Tế bào B16-F10 - Nghiên cứu dòng tế bào u hắc tố B16-F10 trong nghiên cứu di căn

Tế bàoB16-F10 là dòng tế bào melanoma được phát triển từ chuột C57BL/6J. Chúng được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư da. Các nhà nghiên cứu sử dụng các tế bào này để nghiên cứu sự phát triển và tiến triển của khối u cũng như các can thiệp điều trị. Bài viết này sẽ trình bày các khía cạnh cơ bản của tế bào melanoma B16-F10. Đáng chú ý, nó sẽ bao gồm:

  1. Nguồn gốc và đặc điểm chung của dòng tế bào B16-F10
  2. Thông tin nuôi cấy tế bào B16-F10
  3. Tế bào B16-F10: Ưu điểm & Nhược điểm
  4. Ứng dụng nghiên cứu của các tế bào B16-F10
  5. Các công bố khoa học sử dụng dòng tế bào B16-F10
  6. Tài nguyên cho dòng tế bào B16-F10: Quy trình, video và nhiều hơn nữa

1.      Nguồn gốc và đặc điểm chung của dòng tế bào B16-F10

Phần này sẽ cung cấp cho bạn những thông tin về nguồn gốc và đặc điểm đặc trưng của tế bào ung thư melanoma B16F10. Nó sẽ giúp bạn sử dụng dòng tế bào này một cách hiệu quả trong công việc nghiên cứu của mình. Chủ yếu, bạn sẽ học được: Tế bào B16-F10 là gì? Dòng tế bào B16F10 được phân lập từ đâu? Hình thái của dòng tế bào B16F12 là gì? Kích thước của tế bào B16F10 là bao nhiêu?

  • B16-F10 là một dòng con của dòng tế bào ung thư B16 được phân lập từ mô da của chuột C57BL/6J. Trong đó, Tế bào melanoma B16F10 được phát triển sau khi tiêm tĩnh mạch dòng tế bào B16 vào chuột suy giảm miễn dịch hoặc chuột đồng loại. Các tế bào này được chọn lọc dựa trên khả năng hình thành các khối u phổi di căn trong cơ thể và sau đó được thiết lập sau mười chu kỳ hình thành khối u phổi trong ống nghiệm [1]. Nó được phát triển bởi Fidler và các đồng nghiệp vào năm 1976.
  • Dòng tế bào B16-F10 có hình dạng giống biểu mô và hình thoi.
  • Kích thước xấp xỉ của tế bào B16-F10 là 15,4 ± 1,4 μm [2].

Tế bào B16-F1 và B16-F10

Tế bào B16-F1 và B16-F10 được phân lập từ dòng tế bào gốc B16. Cả hai đều có nguồn gốc từ cùng một dòng và có đặc điểm gần như tương tự. Tuy nhiên, sự khác biệt chính là khả năng di căn. Tế bào B16-F10 có khả năng di căn cao, trong khi B16-F1 có khả năng di căn thấp [3].

Mặt cắt ngang được phóng đại cao của khối u melanoma ác tính dưới kính hiển vi.

2.      Thông tin về nuôi cấy tế bào B16-F10

Trước khi xử lý và nuôi cấy một dòng tế bào, bạn cần nắm rõ thời gian nhân đôi, môi trường nuôi cấy, điều kiện nuôi cấy và quy trình nuôi cấy tế bào. Phần này sẽ thảo luận về: Thời gian nhân đôi của tế bào B16-F10 là bao lâu? Cách nuôi cấy tế bào B16-F10 như thế nào? Môi trường nuôi cấy cho tế bào B16-F10 là gì? Điều kiện nuôi cấy nào được khuyến nghị cho tế bào B16-F10?

Điểm chính khi nuôi cấy tế bào B16-F10

Thời gian nhân đôi:

Thời gian nhân đôi của tế bào B16-F10 là khoảng 20,1 giờ. Thời gian này có thể dao động từ 17 đến 21 giờ, tùy thuộc vào điều kiện nuôi cấy.

Dính bám hoặc nổi lơ lửng:

B16-F10 là dòng tế bào bám dính. Tế bào phát triển nhanh và tạo thành lớp đơn.

Tỷ lệ chia tách:

Tế bào B16-F10 được phân chia với tỷ lệ 1:2 đến 1:4. Tế bào được rửa bằng dung dịch phosphate buffer saline (1x) và sau đó ủ với dung dịch Accutase trong 8 đến 10 phút ở nhiệt độ phòng. Tế bào được thêm vào môi trường tươi và ly tâm. Cụm tế bào thu hoạch được tái phân tán và phân phối vào bình nuôi cấy mới chứa môi trường nuôi cấy tươi theo tỷ lệ phân chia.

Dung dịch nuôi cấy:

Tế bào B16-F10 được nuôi cấy trong môi trường DMEM. Môi trường được bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS), 4 mM L-Glutamine, 1,5 g/L NaHCO₃, 4,5 g/L Glucose và 1,0 mM Natri pyruvate để đảm bảo sự phát triển tối ưu của tế bào. Môi trường nên được thay thế 2 đến 3 lần mỗi tuần.

