Tế bào Ramos - Nghiên cứu ung thư hạch B: Tầm quan trọng của tế bào Ramos
Tế bàoRamos là một dòng tế bào lympho B được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu y sinh. Đặc biệt, chúng được ứng dụng chủ yếu trong lĩnh vực miễn dịch học và nghiên cứu ung thư. Các nhà nghiên cứu sử dụng các tế bào này để đánh giá tác dụng của các thuốc gây độc tế bào, nghiên cứu kháng nguyên bề mặt của tế bào B, đột biến và cơ chế apoptosis.
Nguồn gốc và đặc điểm chung của dòng tế bào Ramoss
Hiểu rõ nguồn gốc và các đặc điểm cơ bản của một dòng tế bào đóng vai trò quan trọng trong việc quyết định tính phù hợp của nó cho nghiên cứu của bạn. Do đó, nên đánh giá kỹ lưỡng thông tin này trước khi bắt đầu bất kỳ công việc nào liên quan đến nó. Phần này trả lời các câu hỏi thường gặp sau: Dòng tế bào ung thư Ramos là gì? Dòng tế bào Ramos CD19 là gì? Dòng tế bào Ramos CD20 là gì? Nguồn gốc của tế bào Ramos là gì? Các dấu hiệu trên dòng tế bào Ramos là gì? Kích thước của tế bào Ramos là gì? Hình thái của dòng tế bào Ramos là gì?
- Dòng tế bào Ramos được thiết lập vào năm 1972. Các tế bào này được phân lập từ dịch ổ bụng của một bé trai da trắng 3 tuổi mắc bệnh lymphoma Burkitt kiểu Mỹ [1].
- Chúng biểu hiện các dấu hiệu chính của tế bào B, bao gồm immunoglobulin M (IgM), CD19, CD20 và CD22.
- Tế bào Ramos là tế bào âm tính với virus Epstein-Barr. Tuy nhiên, chúng có thể được chuyển đổi vĩnh viễn thành tế bào dương tính với virus Epstein-Barr.
- Các tế bào lymphoblast B này có hình dạng tròn.
Tế bào Ramos xanh so với tế bào Ramos B
Tế bào Ramos xanh và tế bào Ramos B đều là tế bào lymphoma Burkitt ở người. Cả hai đều âm tính với virus Epstein-Barr. Sự khác biệt giữa hai loại tế bào này là tế bào Ramos xanh biểu hiện gen báo cáo được kích hoạt bởi NF-κB/AP-1 gọi là SEAP (phosphatase kiềm phôi tiết ra), trong khi tế bào Ramos trắng không biểu hiện gen này.
Nuôi cấy tế bào Ramos
Phần này của bài viết dành riêng để giúp bạn nắm vững các thông tin quan trọng về nuôi cấy tế bào Ramos. Tại đây, bạn sẽ tìm hiểu: Thời gian nhân đôi của dòng tế bào là bao lâu? Môi trường nuôi cấy được khuyến nghị là gì? Cách nuôi cấy tế bào Ramos như thế nào?
Điểm chính khi nuôi cấy tế bào Ramos
|
Thời gian nhân đôi: |
Thời gian nhân đôi của tế bào Ramos là khoảng 20,4 ± 1,5 giờ. Tuy nhiên, con số này có thể thay đổi tùy thuộc vào điều kiện nuôi cấy tế bào được cung cấp. |
|
Dính hoặc treo lơ lửng: |
Tế bào Ramos phát triển trong môi trường lơ lửng. |
|
Mật độ tế bào: |
Mật độ tế bào tối ưu cho dòng tế bào Ramos là 3 x10⁵ tế bào/ml . Khi cấy lại, các tế bào lơ lửng được thu thập bằng cách ly tâm. Tế bào được thêm vào môi trường tươi và tái phân tán cẩn thận. Sau đó, tế bào được đổ vào bình mới với mật độ từ 3 đến 9 x10⁵ tế bào/ml . |
|
Dung dịch nuôi cấy: |
RPMI 1640 được bổ sung 10% huyết thanh bò non, 2.1 mM glutamine ổn định và 2.0 g/L NaHCO3 được sử dụng để nuôi cấy tế bào Ramos. Dung dịch nuôi cấy nên được thay thế 2 lần mỗi tuần. |
|
Điều kiện nuôi cấy: |
Dòng tế bào lymphoma Burkitt của người (Ramos) được bảo quản trong tủ ấm có độ ẩm, nồng độ CO₂ 5% và nhiệt độ 37°C. |
