Accutase 細胞剥離液 - 100 ml
EDTAおよびフェノールレッド配合 Accutase 細胞剥離液 – 100 ml
Accutaseは、標準的な組織培養用プラスチック器具や接着コーティングされた表面から接着性哺乳類細胞を分離するために、トリプシン/EDTAに代わる穏やかな代替品として設計された、即用型の無菌ろ過済み細胞剥離液です。バランスのとれた塩溶液中にタンパク質分解酵素およびコラーゲン分解酵素の活性を組み合わせることで、効果的かつ制御された細胞分離を実現し、細胞表面タンパク質を保持するとともに、継代後の高い生存率と迅速な再付着をサポートします。
Accutaseの配合は、EDTAおよびpHの可視指標としてフェノールレッドを加えたダルベッコリン酸緩衝生理食塩水(DPBS)を基にしています。 酵素は非哺乳類および非細菌由来であるため、Accutaseは幹細胞研究、ワクチン開発ワークフロー、および動物由来または微生物由来の汚染物質を最小限に抑える必要があるあらゆる用途に特に適しています。本溶液は37°Cで自己阻害するため、剥離後に中和試薬や血清含有培地を必要とせず、細胞を新鮮な培地に直接移すことができます。
主な特徴
- 希釈や再構成が不要な、すぐに使用可能な1倍希釈の滅菌ろ過済み液
- 穏やかな解離を実現する、タンパク質分解酵素とコラーゲン分解酵素の複合活性
- ロット間の均一性を確保するため、各バッチの解離活性は規定値に標準化されています
- 非哺乳類および非細菌由来の酵素
- 37 °Cで自己阻害するため、中和溶液は不要
- EDTAを含むダルベッコPBSで調製
- 視覚的pH指示薬としてフェノールレッドを含有
- pH 6.8~7.8
代表的な用途
Accutase は、ヒト胚性幹細胞 (hESC)、ヒト誘導多能性幹細胞 (iPSC)、神経幹細胞、初代神経細胞、および HeLa、HEK 293、CHO、MDCK、Vero、NIH/3T3、BHK-21、A549 などの日常的に培養される接着性細胞株など、多種多様な接着性および感受性の高い細胞を穏やかに解離します。 代表的な用途には以下が含まれます:
- 接着性哺乳類細胞の日常的な継代およびパッシング
- hESC、iPS細胞、およびその他の感受性の高い細胞株の穏やかな単一細胞分離
- フローサイトメトリーおよびFACS解析のためのサンプル調製
- エピトープの完全性が重要な細胞表面マーカーの解析
- 細胞遊走、増殖、アポトーシスアッセイ
- 血清飢餓法による静止期アッセイおよび癌遺伝子導入研究
- 腫瘍細胞および神経堤細胞の遊走アッセイ
- バイオリアクターワークフローにおける生産スケールアップ
日常的な作業では、培養表面75 cm²あたり約10 mlのAccutaseを添加し、室温で5~10分間インキュベートします。最適なインキュベーション時間は各細胞株ごとに決定する必要があり、1時間を超えてはいけません。添加前に、残留血清および二価陽イオンを除去するため、カルシウムおよびマグネシウムを含まないDPBSなどのCa²⁺/Mg²⁺フリー塩溶液で細胞層を洗浄してください。
取り扱いおよび保存
未開封のボトルは、-15 °C以下で凍結保存してください。解凍は室温、または+2 °C~+8 °Cで一晩かけて行ってください。高温は酵素活性を低下させるため、37 °Cの水浴でAccutaseを解凍しないでください。解凍後、溶液は+2 °C~+8 °Cで最長2ヶ月間保存可能です。室温での保存は避けてください。 使用前に試薬を37 °Cまで予温しないでください。室温で洗浄済みの細胞に直接添加してください。長期保存のためには、繰り返しの解凍サイクルを避けるため、単回使用分への分注が推奨されます。常に無菌条件下で作業してください。
品質
厳格な品質基準に基づいて製造されています。Accutaseの各バッチは、無菌ろ過され、無菌性、pH、外観、および解離活性について試験されており、ロット間の性能の一貫性と再現性が確保されています。
製品仕様
| 仕様 | 詳細 |
|---|---|
| 製品タイプ | 細胞剥離/解離試薬 |
| 形態 | 滅菌ろ過済み液体、即用型 |
| 容量 | 100 ml |
| 使用濃度 | 1x(即用型) |
| 酵素活性 | タンパク質分解およびコラーゲン分解の複合作用 |
| 酵素の由来 | 非哺乳類および非細菌由来 |
| 緩衝液系 | EDTA含有ダルベッコPBS |
| pH指示薬 | フェノールレッド |
| pH範囲 | 6.8 – 7.8 |
| 外観 | 透明、淡紅色~橙色の溶液 |
| 保存温度 | -15 °C以下 |
| 解凍後の安定性 | +2 °C~+8 °Cで最大2ヶ月 |
| 推奨使用量 | 培養面積75 cm²あたり約10 ml |
| 標準的な培養時間 | 室温で5~10分 |
| 輸送条件 | ドライアイスで凍結 |
| 使用目的 | 研究用および製造用のみ |
製剤(1リットルあたりの組成)
| 成分 | 濃度 (mg/L) |
|---|---|
| 無機塩 | |
| 塩化ナトリウム(NaCl) | 8000.00 |
| リン酸水素二ナトリウム (Na2HPO4) | 1150.00 |
| 塩化カリウム (KCl) | 200.00 |
| リン酸二水素カリウム (KH₂PO₄) | 200.00 |
| その他の成分 | |
| EDTA・4Na(テトラナトリウムEDTA) | 220.00 |
| フェノールレッド | 3.00 |
| 独自配合酵素ブレンド(タンパク質分解活性およびコラーゲン分解活性) | 1x |
AccutaseはInnovative Cell Technologies, Inc.の登録商標です。