Tế bào NCI-H1299: Nghiên cứu và Ứng dụng lâm sàng của tế bào ung thư phổi NCI-H1299
NCI-H1299 là dòng tế bào ung thư phổi không phải tế bào nhỏ của người được bất tử hóa, được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu miễn dịch ung thư, ung thư và phát hiện thuốc. Ngoài ra, các nhà nghiên cứu đã sử dụng các tế bào này để nghiên cứu độ nhạy cảm với thuốc, các con đường tín hiệu cơ bản và các cơ chế phân tử liên quan đến ung thư phổi. Bên cạnh đó, các tế bào này được sử dụng để nghiên cứu các nhiễm trùng virus như SARS-CoV-2.
Đặc điểm chung và nguồn gốc của tế bào NCI-H1299
Điều đầu tiên cần biết về một dòng tế bào là nguồn gốc và đặc điểm chung của nó, vì điều này giúp bạn xác định cách sử dụng nó trong nghiên cứu của mình. Phần này của bài viết sẽ giúp bạn tìm hiểu một số thông tin quan trọng về nguồn gốc và đặc điểm của NCI-H1299. Chẳng hạn, tế bào ung thư phổi NCI-H1299 là gì? Loại tế bào nào là NCI-H1299? Kích thước của tế bào NCI-H1299 là bao nhiêu? Sự khác biệt giữa A549 và NCI-H1299 là gì?
- Dòng tế bào NCI-H1299 có nguồn gốc từ di căn hạch bạch huyết của phổi của một bệnh nhân nam da trắng 43 tuổi bị ung thư.
- Các tế bào này có sự xóa một phần đồng hợp tử của gen p53; do đó, chúng không biểu hiện protein p53. Sự thiếu hụt biểu hiện protein p53 của NCI-H1299 góp phần vào xu hướng tăng sinh của các tế bào ung thư phổi H1299.
- Ngoài p53, các tế bào bất tử này được báo cáo là có đột biến KRAS NCI-H1299, chịu trách nhiệm cho các đặc tính tăng trưởng, phân chia, di chuyển và xâm lấn của chúng.
- Karyotype của NCI-H1299 gần như diploid.
- Các tế bào NCI-H1299 có hình thái tương tự tế bào biểu mô.
- Các tế bào này có hình dạng phẳng và độ dày dưới 5 µm.
NCI-H1299 và A549
NCI-H1299 và A549 là các dòng tế bào ung thư phổi không phải tế bào nhỏ. Tế bào NCI-H1299 có tính chất hung hãn và nhạy cảm hơn so với A549. Cả hai đều có các đột biến tương đối tương tự, như KRAS. Tuy nhiên, khác với tế bào NCI-H1299, tế bào A549 biểu hiện gen P53.
Thông tin về nuôi cấy
Việc duy trì nuôi cấy dòng tế bào không hề dễ dàng cho đến khi bạn nắm rõ tất cả thông tin quan trọng về nó, bao gồm: Thời gian nhân đôi của NCI-H1299 là bao lâu? Mật độ gieo hạt của NCI-H1299 là bao nhiêu? Thành phần môi trường nuôi cấy của NCI-H1299 là gì? Cách nuôi cấy dòng tế bào NCI-H1299 như thế nào? Phần này sẽ giúp bạn tìm hiểu câu trả lời cho tất cả các câu hỏi liên quan đến việc nuôi cấy tế bào NCI-H1299.
Điểm chính khi nuôi cấy tế bào NCI-H1299
|
Thời gian nhân đôi: |
Thời gian nhân đôi của NCI-H1299 dao động từ 22-30 giờ. |
|
Dính bám hay treo lơ lửng: |
NCI-H1299 là dòng tế bào bám dính. |
|
Tỷ lệ phân chia: |
Tế bào NCI-H1299 được phân chia với tỷ lệ khuyến nghị từ 1:3 đến 1:6. Để gieo tế bào, tế bào bám dính được rửa bằng 1x PBS và ủ với dung dịch phân chia Accutase trong 8 đến 10 phút ở nhiệt độ phòng. Tế bào tách ra được thêm vào môi trường nuôi cấy tươi và ly tâm. Cặn tế bào sau đó được tái phân tán, và tế bào được đổ vào các bình mới chứa môi trường tăng trưởng. |
|
Dung dịch nuôi cấy: |
RPM1 1640 là môi trường nuôi cấy lý tưởng cho tế bào NCI-H1299. Nó được bổ sung với 10% huyết thanh bò non, 4500 mg/L glucose, 2.0 mM L-glutamine, 1 mM natri pyruvate, 1500 mg/L NaHCO3 và 10 mM HEPES. Môi trường nên được thay mới mỗi 2 đến 3 lần một tuần. |
|
Điều kiện nuôi cấy: |
Văn hóa tế bào ung thư phổi NCI-H1299 được duy trì trong tủ ấm có độ ẩm ở 37°C với nồng độ CO2 5%. |
|
Bảo quản: |
Dòng tế bào NCI-H1299 có thể được bảo quản trong pha hơi của nitơ lỏng hoặc tủ đông nhiệt độ cực thấp ở nhiệt độ dưới -150°C cho thời gian dài. |
|
Quy trình đông lạnh và môi trường: |
