Dòng tế bào RAW 264.7 trong nghiên cứu đại thực bào và miễn dịch
Dòng tế bào RAW 264.7 là một mô hình in vitro mạnh mẽ cho đại thực bào chuột, đóng vai trò quan trọng trong lĩnh vực nghiên cứu miễn dịch học. Dòng tế bào này được tạo ra từ một con chuột đực BALB/c và được biến đổi bởi virus leukemia chuột Abelson, dẫn đến việc hình thành một dòng tế bào có đặc tính tương tự đại thực bào. Do tính ổn định chức năng và khả năng tự nhiên thực hiện cả quá trình thực bào và pinocytosis, các tế bào RAW 264.7 là yếu tố thiết yếu trong nghiên cứu tương tác giữa vật chủ và tác nhân gây bệnh, trở thành nền tảng quan trọng trong các nỗ lực nghiên cứu miễn dịch học [1,2].
Đặc điểm hình thái và hành vi phát triển
Khi quan sát, tế bào RAW 264.7 thể hiện sự phát triển bán bám dính, có xu hướng hình thành cả tế bào bám dính hình thoi và tế bào nổi tròn có khả năng sống, với đường kính tế bào dao động từ 10 đến 20 µm. Tính đa hình và khả năng thích nghi với điều kiện nuôi cấy này khiến tế bào RAW 264.7 trở thành công cụ linh hoạt cho các thao tác và quan sát thí nghiệm.
Chức năng miễn dịch và trình bày kháng nguyên
Với vai trò là tế bào trình diện kháng nguyên, tế bào RAW 264.7 đóng vai trò quan trọng trong hệ miễn dịch. Chức năng của chúng không chỉ giới hạn ở việc nhận diện tác nhân gây bệnh mà còn bao gồm xử lý và trình diện kháng nguyên cho tế bào T, từ đó điều phối phản ứng miễn dịch toàn diện. Cơ chế này giúp hiểu rõ hơn cách hệ miễn dịch nhận diện và trung hòa các tác nhân ngoại lai.
Polarization của đại thực bào: Mô hình M0, M1 và M2
Các tế bào RAW 264.7, ở trạng thái cơ bản là đại thực bào M0, có khả năng phân cực thành kiểu hình M1 pro-viêm hoặc M2 chống viêm. Khả năng phân cực này cung cấp cho các nhà nghiên cứu một mô hình để nghiên cứu ảnh hưởng và tác động của các cytokine và yếu tố môi trường khác nhau đối với chức năng của đại thực bào và phản ứng miễn dịch [3,4].
Osteoclastogenesis và tái tạo xương
Mặc dù không phải là osteoclast, các tế bào RAW 264.7 đã đóng vai trò quan trọng trong việc nghiên cứu osteoclastogenesis—quá trình hình thành osteoclast. Các tế bào này giúp khám phá biểu hiện gen của osteoclast và khả năng đáp ứng của chúng với kích hoạt thụ thể. Nghiên cứu này có ý nghĩa sâu sắc trong việc hiểu cơ chế bệnh lý của các tình trạng như loãng xương, nơi quá trình tái tạo xương bị rối loạn là đặc trưng.
Thông tin về nuôi cấy tế bào RAW 264.7
Trước khi bắt đầu các thí nghiệm của mình, bạn cần nắm vững một số thông tin cơ bản về dòng tế bào mạnh mẽ này. Bạn có biết thời gian nhân đôi của tế bào RAW 264.7 là bao lâu không? Mật độ gieo tế bào cho dòng này là bao nhiêu, và chúng có tính bám dính không? Hơn nữa, điều kiện tăng trưởng tối ưu cho RAW 264.7 là gì? Hãy tiếp tục đọc để khám phá tất cả câu trả lời bạn cần để làm việc với dòng tế bào tuyệt vời này!
