Neuro-2a šūnu līnija

Neuro-2a ir neironu šūnu līnija, ko plaši izmanto neirozinātnes pētījumos. Galvenokārt šīs šūnas izmanto, lai pētītu nervu attīstību, diferenciāciju, neirotoksicitāti, šūnu signalizācijas ceļus un aksonu augšanu. Turklāt tās izmanto arī zāļu izstrādē un skrīningā.

Šajā rakstā ir aplūkoti svarīgi neiroblastomas šūnu Neuro-2a aspekti, kas varētu jums palīdzēt pirms darba uzsākšanas ar tām. Tajā galvenokārt tiks aplūkoti šādi jautājumi:

Neuro-2a šūnu vispārīgās īpašības un izcelsme
Neuro-2a šūnu līnijas kultivēšanas informācija
Neuro-2a šūnu līnijas priekšrocības un trūkumi
Neuro-2a šūnu līnijas izmantošana pētniecībā
Pētniecības publikācijas, kurās izmantotas Neuro-2a šūnas
Neuro-2a šūnu resursi: Protokoli, videomateriāli un citi resursi

1. Neuro-2a šūnu vispārīgas īpašības un izcelsme

Šajā raksta daļā tiks aplūkota Neuro-2a šūnu līnijas pamatinformācija un pamatīpašības, kuras ir būtiski zināt pirms darba ar to. Šeit jūs uzzināsiet: Kas ir Neuro-2a šūnu līnija? Kāda ir Neuro-2a šūnu līnijas izcelsme? Kas ir Neuro-2a šūnu diferenciācija? Kāds ir Neuro-2a šūnas izmērs? Kāda ir Neuro-2a šūnu morfoloģija?

Neuro-2a šūnas ir iegūtas no spontāna audzēja (neiroblastomas), kas radies Albino pelei (A celms). Šūnu līniju izveidoja R. J. Klebe un F. H. Ruddle.
Neuro-2a neiroblastomas šūnām piemīt neironu un ameboīdu cilmes šūnu morfoloģija.
Neuro-2a šūnu izmērs ir 12 mikrometri [1].
Neuro-2a šūnu hromosomu skaits var svārstīties no 59 līdz 193, bet modālais skaits ir 95. Šo neiroblastomas šūnu kariotips ir nestabils 94 līdz 98 hromosomu robežās.

Ilustrēta neironu signalizācija: neirotransmitera atbrīvošanās presinaptiskā neirona sinaptiskā spraugā, ko izraisa Ca2+ pieplūdums, izraisot aktivizētus jonu kanālus un Na+ pieplūdumu postsinaptiskā neironā, 3D attēlojums.

2. Neuro-2a šūnu līnijas kultivēšanas informācija

Neuro-2a šūnas tiek plaši izmantotas neirozinātņu pētniecības laboratorijās. Pirms darba ar šīm šūnām jums vajadzētu apgūt turpmāk minēto obligāto šūnu kultivēšanas informāciju. Tas var atvieglot darbu. Jūs uzzināsiet: Kas ir Neuro-2a šūnu kultūru barotne? Kā kultivēt Neuro-2a šūnas? Kāds ir Neuro-2a šūnu dubultošanās laiks? Kāds ir Neuro-2a šūnu izsējas blīvums? Kāds ir Neuro-2a šūnu kultivēšanas protokols? Kāda ir Neuro-2a šūnu barotne?