Điều kiện nuôi cấy:

Tế bào B16-F10 được nuôi cấy trong tủ ấm có độ ẩm ở 37°C với nồng độ CO₂ 5%.

Bảo quản:

Tế bào đông lạnh được bảo quản ở nhiệt độ dưới -150 °C trong tủ đông siêu lạnh hoặc trong pha hơi của nitơ lỏng để duy trì sự sống của tế bào.

Quy trình đông lạnh và môi trường:

Tế bào B16-F10 được đông lạnh trong môi trường CM-1 hoặc CM-ACF để bảo quản. Đối với quá trình này, khuyến nghị sử dụng quy trình đông lạnh chậm, chỉ giảm 1°C mỗi phút để tránh gây sốc cho tế bào.

Quá trình rã đông:

Tế bào B16-F10 đông lạnh được rã đông trong bể nước có nhiệt độ đã cài đặt sẵn 37°C trong 40 đến 60 giây. Tiếp theo, tế bào được thêm vào môi trường tươi và ly tâm để loại bỏ các thành phần của môi trường đông lạnh. Tế bào thu được được tái phân tán trong môi trường tăng trưởng và đổ vào bình nuôi cấy.

Mức độ an toàn sinh học:

Phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1 là yêu cầu để xử lý và duy trì dòng tế bào B16-F10.

Tế bào B16-F10 ở trạng thái bán liên kết dưới kính hiển vi với độ phóng đại 20x và 10x.

3.      Tế bào B16-F10: Ưu điểm & nhược điểm

Giống như các dòng tế bào khác, B16-F10 cũng có một số ưu điểm và nhược điểm. Một số ưu điểm và nhược điểm đáng chú ý của dòng tế bào u hắc tố da này được thảo luận trong phần này.

Ưu điểm

Dòng tế bào B16-F10 được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư. Các ưu điểm của tế bào B16-F10 là:

Tiềm năng di căn

Tế bào ung thư da B16F10 có khả năng di căn cao, khiến chúng trở nên quý giá trong việc nghiên cứu quá trình di căn ung thư và các cơ chế cơ bản.

Mô hình khối u in vitro

Tế bào B16-F10 được sử dụng làm mô hình in vitro để nghiên cứu sự tiến triển và phát triển của ung thư, giúp các nhà nghiên cứu hiểu rõ các cơ chế tế bào và phân tử điều khiển quá trình ung thư.

 

Nhược điểm

Những nhược điểm liên quan đến dòng tế bào B16-F10 là:

Dòng tế bào có nguồn gốc từ chuột

B16-F10 là dòng tế bào có nguồn gốc từ chuột, hạn chế tính ứng dụng của nó trong các nghiên cứu liên quan đến con người. Kết quả nghiên cứu từ các tế bào này có thể không luôn phản ánh chính xác sinh học của con người.

 

4.      Ứng dụng nghiên cứu của dòng tế bào B16-F10

Dòng tế bào B16-F10 được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư. Một số ứng dụng đầy hứa hẹn của dòng tế bào này được thảo luận ở đây.

  • Nghiên cứu ung thư: Dòng tế bào B16-F10 là mô hình quý giá để nghiên cứu các quá trình của tế bào ung thư, bao gồm sự phát triển, xâm lấn, di chuyển và chết tế bào hoặc apoptosis. Ngoài ra, nó giúp các nhà nghiên cứu hiểu rõ hơn về các cơ chế phân tử và con đường điều khiển các quá trình tế bào này. Một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2018 đã khám phá vai trò của CCR5 (receptor chemokine C-C loại 5) trong quá trình chuyển đổi từ tế bào biểu mô sang tế bào trung mô và di căn của tế bào melanoma. Kết quả cho thấy sự thiếu hụt CCR5 ức chế sự phát triển và di căn của khối u, trong khi biểu hiện cao của CCR5 dẫn đến sự tăng trưởng và di căn mạnh mẽ của các tế bào B16-F10. Các nghiên cứu tiếp theo báo cáo rằng CCR5 điều chỉnh biểu hiện của TGFβ1, vốn điều chỉnh tín hiệu PI3K/AKT/GSK3β để thúc đẩy quá trình chuyển đổi biểu mô-mesenchymal và di chuyển tế bào [4].
  • Thử nghiệm và phát triển thuốc: Tế bào ung thư melanomaB16F10 có tính chất rất hung hãn, do đó phù hợp để thử nghiệm các loại thuốc và phương pháp điều trị chống ung thư tiềm năng. Các nhà nghiên cứu sử dụng các tế bào này để đánh giá tác động của các hợp chất khác nhau đối với sự phát triển, phân chia và di căn của tế bào, hỗ trợ quá trình phát triển thuốc. Một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2018 bởi Valentina Nanni và các đồng nghiệp đã điều tra tác dụng điều trị của chiết xuất hydroalcoholic từ hoa Spartium junceum ( ). Nghiên cứu đề xuất rằng chiết xuất hoa có hiệu quả trong việc gây ra quá trình lão hóa ở tế bào B16-F10, dẫn đến ức chế sự phát triển của tế bào và quá trình tạo melanin, do đó có thể có tác dụng chống ung thư tiềm năng [5].