|
Thông tin về nuôi cấy tế bào |
Dòng tế bào RAW 264.7 |
|
Thời gian nhân đôi dân số |
11 đến 30 giờ |
|
Bám dính hoặc nổi lơ lửng |
Chủ yếu là tế bào bám dính, với một số quần thể tế bào lơ lửng |
|
Mật độ gieo tế bào |
4 × 10⁴ tế bào/cm² |
|
Môi trường nuôi cấy khuyến nghị |
RPMI 1640 bổ sung 10% huyết thanh bò non và L-glutamine (2,5 mM) |
|
Điều kiện nuôi cấy tối ưu |
Tủ ấm có độ ẩm với 5% CO₂ và nhiệt độ 37°C |
|
Thay thế môi trường |
2 đến 3 lần mỗi tuần |
|
Bảo quản |
Giai đoạn hơi của nitơ lỏng |
|
Phương tiện đông lạnh |
CM-1 hoặc CM-ACF |
|
Quá trình đông lạnh |
Đông lạnh chậm |
|
Quá trình rã đông |
Khuấy nhanh trong bể nước 37°C |
|
Mức độ an toàn sinh học |
Phòng thí nghiệm BSL-2 được khuyến nghị |

Tế bào đại thực bào RAW 264.7 của chuột ở các mức độ phủ khác nhau.
Ưu điểm và nhược điểm của tế bào RAW 264.7
Ưu điểm
- Dễ nuôi cấy: Dòng tế bào RAW 264.7 dễ dàng nuôi cấy và duy trì trong phòng thí nghiệm mà không cần các yêu cầu phức tạp.
- Được đặc trưng rõ ràng: RAW 264.7 là dòng tế bào được đặc trưng rõ ràng, có nghĩa là nó có các đặc điểm hình thái và chức năng ổn định.
- Mô hình in vitro của đại thực bào: Vì tế bào RAW 264.7 là đại thực bào, chúng thể hiện các chức năng đặc trưng của đại thực bào như thực bào và pinocytosis. Do đó, chúng thường được sử dụng làm mô hình in vitro của đại thực bào.
- Phân hóa thành osteoclasts: Tế bào RAW 264.7 có thể được phân hóa thành osteoclasts bằng cách sử dụng các yếu tố phân tử cụ thể. Các tế bào phân hóa này có khả năng thực hiện quá trình tái tạo xương, tương tự như osteoclasts.
Nhược điểm
- Đại diện kém cho đại thực bào nguyên phát: Là một dòng tế bào biến đổi, RAW 264.7 có thể không đại diện chính xác cho các đặc điểm của đại thực bào nguyên phát và có thể có một số khác biệt về biểu hiện gen, biểu hiện hình thái và chức năng.
- Hạn chế trong sàng lọc thuốc: Tế bào RAW 264.7 có thể không phù hợp cho tất cả các loại thử nghiệm sàng lọc thuốc, và phản ứng của chúng đối với một số loại thuốc có thể khác với tế bào đại thực bào nguyên phát.
- Độ bám dính mạnh của tế bào: Tế bào RAW 264.7 bám dính mạnh vào bề mặt của bình nuôi cấy và đôi khi khó tách ra.
