浄な水と抗菌剤を入れた37℃のウォーターバスに浸し、小さな氷の塊が残るまで40～60秒間静かに攪拌して速やかに融解する。凍結バイアルを開封する前に70％エタノールで消毒する。消毒したバイアルを注意深く開け、細胞懸濁液を8mlの室温培養液を入れた15ml遠心チューブに移し、穏やかに混ぜる。混合物を300 x gで3分間遠心して細胞を分離し、残留凍結培地を含む上清を注意深く捨てる。細胞ペレットを10mlの新しい培養液に静かに懸濁する。接着細胞の場合は、懸濁液を2つのT25培養フラスコに分け、懸濁培養の場合は、細胞の相互作用と増殖を効果的に促進するために、全ての培地を1つのT25培養フラスコに移す。細胞株の継続的な増殖と維持のため、確立された継代培養プロトコールに従い、信頼できる実験結果を確保する。
インキュベーションの雰囲気	37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。
フラスコ・コーティング	解凍後の最適な接着と生存率を得るためには、コラーゲンコートフラスコまたはプレートの使用を推奨する。
凍結手順	凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。
配送条件	凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。
保管条件	長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

不妊症	マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査を受けている。

ロット番号	証明書の種類	日付	カタログ番号
300461-210524	分析証明書	18. Aug. 2025	300461

この細胞株は、第三者との契約が必要であるため、標準的なサイシオンのMTAでは入手できないことにご注意ください。

U2OS-CRISPR-NUP96-mMaple細胞

一般情報

特徴

規制データ

生体分子データ

ハンドリング

品質管理／遺伝子プロファイル／HLA

分析証明書（CoA）

第三者協定