CM-1 hoặc CM-ACF là môi trường đông lạnh cho tế bào NCI-H1299. Tế bào được đông lạnh bằng quy trình đông lạnh chậm, chỉ giảm 1°C mỗi phút để bảo vệ sự sống còn của tế bào. |
|
Quy trình rã đông: |
Tế bào NCI-H1299 đông lạnh được khuấy nhanh trong bể nước ấm ở 37°C trong 40 đến 60 giây cho đến khi còn lại một mảnh băng nhỏ. Tế bào đã rã đông được thêm vào môi trường tươi và có thể được nuôi cấy trực tiếp trong bình mới hoặc ly tâm. Trong trường hợp đầu tiên, môi trường nên được thay thế sau 24 giờ ủ. Ly tâm giúp loại bỏ các thành phần của môi trường đông lạnh. Sau đó, tế bào thu hoạch được tái phân tán trong môi trường tươi và phân phối vào bình nuôi cấy mới để nuôi cấy. |
|
Mức độ an toàn sinh học: |
Phải sử dụng phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1 để xử lý văn hóa tế bào NCI-H1299. |
Mua dòng tế bào NCI-H1299: Công cụ nghiên cứu chất lượng cao để nghiên cứu sinh học ung thư phổi
Ưu điểm và nhược điểm của tế bào NCI-H1299
Giống như các dòng tế bào ung thư người khác, NCI-H1299 cũng có một số đặc điểm nổi bật liên quan đến những ưu và nhược điểm cụ thể. Dưới đây, chúng tôi đã tổng hợp một số điểm quan trọng.
Ưu điểm
Các ưu điểm chính của dòng tế bào ung thư phổi không phải tế bào nhỏ NCI-H1299 là:
-
Mô hình ung thư phổi in vitro
Dòng tế bào NCI-H1299 được phát triển từ di căn hạch bạch huyết của ung thư phổi và do đó có các đặc tính tương đối tương đồng. Vì vậy, các tế bào này có thể được sử dụng làm mô hình in vitro để nghiên cứu sinh học ung thư phổi, cơ chế tế bào và phân tử, cũng như sàng lọc và thử nghiệm các liệu pháp tiềm năng.
-
Dễ nuôi cấy
Tế bào NCI-H1299 dễ nuôi cấy và duy trì trong phòng thí nghiệm nghiên cứu. Không có yêu cầu hoặc quy trình nuôi cấy tế bào phức tạp.
-
NCI-H1299 P53 và đột biến KRAS
Tế bào NCI-H1299 thiếu biểu hiện gen p53, cho phép tế bào phát triển mạnh mẽ. Hơn nữa, chúng mang đột biến KRAS góp phần vào sự phát triển, phân chia, xâm lấn và di chuyển của tế bào. Xét đến những yếu tố này, các nhà nghiên cứu sử dụng tế bào H1299 để nghiên cứu các cơ chế phân tử liên quan đến đột biến KRAS và P53.
Nhược điểm
Những nhược điểm của tế bào NCI-H1299 là:
-
Đặc hiệu mô
NCI-H1299 có nguồn gốc từ mô phổi. Do đó, tính ứng dụng của nó chủ yếu bị giới hạn trong nghiên cứu ung thư phổi. Nó có thể không hoàn toàn đại diện cho sự đa dạng và đặc điểm chung của các loại ung thư khác.
Ứng dụng nghiên cứu của tế bào NCI-H1299
Dòng tế bào NCI-H1299 được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư phổi. Một số ứng dụng hứa hẹn của dòng tế bào này được đề cập dưới đây.
- Sinh học ung thư: Tế bàoNCI-H1299 là công cụ nghiên cứu tuyệt vời để điều tra sự phát triển, tiến triển của ung thư và các cơ chế tế bào, phân tử liên quan. Các tế bào này mang một số đột biến, cho phép các nhà nghiên cứu khám phá các hành vi của tế bào ung thư, con đường tín hiệu và hồ sơ biểu hiện gen liên quan. Nhiều nghiên cứu đã sử dụng dòng tế bào ung thư phổi không phải tế bào nhỏ NCI-H1299 để nghiên cứu sinh học ung thư phổi. Ví dụ, một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2018 đã điều tra con đường tín hiệu liên quan đến quá trình apoptosis của tế bào ung thư phổi sử dụng các tế bào NCI-H1299. Các nhà nghiên cứu phát hiện ra rằng con đường PI3K/AKT góp phần vào sự phát triển của tế bào, và việc ức chế con đường này có thể gây ra cái chết của tế bào ung thư [1]. Tương tự, một nghiên cứu khác đã điều tra các cơ chế liên quan đến quá trình chuyển đổi biểu mô-mesenchymal (EMT) của các tế bào NCI-H1299. Nghiên cứu này đề xuất rằng protein ngoại bào SPARC (protein acid và giàu cysteine được tiết ra) góp phần vào quá trình EMT và di chuyển của NCI-H1299, từ đó thúc đẩy quá trình hình thành khối u trong tế bào — protein SPARC hoạt động như một chất trung gian của tín hiệu TGF-β1 [2].