Ứng dụng của tế bào RAW 264.7 trong mô phỏng đại thực bào và nghiên cứu miễn dịch
Mô phỏng phản ứng miễn dịch tế bào
Dòng tế bào RAW 264.7, phản ánh các chức năng của đại thực bào thật, là mô hình quan trọng để nghiên cứu phản ứng của tế bào đối với tác nhân gây bệnh và kích thích miễn dịch. Một nghiên cứu nhấn mạnh khía cạnh này đã đánh giá tác dụng điều hòa miễn dịch và chống oxy hóa của vi khuẩn axit lactic đã được làm chết bằng nhiệt trên các tế bào này, cung cấp những phát hiện quan trọng trong điều hòa hệ miễn dịch [5]
Bổ sung cho điều này, nghiên cứu được thực hiện vào năm 2019 đã làm sáng tỏ tác động miễn dịch của việc tiếp xúc của RAW 264.7 với polysaccharides từ cây Polygonatum sibiricum. Nghiên cứu kết luận rằng các hợp chất này kích hoạt phản ứng miễn dịch thông qua việc kích hoạt các con đường tín hiệu NF-κB/MAPK, mang lại hiểu biết sâu sắc về mặt phân tử [6]
Nghiên cứu về quá trình hình thành osteoclast
Làm đại diện cho các nghiên cứu về sự biệt hóa của osteoclast, các tế bào RAW 264.7 góp phần làm sáng tỏ hành vi và các con đường biệt hóa của osteoclast. Các nghiên cứu này mở rộng kiến thức của chúng ta về cơ chế tiêu xương và cơ chế bệnh lý của loãng xương. Các kỹ thuật hình ảnh tiên tiến thường được sử dụng để theo dõi các thay đổi nội bào và phân tích chuyển hóa heme trong các tế bào này
Nắm bắt những hiểu biết phân tử về quá trình hình thành osteoclast
Mặc dù có vai trò chính là mô hình đại thực bào, tế bào RAW 264.7 cũng được sử dụng cho nghiên cứu osteoclastogenesis in vitro. Bằng cách kích thích các đặc tính tương tự osteoclast trong các tế bào này, các nhà nghiên cứu thu được hiểu biết về quá trình phân hóa và hành vi của tiền osteoclast, mặc dù điều quan trọng là phải xem xét các đặc tính nội tại và nguồn gốc của dòng tế bào trong các nghiên cứu này.
Màn hình hoạt tính sinh học của sản phẩm tự nhiên
Màn hình hoạt tính sinh học trong sản phẩm tự nhiên là một ứng dụng khác mà dòng tế bào RAW 264.7 thể hiện ưu việt. Ví dụ, việc sử dụng chúng trong một nghiên cứu của Hàn Quốc về tính chất kích thích miễn dịch của một hỗn hợp thảo dược đã cho thấy hiệu quả của dòng tế bào này trong việc xác định các hợp chất hoạt tính sinh học trong các chất tự nhiên [7]
Khám phá nghiên cứu của bạn với các tế bào RAW 264.7 của chúng tôi
Các công bố nghiên cứu sử dụng tế bào RAW 264.7
Nhiều công bố nghiên cứu có sẵn về dòng tế bào đại thực bào chuột RAW 264.7:
- Polysaccharides từ Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute kích thích phản ứng miễn dịch trong dòng tế bào RAW 264.7 thông qua con đường NF-κB/MAPK: Nghiên cứu này đề xuất rằng polysaccharides được chiết xuất từ cây Polygonatum sibiricum có thể kích thích phản ứng miễn dịch trong dòng tế bào RAW 264.7 thông qua con đường NF-κB/MAPK.Dòng tế bào RAW264.7 thông quacon đường tín hiệu NF-κB/MAPK: Nghiên cứu này đề xuất rằng polysaccharides được chiết xuất từ cây Polygonatum sibiricum có thể kích thích phản ứng miễn dịch trong dòng tế bào đại thực bào chuột RAW 264.7 thông qua việc điều chỉnh chuỗi tín hiệu NF-κB/MAPK.
- Tác dụng điều hòa miễn dịch của chiết xuất Tinospora crispa và các hợp chất chính của nó đối với các chức năng miễn dịch củaRAW 264.7: Bàibáo đăng trên tạp chí International Immunopharmacology mô tảrằng chiết xuất từ câyTinospora crispa và các thành phần chính của nó có tác dụng điều hòa miễn dịch và kích thích miễn dịch đối với dòng tế bào đại thực bào RAW 264.7.
- Vi khuẩn axit lactic đã được làm chết bằng nhiệt ức chế sản xuất oxit nitric thông qua enzym oxit nitric cảm ứng và cyclooxygenase-2 trongTế bào RAW 264.7: Nghiên cứu này đề xuất rằng vi khuẩn axit lactic đã được xử lý nhiệt có thể được sử dụng trong sản xuất sản phẩm probiotic vì chúng có tính chất điều hòa miễn dịch và chống oxy hóa. Các nhà nghiên cứu đã sử dụng tế bào RAW 264.7 để nghiên cứu các hoạt động sinh học này.