|
Bảo quản: |
Tế bào Ramos đông lạnh được bảo quản ở nhiệt độ dưới -150°C hoặc trong pha hơi của nitơ lỏng để bảo vệ sự sống còn của tế bào trong thời gian dài. |
|
Quy trình đông lạnh và môi trường: |
Dung dịch đông lạnh CM-1 hoặc CM-ACF được khuyến nghị cho tế bào Ramos. Quá trình đông lạnh chậm được sử dụng, cho phép giảm nhiệt độ 1°C mỗi phút. Quá trình đông lạnh chậm này bảo vệ tế bào khỏi sốc nhiệt và nâng cao khả năng sống sót của chúng. |
|
Quá trình rã đông: |
Để rã đông, các tế bàođông lạnh được đặt trong bể nước ấm ở 37°C trong 40 đến 60 giây cho đến khi còn lại một khối băng nhỏ. Sau đó, môi trường tươi được thêm vào và các tế bào được ly tâm để loại bỏ các thành phần của môi trường đông lạnh. Cặn tế bào được tái phân tán và các tế bào được phân phối vào một bình mới chứa môi trường nuôi cấy. |
|
Mức độ an toàn sinh học: |
Phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1 là cần thiết để duy trì văn hóa tế bào Ramos âm tính với virus Epstein-Barr. Tuy nhiên, cấp độ an toàn sinh học được nâng lên cấp 2 khi tế bào Ramos được chuyển đổi vĩnh viễn thành dương tính với virus Epstein-Barr. |
Ramos: Ưu điểm & Hạn chế
Giống như các dòng tế bào khác, tế bào Ramos cũng có những ưu điểm và hạn chế riêng biệt. Phần này sẽ tìm hiểu một số ưu điểm và hạn chế đáng chú ý có thể ảnh hưởng đáng kể đến việc sử dụng chúng trong nghiên cứu.
Ưu điểm
- Mô hình tế bào u lympho Burkitt: Tế bào Ramos được phát triển từ bệnh nhân u lympho Burkitt, khiến chúng trở thành mô hình tế bào phù hợp để nghiên cứu các bệnh lý ác tính của hệ bạch huyết
- Dễ nuôi cấy: Tế bào Ramos dễ nuôi cấy và duy trì trong phòng thí nghiệm. Chúng có yêu cầu và điều kiện nuôi cấy đơn giản
Hạn chế
- Mô hình in vitro: Tế bào Ramos có thể không hoàn toàn phản ánh độ phức tạp di truyền của khối u ở bệnh nhân, do đó hạn chế tính ứng dụng của chúng. Hơn nữa, kết quả từ các thí nghiệm sử dụng dòng tế bào Ramos có thể không hoàn toàn phản ánh điều kiện in vivo, tiềm ẩn thách thức trong việc chuyển giao kết quả nghiên cứu
Ứng dụng của tế bào Ramos trong nghiên cứu
Ramos mang lại các ứng dụng đầy hứa hẹn trong lĩnh vực y sinh. Một số ứng dụng nghiên cứu quan trọng của tế bào Ramos bao gồm:
- Sinh học u lympho: Tế bàoRamos được sử dụng rộng rãi để nghiên cứu sinh học của u lympho. Chúng được sử dụng để khám phá các yếu tố di truyền và phân tử liên quan đến các bệnh lý lympho ác tính. Ngoài ra, các nhà nghiên cứu thu được những hiểu biết về quá trình khởi phát, tiến triển và tính đa dạng của bệnh thông qua các tế bào u lympho Burkitt này. Các đột biến di truyền và con đường tín hiệu cũng được nghiên cứu, có thể dẫn đến việc phát triển các phương pháp chẩn đoán và điều trị chính xác hơn. Một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2019 cho thấy ức chế GCN5 (General control non-depressible 5) Histone acetyltransferase làm giảm khả năng gây ung thư của các tế bào lymphoma Burkitt ở người (Ramos) bằng cách làm gián đoạn con đường tín hiệu BCR. Do đó, GCN5 được đề xuất là mục tiêu khả thi cho việc phát triển liệu pháp thuốc điều trị lymphoma [2].