- Phát hiện và sàng lọc thuốc: Dòng tế bào ung thư phổi ngườiNCI-H1299 được sử dụng rộng rãi để đánh giá độc tính và hiệu quả của các thuốc tiềm năng. Ngoài ra, nó được các nhà nghiên cứu sử dụng để điều tra cơ chế tác động của các thuốc chống ung thư. Các nghiên cứu cũng sử dụng các tế bào này để xác định các mục tiêu thuốc tiềm năng và cơ chế kháng thuốc. Ví dụ, nghiên cứu do Xiao-Yun Shen và các đồng nghiệp thực hiện đã điều tra tiềm năng chống ung thư của hợp chất tự nhiên bruceine D (BD). Kết quả cho thấy BD ức chế đáng kể sự phát triển, xâm lấn và di chuyển của các tế bào NCI-H1299. Do đó, nó có thể được xem xét như một liệu pháp hỗ trợ tiềm năng trong điều trị ung thư phổi không tế bào nhỏ [3]. Tương tự, một nghiên cứu đã đánh giá tác dụng độc tế bào của xanthohumol đơn lẻ và kết hợp với thuốc hóa trị cisplatin trên các tế bào ung thư phổi NCI-H1299 [4].
Các công bố nghiên cứu sử dụng tế bào NCI-H1299
Một số công bố nghiên cứu quan trọng và được trích dẫn nhiều nhất về dòng tế bào ung thư phổi NCI-H1299 được liệt kê dưới đây.
Bài báo này được đăng trên tạp chí Human and Experimental Toxicology (2021). Nghiên cứu đề xuất rằng indole-3-carbinol gây ra apoptosis trong tế bào H1299 thông qua việc tăng mức độ các gốc tự do (ROS).
Nghiên cứu này được công bố vào năm 2018 trên tạp chí Cellular Physiology and Biochemistry. Kết quả nghiên cứu cho thấy sự kết hợp giữa axit caffeic và paclitaxel có tác dụng chống ung thư hiệp đồng trên dòng tế bào ung thư phổi không phải tế bào nhỏ NCI-H1299.
Bài báo nghiên cứu này được công bố trên tạp chí Molecular Medicine Reports (2018). Nghiên cứu đánh giá tác dụng chống ung thư của tubeimoside-1, một saponin triterpenoid, và các cơ chế cơ bản trong dòng tế bào NCI-H1299.
Pristimerin gây ra apoptosis và ức chế sự phát triển, di chuyển trong các tế bào ung thư phổi H1299
Bài báo này được công bố trên tạp chí Journal of Cancer (2020) đề xuất rằng Pristimerin, một hợp chất tự nhiên, ức chế sự phát triển và di chuyển của các tế bào NCI-H1299.
Cơ chế điều hòa của gen VIPR1 đối với tế bào ung thư phổi dạng tuyến H1299
Nghiên cứu này trên Tạp chí Ung thư Học (2019) đã khám phá tác động tiềm năng của việc biểu hiện quá mức gen VIPR1 đối với dòng tế bào ung thư phổi dạng tuyến NCI-H1299.
Nguồn tài liệu cho dòng tế bào NCI-H1299: Quy trình, video và nhiều hơn nữa
Dưới đây là một số tài nguyên trực tuyến liên quan đến dòng tế bào NCI-H1299.
- NCI-H1299 transfection: Video này sẽ giải thích quy trình transfection tạm thời cho dòng tế bào NCI-H1299.
- Việc nuôi cấy lại dòng tế bào bám dính: Video này sẽ giúp bạn học quy trình nuôi cấy lại chung cho dòng tế bào bám dính.
Liên kết sau đây chứa thông tin về nuôi cấy tế bào cho dòng tế bào NCI-H1299.
- Dòng tế bào NCI-H1299: Liên kết này có thể giúp bạn tìm hiểu về quy trình chuyển giao và chuyển gen cho dòng tế bào NCI-H1299.
Câu hỏi thường gặp về dòng tế bào NCI-H1299
Tài liệu tham khảo
- Gu, J., et al., Nghiên cứu về tác dụng gây apoptosis của EGCG trên tế bào ung thư phổi thông qua ức chế con đường tín hiệu PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): tr. 4557-4563.
- Sun, W., et al., SPARC đóng vai trò trung gian của TGF-β1 trong việc thúc đẩy quá trình chuyển đổi biểu mô-mesenchymal ở các tế bào ung thư phổi A549 và H1299. Biofactors, 2018. 44(5): tr. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al., Nghiên cứu về cơ chế tác dụng của bruceine D trong điều trị tế bào ung thư phổi không phải tế bào nhỏ H1299. Tạp chí Y học Cổ truyền Trung Quốc Thế giới, 2020. 6(4): tr. 500.
- Long, B., et al., Tác dụng độc tế bào của xanthohumol và sự kết hợp của nó với cisplatin trên tế bào ung thư phổi di căn H1299 của người. Tạp chí Tiến bộ trong Y học và Nghiên cứu Y học, 2019. 30(9): tr. 1-15.