Tế bào COS-1: Công cụ nghiên cứu chính trong các nghiên cứu biểu hiện gen
Dòng tế bào COS-1 là một loại tế bào tương tự như tế bào sợi, được phân lập từ mô thận của khỉ và thường được các nhà nghiên cứu sử dụng để nghiên cứu virus SV40 ở khỉ. Các tế bào này dễ dàng được chuyển gen và thường được sử dụng để sản xuất protein tái tổ hợp cho các thí nghiệm sinh hóa, phân tử và sinh học tế bào.
Bài viết này sẽ cung cấp thông tin chi tiết về dòng tế bào COS-1, bao gồm tất cả thông tin cần thiết. Cụ thể, bạn sẽ nắm được các nội dung sau:
- Dòng tế bào COS-1: Nguồn gốc và thông tin chung.
- Ưu và nhược điểm của tế bào COS-1
- Ứng dụng nghiên cứu của dòng tế bào COS-1
- Tế bào COS-1: Các công bố khoa học
- Nguồn tài nguyên cho dòng tế bào COS-1, bao gồm các quy trình, video và nhiều hơn nữa
- Nuôi cấy tế bào COS-1
1. Dòng tế bào COS-1: Nguồn gốc và thông tin chung.
Trước khi bắt đầu bất kỳ công việc nào với dòng tế bào, điều quan trọng là phải có hiểu biết cơ bản về chính dòng tế bào đó. Điều này bao gồm thông tin như nguồn gốc của tế bào, cách chúng được tách chiết và đặc điểm của chúng. Trong phần này, chúng ta sẽ tìm hiểu về những kiến thức cơ bản của tế bào COS-1.
Dòng tế bào COS-1 là gì?
Dòng tế bào COS-1 bao gồm các tế bào tương tự như tế bào sợi, được J.W.F. Cowell và các đồng nghiệp tạo ra lần đầu tiên vào năm 1981. Các tế bào này được tạo ra bằng cách biến đổi một dòng tế bào biểu mô khỉ xanh có tên là CV-1 bằng một dạng đột biến của virus SV40. Sau đó, dòng tế bào COS-1 đã được đặc trưng hóa kỹ lưỡng để khôi phục vùng của bộ gen SV40 đã bị xóa khỏi điểm khởi đầu sao chép. Các tế bào này biểu hiện các kháng nguyên T lớn và các protein cần thiết để sao chép các bộ gen hình tròn, như plasmid, một cách chính xác.
Tế bào COS-1 có hình thái tương tự như tế bào sợi và bám dính vào bề mặt, trải rộng thành một lớp đơn. Hiện tại, không có biến thể di truyền nào của dòng tế bào COS-1 được biết đến. Tuy nhiên, dòng tế bào liên quan COS-7 cũng có nguồn gốc từ tế bào CV-1 và có đặc điểm tương tự.
2. Ưu và nhược điểm của tế bào COS-1
Dòng tế bào COS-1 có những ưu điểm và hạn chế riêng, mà chúng ta sẽ thảo luận dưới đây.
Ưu điểm
- Khả năng chuyển gen: Dòng tế bào COS-1 có thể được chuyển gen dễ dàng bằng các phương pháp khác nhau, bao gồm cả phương pháp vật lý và hóa học.
- Sản xuất lentivirus: Dòng tế bào COS-1 là vật chủ đóng gói phù hợp để sản xuất các hạt lentivirus tái tổ hợp chất lượng cao mà không cần các bước tinh chế bổ sung. Các tế bào này bám chặt vào bề mặt nhựa, ngăn ngừa sự nhiễm bẩn của dịch siêu vi chứa các hạt virus [1].
- Biểu hiện gen: Dòng tế bào COS-1 được sử dụng rộng rãi cho các nghiên cứu phân tích biểu hiện tạm thời và ổn định, sản xuất nhiều protein tái tổ hợp thông qua chuyển gen bằng plasmid tròn chứa vùng khởi đầu sao chép SV40 [2].
Hạn chế
- Dòng tế bào không phải của người: Vì các tế bào COS-1 có nguồn gốc từ linh trưởng không phải người, các protein tái tổ hợp được sản xuất bởi dòng tế bào này chỉ phù hợp cho các thí nghiệm trong phòng thí nghiệm và không được khuyến nghị sử dụng cho con người.
