Ô nhiễm trong nuôi cấy tế bào: Cần làm gì và cách phòng ngừa

Ô nhiễm trong nuôi cấy tế bào vẫn là một trong những thách thức lớn nhất trong nghiên cứu phòng thí nghiệm, có thể ảnh hưởng đến tính hợp lệ và khả năng tái hiện của thí nghiệm. Tại Cytion, chúng tôi hiểu rõ tầm quan trọng của việc duy trì điều kiện vô trùng và tác động của ô nhiễm đối với nghiên cứu quý giá của bạn.

Các chiến lược phòng ngừa: Hàng phòng thủ đầu tiên

Để ngăn ngừa ô nhiễm trong nuôi cấy tế bào, cần áp dụng một phương pháp toàn diện bắt đầu từ việc sử dụng thiết bị phù hợp và tuân thủ nghiêm ngặt các quy trình. Tại Cytion, chúng tôi khuyến nghị thiết lập lịch bảo trì phòng ngừa chặt chẽ cho tất cả thiết bị nuôi cấy, bao gồm hiệu chuẩn định kỳ cho tủ ấp CO2, kính hiển vi và tủ an toàn sinh học. Hệ thống lưu trữ tế bào được bảo trì tốt là yếu tố quan trọng để bảo quản các mẫu dự phòng không bị ô nhiễm.

Việc sử dụng liên tục kháng sinh như một biện pháp phòng ngừa được khuyến cáo mạnh mẽ không nên thực hiện, vì nó có thể che giấu nhiễm khuẩn ở mức độ thấp và dẫn đến sự phát triển của các chủng kháng thuốc. Thay vào đó, hãy tập trung vào việc duy trì kỹ thuật vô trùng nghiêm ngặt và các quy trình vô trùng đúng cách. Khi làm việc với các dòng tế bào nhạy cảm như tế bào HeLa, bất kỳ sự sơ suất nào trong kỹ thuật cũng có thể dẫn đến sự lây lan nhanh chóng của nhiễm khuẩn.

Các biện pháp phòng ngừa chính bao gồm:

• Vệ sinh và khử trùng định kỳ bề mặt làm việc
• Sử dụng đúng cách trang thiết bị bảo hộ cá nhân
• Kỹ thuật xử lý vô trùng cho tất cả các quy trình nuôi cấy tế bào
• Theo dõi định kỳ hiệu suất của thiết bị
• Đào tạo toàn diện cho nhân viên về kỹ thuật vô trùng

Để phòng ngừa tối ưu, hãy áp dụng lịch kiểm tra tiêu chuẩn sử dụng dịch vụ kiểm tra mycoplasma của chúng tôi để phát hiện sớm bất kỳ sự nhiễm khuẩn tiềm ẩn nào.

Phương pháp phát hiện: Phát hiện sớm sự nhiễm khuẩn

Phát hiện sớm sự nhiễm khuẩn là yếu tố quan trọng để duy trì tính toàn vẹn của văn hóa tế bào. Kiểm tra bằng kính hiển vi vẫn là phương pháp phát hiện ban đầu, nhưng cần được bổ sung bằng các thử nghiệm vô trùng định kỳ. Tại Cytion, chúng tôi khuyến nghị triển khai dịch vụ xác thực dòng tế bào của chúng tôi như một phần của quy trình giám sát định kỳ của quý vị.

Các dấu hiệu phổ biến của nhiễm khuẩn bao gồm:

• Sự thay đổi bất thường về pH của môi trường nuôi cấy (thay đổi màu sắc)
• Dung dịch nuôi cấy có vẻ đục hoặc mờ
• Thay đổi bất thường về hình thái tế bào
• Tốc độ tăng trưởng giảm
• Sự hiện diện của các mảnh vụn nổi

Để phát hiện mycoplasma, vốn thường không thể nhìn thấy bằng mắt thường, việc kiểm tra định kỳ là điều cần thiết. Bộ kit kiểm tra mycoplasma cao cấp của chúng tôi có thể phát hiện sự nhiễm khuẩn trước khi nó ảnh hưởng đến tính toàn vẹn của nghiên cứu của bạn. Đặc biệt khi làm việc với các dòng tế bào nhạy cảm như HEK293, việc thiết lập lịch kiểm tra định kỳ là vô cùng quan trọng.

Quy trình xử lý: Thực hiện hành động ngay lập tức

Khi phát hiện nhiễm bẩn, việc hành động nhanh chóng và quyết liệt là vô cùng quan trọng. Quy trình khuyến nghị tại Cytion là ngay lập tức loại bỏ các mẫu nuôi cấy bị nhiễm bẩn và quay trở lại các mẫu ban đầu không bị nhiễm bẩn. Nếu bạn đang làm việc với các dòng tế bào quý giá như MCF-7, việc có một hệ thống lưu trữ tế bào hợp lý trở nên vô cùng quan trọng.

Thực hiện các bước sau ngay khi phát hiện nhiễm bẩn:

• Ghi chép chi tiết về sự cố nhiễm bẩn
• Loại bỏ tất cả các mẫu bị ảnh hưởng theo các quy trình an toàn sinh học đúng quy định
• Cách ly các vật liệu có thể bị phơi nhiễm
• Vệ sinh sâu và khử trùng khu vực làm việc bị ảnh hưởng
• Kiểm tra và xác minh tình trạng của các mẫu đông lạnh

Đối với nhiễm bẩn virus, một vấn đề đặc biệt khó khăn để giải quyết, chúng tôi khuyến nghị lấy các mẫu mới, được chứng nhận không nhiễm bẩn từ nguồn đáng tin cậy. Khi làm việc với các mẫu mới, hãy sử dụng dịch vụ xác thực dòng tế bào của chúng tôi để đảm bảo tính toàn vẹn của các mẫu mới.

Lưu ý rằng việc cố gắng "cứu" các mẫu bị nhiễm bằng kháng sinh được khuyến cáo mạnh mẽ không nên thực hiện, vì điều này có thể che giấu các vấn đề tiềm ẩn và dẫn đến sự phát triển của các chủng kháng thuốc. Thay vào đó, hãy tập trung vào phòng ngừa và duy trì các mẫu dự phòng đúng cách thông qua các quy trình đông lạnh của chúng tôi.