- Tác động của công thức thảo dược đối với việc tăng cường phản ứng miễn dịch trong đại thực bào RAW 264.7: Nghiên cứu này đã sử dụng tế bào RAW 264.7 để nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch của một công thức thảo dược có tên KM1608. Nghiên cứu đề xuất KM1608 là một tác nhân tiềm năng để tăng cường phản ứng miễn dịch.
- Một cuộc sàng lọc các loài thực vật được sử dụng trong y học truyền thống Colombia đã tiết lộ tiềm năng chống viêm của vỏ quả Physalis angulata: Bài báo này được công bố trên Tạp chí Khoa học Sinh học Ả Rập Xê Út đã nghiên cứu tiềm năng chống viêm của 10 loài thực vật truyền thống Colombia thường được sử dụng bằng cách sử dụng tế bào RAW 264.7 được kích thích bằng LPS.
Tế bào RAW 264.7: Tài nguyên, Quy trình, Video & Hơn thế nữa
Tế bào RAW 264.7 thường được sử dụng trong các nghiên cứu chuyển gen. Các tài nguyên sau đây giải thích các phương pháp chuyển gen khác nhau được sử dụng cho dòng tế bào RAW 264.7.
- Điện chuyển gen cho tế bào RAW 264.7: Trang web này cung cấp quy trình điện chuyển gen cho tế bào đại thực bào RAW 264.7 sử dụng chất Lipofectamine.
- Quy trình chuyển gen: Bài báo đã công bố này mô tả chi tiết quy trình chuyển gen cho tế bào RAW 264.7.
- Phương pháp chuyển gen hiệu quả cho tế bào RAW 264.7: Tài liệu này mô tả một phương pháp chuyển gen thực tiễn khác sử dụng tế bào RAW 264.7.
Video liên quan đến dòng tế bào RAW 264.7
- Nuôi cấy tế bào RAW 264.7: Video này giải thích quy trình nuôi cấy tế bào RAW 264.7.
- Phương pháp chuyển gen: Videonày trình bày về việc chuyển gen vào tế bào RAW 264.7 bằng gen báo cáo.
Các câu hỏi thường gặp quan trọng về dòng tế bào RAW 264.7: Nhận thức về nghiên cứu mô phỏng đại thực bào và quá trình tạo osteoclast
Tài liệu tham khảo
- Taciak, B., et al., Đánh giá tính ổn định hình thái và chức năng của dòng tế bào RAW 264.7 thông qua các lần truyền liên tiếp. PloS one, 2018. 13(6): tr. e0198943.
- Wang, S., et al., Các đại thực bào viêm làm gián đoạn quá trình trưởng thành và khoáng hóa của tế bào xương thông qua điều chỉnh con đường tín hiệu Notch. Molecular Medicine, 2022. 28(1): tr. 102.
- Orekhov, A.N., et al., Sự biệt hóa của bạch cầu đơn nhân và sự phân cực của đại thực bào. Vessel Plus, 2019. 3: tr. 10.
- Khabipov, A., et al., Sự phân cực của đại thực bào RAW 264.7 bởi các tế bào ung thư tụy – một mô hình để nghiên cứu các đại thực bào thúc đẩy ung thư. Nghiên cứu Chống Ung thư, 2019. 39(6): tr. 2871-2882.
- Kang, C.-H., et al., Vi khuẩn axit lactic đã được làm chết bằng nhiệt ức chế sản xuất oxit nitric thông qua enzym oxit nitric cảm ứng và cyclooxygenase-2 trong tế bào RAW 264.7. Probiotics and Antimicrobial Proteins, 2021. 13(6): tr. 1530-1538.
- Zhang, J., et al., Polysaccharides từ Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute kích thích phản ứng miễn dịch trong dòng tế bào RAW264.7 thông qua con đường NF-κB/MAPK. RSC advances, 2019. 9(31): tr. 17988-17994.
- Trinh, T.A., et al., Tác động của công thức thảo dược đối với việc tăng cường phản ứng miễn dịch trong đại thực bào RAW 264.7. Biomolecules, 2020. 10(3): tr. 424.