3. Ứng dụng nghiên cứu của tế bào COS-1
Một trong những yếu tố quan trọng nhất khi thảo luận về một dòng tế bào là các ứng dụng nghiên cứu của nó. Phần này sẽ khám phá các ứng dụng nghiên cứu nổi bật nhất của dòng tế bào COS-1.
- Sản xuất protein tái tổ hợp: Dòng tế bào COS-1 được sử dụng rộng rãi để sản xuất protein tái tổ hợp thông qua chuyển gen tạm thời hoặc ổn định của các vectơ tròn chứa nguồn gốc nhân SV40. Trong một nghiên cứu gần đây, các nhà sinh học đã sử dụng dòng tế bào COS-1 để sản xuất hormone sinh sản tái tổ hợp equine chorionic gonadotropin cho các ứng dụng sinh sản [3]. Tương tự, một nghiên cứu khác đã sử dụng tế bào COS-1 để sản xuất kháng thể đơn dòng tái tổ hợp chống lại một loại virus cúm cụ thể [4].
- Sản xuất các hạt virus tương tự: Dòng tế bào COS-1 đóng vai trò là vật chủ đóng gói cho sản xuất lentivirus chất lượng cao và có thể được sử dụng để tạo ra vắc-xin virus. Một nghiên cứu đã sử dụng dòng tế bào COS-1 để sản xuất các hạt virus tương tự dengue không lây nhiễm nhưng có tính miễn dịch cao, là các ứng viên vắc-xin hiệu quả [5].
4. Tế bào COS-1: Các công bố
Một số công bố nổi bật về tế bào COS-1 bao gồm:
- Sản xuất và tinh chế các hạt giống virus dengue từ tế bào COS-1: Bài báo này trên Bio-Protocol giải thích việc sử dụng tế bào COS-1 để sản xuất các hạt giống virus dengue có khả năng gây miễn dịch cao.
- Phân tích biểu hiện của hormone sinh sản tái tổ hợp từ ngựa (equine chorionic gonadotropin) trong ba hệ thống chủ - E. coli BL21C, dịch tế bào côn trùng Sf và tế bào động vật có vú COS-1: Trong nghiên cứu này, các nhà khoa học đã so sánh quá trình sản xuất và biến đổi sau dịch mã của hormone sinh sản tái tổ hợp, ví dụ như hormone gonadotropin chorionic ngựa, trong các hệ thống biểu hiện khác nhau, bao gồm tế bào động vật có vú COS-1.
- Nghiên cứu các hạt tương tự Flavivirus do ve truyền như hệ thống vận chuyển cho liệu pháp gen: Nghiên cứu này sử dụng tế bào COS-1 để sản xuất các hạt tương tự virus viêm não do ve truyền (TBEV). Các hạt này được đề xuất như một phương tiện vận chuyển để đưa các replicon cần thiết (tức là gen điều trị).
- Sản xuất kháng thể đơn dòng tái tổ hợp được "chickenized" chống lại neuraminidase của virus cúm gia cầm H9N2: Bài báo này được công bố trên tạp chí AMB Express đã sử dụng tế bào COS-1 để sản xuất kháng thể đơn dòng tái tổ hợp được "chickenized" chống lại neuraminidase của virus cúm gia cầm loại H9N2.
- Hòa tan không sử dụng chất tẩy rửa các kênh Kv của người được biểu hiện trong tế bào động vật có vú: Trong nghiên cứu này, dòng tế bào động vật có vú COS-1 được sử dụng để biểu hiện các kênh Kv của người nhằm thực hiện một số thí nghiệm hòa tan.
5. Tài nguyên cho dòng tế bào COS-1, bao gồm các quy trình, video và nhiều tài liệu khác
Quy trình nuôi cấy tế bào
- Văn hóa tế bào COS-1: Liên kết này cung cấp thông tin hữu ích về việc tách, đông lạnh và rã đông tế bào COS-1.
- Tế bào COS-1: Liên kết này cung cấp thông tin cơ bản về dòng tế bào COS-1.
Quy trình chuyển gen
Dưới đây là một số nguồn mô tả phương pháp chuyển gen cho dòng tế bào COS-1.