5.      Các công bố khoa học sử dụng dòng tế bào B16-F10

Dưới đây là một số công bố nghiên cứu quan trọng sử dụng dòng tế bào melanoma B16-F10:

Tác dụng ức chế quá trình sản xuất melanin của chiết xuất ethanol từ Sorghum bicolor đối với quá trình sản xuất melanin do IBMX gây ra trong tế bào melanoma B16/F10

Nghiên cứu này được công bố trên tạp chí Nutrients (2020). Nghiên cứu đề xuất rằng chiết xuất ethanol từ Sorghum bicolor có tác dụng ức chế quá trình sản sinh melanin trong tế bào melanoma B16F10.

Calcitriol ức chế sự tăng sinh và có thể gây ra apoptosis trong tếbào B16–F10

Nghiên cứu được công bố trên tạp chí Medical Science Monitor Basic Research (2022) đề xuất rằng thuốc calcitriol có tác dụng chống ung thư trong tế bào melanoma B16-F10 bằng cách ức chế sự phát triển và gây ra apoptosis.

Tác dụng prooxidative của cardols liên quan đến hoạt tính cytotoxic của chúng đối với tế bào melanoma B16–F10 của chuột

Bài báo này được công bố trên tạp chí Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Kết quả cho thấy cardols, một loại lipid resorcinolic, có tác dụng độc tế bào mạnh mẽ đối với dòng tế bào B16-F10.

Chiết xuất vỏ quả Ginkgo biloba ức chế di căn của tế bào melanoma B16-F10 thông qua con đường tín hiệu PI3K/akt/NF-κB/MMP-9

Nghiên cứu được công bố trên tạp chí Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) đã khám phá tiềm năng ức chế di căn của chiết xuất vỏ quả Ginkgo biloba bằng cách sử dụng tế bào B16-F10.

Thymoquinone gây ra quá trình apoptosis trong tế bào melanoma B16-F10 thông qua ức chế p-STAT3 và ức chế sự phát triển khối u trong mô hình melanoma nội sọ ở chuột…

Nghiên cứu trong Tạp chí Phẫu thuật Thần kinh Thế giới (2018) đề xuất rằng thymoquinone có thể là một liệu pháp hiệu quả chống lại các tổn thương di căn não, vì nó ức chế sự phát triển của tế bào B16-F10 và gây ra quá trình apoptosis.

6.      Tài nguyên cho dòng tế bào B16-F10: Quy trình, Video và Hơn thế nữa

Tế bào nội mô B16F10 được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư da. Dưới đây là một số tài nguyên trực tuyến giải thích quy trình nuôi cấy và chuyển gen của chúng:

Liên kết sau đây chứa quy trình nuôi cấy tế bào B16-F10:

  • Nuôi cấy lại tế bào B16-F10: Trang web này cung cấp thông tin hữu ích về tế bào ung thư melanoma B16F10. Nó bao gồm môi trường nuôi cấy, thời gian nhân đôi, điều kiện nuôi cấy và quy trình nuôi cấy lại tế bào, cũng như cách xử lý các mẫu tế bào được bảo quản đông lạnh và nuôi cấy tăng sinh.

Tham khảo

  1. Poste, G., et al., So sánh các đặc tính di căn của các dòng tế bào u hắc tố B16 được tách từ các dòng tế bào nuôi cấy, khối u dưới da và các khối u di căn phổi riêng lẻ. Cancer Research, 1982. 42(7): tr. 2770-2778.
  2. Nakamura, M., D. Ono, và S. Sugita, Phân loại cơ học các biến thể tế bào u melanoma B16 để đánh giá hiệu quả điều trị bằng (-)-Epigallocatechin Gallate sử dụng thiết bị vi lưu chất có hình nón. Micromachines, 2019. 10(3): tr. 207.
  3. Danciu, C., et al., Hành vi của bốn dòng tế bào u hắc tố B16 chuột khác nhau: C57BL/6J da. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): tr. 73-80.
  4. Liu, J., et al., Sự biểu hiện cao của CCR5 trong u melanoma tăng cường quá trình chuyển đổi biểu mô-mesenchymal và di căn thông qua TGFβ1. Tạp chí Pathology, 2019. 247(4): tr. 481-493.
  5. Nanni, V., et al., Chiết xuất hydroalcoholic từ hoa Spartium junceum L. ức chế sự phát triển và quá trình tạo melanin trong tế bào B16-F10 bằng cách gây ra sự lão hóa. Phytomedicine, 2018. 46: tr. 1-10.

 

Chúng tôi đã phát hiện rằng bạn đang ở một quốc gia khác hoặc đang sử dụng ngôn ngữ trình duyệt khác với ngôn ngữ hiện tại đã chọn. Bạn có muốn chấp nhận các cài đặt được đề xuất không?

Đóng