- Màn hình và thử nghiệm thuốc: Dòng tế bàoRamos được sử dụng rộng rãi trong các mục đích màn hình và thử nghiệm thuốc. Các nhà nghiên cứu đánh giá hiệu quả của các hợp chất điều trị tiềm năng trong việc ức chế sự phát triển và tăng trưởng của tế bào, cũng như gây chết tế bào trong các tế bào lymphoma. Điều này giúp xác định các ứng cử viên thuốc hứa hẹn, từ đó thúc đẩy việc phát triển các phương pháp điều trị nhắm mục tiêu cho bệnh nhân lymphoma. Các nghiên cứu cho thấy chiết xuất methanolic từ vỏ, thịt và hạt quả Annona có tác dụng vừa phải, trong khi chiết xuất chloroform có tác dụng mạnh mẽ đối với sự phát triển của tế bào Ramos. Do đó, nghiên cứu đề xuất rằng quả Annona có thể hiệu quả trong phòng ngừa và điều trị lymphoma [3].
Tế bào Ramos cho nghiên cứu của bạn
Các công bố khoa học sử dụng dòng tế bào Ramos
Phần này của bài viết liệt kê một số công trình nghiên cứu thú vị liên quan đến dòng tế bào Ramos:
Nghiên cứu này được công bố trên tạp chí The EMBO Journal vào năm 2018. Nghiên cứu cho thấy các tế bào B Ramos cần biểu hiện các dấu hiệu CD19 và CD79b (thành phần tín hiệu BCR Igβ) để duy trì sự phát triển và cạnh tranh.
Nghiên cứu này được công bố trên tạp chí Neoplasia (2021) đã sử dụng tế bào Ramos và đề xuất rằng miền kinase dòng hỗn hợp (MLKL) được điều hòa biểu sinh trong tế bào lymphoma Burkitt (Ramos). Do đó, nó là một dấu hiệu tiên lượng đầy hứa hẹn cho thành công điều trị của các liệu pháp liên quan đến necroptosis.
Phosphorylation của PBK/TOPK Tyr74 bởi JAK2 thúc đẩy sự phát triển khối u trong u lympho Burkitt
Bài báo nghiên cứu trên tạp chí Cancer Letters (2022) đề xuất rằng trục tín hiệu JAK2/TOPK/histone H3 đóng vai trò quan trọng trong sự phát triển của các dòng tế bào lymphoma B trong ống nghiệm.
Bài báo này được công bố vào năm 2020 trên tạp chí Toxins. Nghiên cứu đề xuất rằng việc điều trị bằng verotoxin-1 gây ra stress nội bào (ER) trong các tế bào B Ramos. Điều này dẫn đến việc kích hoạt các con đường tín hiệu apoptosis hoặc sinh tồn trong các dòng tế bào lymphoma.
Silymarin ức chế biểu hiện gen thụ thể Toll-like 8 và apoptosis trong dòng tế bào ung thư Ramos
Nghiên cứu trên Tạp chí Phytomedicine Avicenna (2020) cho biết hợp chất tự nhiên silymarin ức chế biểu hiện TLR8 (receptor Toll-like 8) và apoptosis trong dòng tế bào Ramos.
Tài nguyên cho dòng tế bào Ramos: Quy trình, Video và Hơn thế nữa
Dưới đây là một số tài nguyên trực tuyến về dòng tế bào Ramos:
- Điện chuyển gen cho dòng tế bào Ramos: Tài liệu này sẽ giúp bạn nắm vững quy trình điện chuyển gen cho dòng tế bào Ramos.
Liên kết sau đây chứa quy trình nuôi cấy tế bào Ramos:
- Tế bào Ramos: Trang web này cung cấp thông tin cơ bản về dòng tế bào Ramos. Nó cũng bao gồm quy trình nuôi cấy lại tế bào Ramos và xử lý các văn hóa đang phát triển và được đông lạnh. Ngoài ra, thông tin về môi trường nuôi cấy tế bào Ramos, thời gian nhân đôi và mật độ tế bào cũng có sẵn.
Những thông tin quan trọng về tế bào Ramos: Câu hỏi thường gặp
Tài liệu tham khảo
- Kerntke, C.G., Phân tích cấu trúc và khả năng truyền tín hiệu của IgE màng trong quá trình tương tác với CD19 và CD23 ở tế bào lympho B. 2021, Đại học Georg-August Göttingen.
- Farria, A.T., et al., Ức chế GCN5 HAT làm giảm sự sống còn của tế bào lymphoma Burkitt ở người thông qua việc giảm biểu hiện gen mục tiêu MYC và cản trở các con đường tín hiệu BCR. Oncotarget, 2019. 10(56): tr. 5847.
- Al‐Shaya, H.M., et al., Thành phần hóa học thực vật và hoạt tính chống oxy hóa của quả annona và tác động của nó đối với sự phát triển của tế bào lymphoma. Food Science & Nutrition, 2020. 8(1): tr. 58-68.