- Điện chuyển tạm thời cho tế bào COS-1: Tài liệu này bao gồm quy trình điện chuyển tạm thời cho dòng tế bào COS-1.
Video liên quan đến dòng tế bào COS-1
Các tài nguyên video sau đây có thể giúp bạn nắm bắt thông tin chung về nuôi cấy, bảo quản và chuyển gen cho tế bào COS-1.
- Chuyển giao tế bào: Video này thảo luận về các thực hành nuôi cấy cơ bản cho các dòng tế bào động vật có vú.
- Đông lạnh tế bào bám dính: Video này cung cấp thông tin về việc đông lạnh các dòng tế bào bám dính.
- Quy trình chuyển gen: Video này trình bày quy trình chuyển gen cho tế bào động vật có vú.
6. Nuôi cấy tế bào COS-1
|
Đặc điểm |
Thông tin |
|
Thời gian nhân đôi |
Khoảng 48 giờ |
|
Dính hoặc treo lơ lửng |
Tế bào bám dính phát triển thành lớp đơn trên bề mặt bình nuôi cấy |
|
Mật độ gieo tế bào |
2 đến 4 × 10^4 tế bào/cm²; tế bào bám dính được rửa bằng 1x PBS, xử lý bằng Accutase, ly tâm, tái phân tán và phân phối vào bình nuôi cấy mới |
|
Dung dịch nuôi cấy |
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) chứa 10% FBS; môi trường nuôi cấy nên được thay thế 2 đến 3 lần mỗi tuần |
|
Điều kiện nuôi cấy (nhiệt độ, CO₂) |
Yêu cầu tủ ấm có độ ẩm với 5% CO₂ và nhiệt độ 37°C |
|
Bảo quản |
Dưới -150°C trong pha hơi của nitơ lỏng |
|
Quy trình đông lạnh và môi trường |
Phương pháp đông lạnh chậm với tốc độ giảm nhiệt độ chỉ 1°C sử dụng môi trường CM-1 hoặc CM-ACF |
|
Quá trình rã đông |
Rã đông tế bào đông lạnh bằng cách ủ chúng trong bể nước ở 37°C trong 40-60 giây với khuấy nhanh. Ly tâm tế bào để loại bỏ môi trường đông lạnh, tái phân tán cặn và phân phối vào bình nuôi cấy với môi trường tươi. Quá trình bám dính mất khoảng 24 giờ. |
|
Mức độ an toàn sinh học |
Mức độ an toàn sinh học 1 được khuyến nghị khi xử lý tế bào COS-1 |
Chúng tôi hy vọng bài viết này đã cung cấp đủ thông tin để giúp bạn bắt đầu làm việc với tế bào COS-1. Vui lòng đặt hàng từ chúng tôi nếu bạn muốn sử dụng dòng tế bào này cho nghiên cứu của mình.
Tham khảo
- Smith, S.L. và T. Shioda, Ưu điểm của tế bào biểu mô thận khỉ COS-1 như vật chủ đóng gói cho sản xuất quy mô nhỏ virus lentivirus tái tổ hợp chất lượng cao. Tạp chí Phương pháp Vi sinh học, 2009. 157(1): tr. 47-54.
- MacKenzie, C.J. và T. Shioda,Tế bào COS-1 như vật chủ đóng gói cho sản xuất virus lentivirus. Các quy trình hiện đại trong sinh học tế bào, 2011. 50(1): tr. 26.7. 1-26.7. 15.
- Bhardwaj, A., et al., Phân tích biểu hiện của gonadotropin chorionic ngựa tái tổ hợp trong ba hệ thống chủ: E. coli BL21C, dịch tế bào côn trùng Sf và tế bào động vật có vú COS-1. Tạp chí Nghiên cứu Động vật Ấn Độ, 2021. 55(1): tr. 40-45.
- Wang, F., et al., Sản xuất kháng thể đơn dòng tái tổ hợp từ gà chống lại neuraminidase của virus cúm gia cầm H9N2. AMB Express, 2020. 10: tr. 1-7.
- Galula, J.U., G.-J.J. Chang, và D.-Y. Chao, Sản xuất và tinh chế các hạt giống virus dengue từ tế bào COS-1. Bio-protocol, 2019. 9(12): tr. e3280-e3280.