Neuro-2a šūnu kultivēšanas galvenie punkti

Dubultošanās laiks:	Neuro-2a šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 70 stundas.
Adhēzijas vai suspensijas veidā:	Neuro-2a ir adherentu šūnu līnija.
Sēšanas blīvums:	Neuro-2a šūnu līnijas optimizētais šūnu izsējas blīvums ir 1 x¹⁰⁴ ^šūnas/cm2. Šūnas izsēšanai mazgā ar bezmagnija un kalcija fosfātu buferšķīduma fizioloģisko šķīdumu (1x). Pēc tam pievieno pasāžas šķīdumu (Accutase), un šūnas inkubē 8 līdz 10 minūtes istabas temperatūrā. Pēc šūnu disociācijas pievieno svaigu barotni un centrifugē šūnas. Novākto šūnu granulātu rūpīgi resuspendē, un šūnas ielej kultivēšanas traukā, lai tās augtu.
Augšanas barotne:	Neuro-2a šūnu kultivēšanai izmanto EMEM. Tā satur 10 % FBS, 2 mM L-glutamīnu, 1,5 g/l NaHCO3, EBSS, 1 mM nātrija piruvātu un NEAA ideālai šūnu augšanai. Barotne jāmaina 1 līdz 2 reizes nedēļā.
Augšanas apstākļi:	Neiro-2a kultūras tiek uzturētas 37 °C mitrinātā inkubatorā, kas pieslēgts 5 % CO2 padevei.
Uzglabāšana:	Šūnas ilgstoši jāuzglabā zem -150 °C temperatūrā elektriskā saldētavā ar īpaši zemu temperatūru vai šķidrā slāpekļa tvaika fāzē.
Saldēšanas process un barotne:	Neuro-2a šūnu sasaldēšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF barotni. Šūnas sasaldē lēnā sasaldēšanas procesā, kas pieļauj tikai 1 °C kritumu minūtē. Tas pasargā šūnas no šoka un saglabā to dzīvotspēju.
Atkausēšanas process:	Lai atkausētu sasaldētās kultūras, flakonu ievieto 37 °C ūdens vannā uz 40 līdz 60 sekundēm, līdz paliek tikai neliels ledus gabaliņš. Tad pievieno barotni un šūnas centrifugē. Šis solis palīdz noņemt sasalušās barotnes sastāvdaļas. Pēc tam šūnu granulas resuspendē, un šūnas pārnes uz jaunu kolbu, kas piepildīta ar barotni. Pēc tam šūnas ievieto inkubatorā 37 °C temperatūrā vismaz uz 24 stundām.
Bioloģiskās drošības līmenis:	Neiro-2a kultūru apstrādei un uzturēšanai obligāti jāizmanto 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijas iekārtas.

Mikroskopisks attēls ar agrīnu neiroblastomas neiroblastomas šūnu agrīnu pasāžu, kurā redzama to morfoloģija 10x un 20x palielinājumā.

3. Neuro-2a šūnu līnijas priekšrocības un trūkumi

Neuro-2a šūnām ir dažas priekšrocības un trūkumi, kas tās atšķir no citām neironu šūnu līnijām. Šeit ir uzskaitīti daži nozīmīgi šo šūnu plusi un mīnusi.

Priekšrocības

Neuro-2a mūzas neiroblastomas šūnu līnijas priekšrocības ir šādas:

Viegli uzturēt
Neuro-2a šūnu līnija nav saistīta ar sarežģītām vai sarežģītām šūnu kultivēšanas procedūrām. Tās ir viegli kultivēt un uzturēt pētniecības laboratorijās.
In vitro neironu šūnu modelis
Neuro-2a ir ērts neironu šūnu modelis, ko pētnieki plaši izmanto neironu attīstības un diferenciācijas pētījumos.

Trūkumi

Neuro-2a šūnu trūkumi ir šādi:

Murīnu izcelsme
Neuro-2a ir peļu izcelsmes, un pētniekiem jābūt piesardzīgiem, ekstrapolējot uz pelēm balstītu pētījumu rezultātus uz cilvēku veselību un slimībām, jo peļu un cilvēku bioloģija var būtiski atšķirties.

4. Neuro-2a šūnu līnijas izmantošanas iespējas pētniecībā

Neuro-2a šūnas var plaši izmantot neirozinātnes pētījumu jomā. Šeit ir aplūkoti daži daudzsološi šīs šūnu līnijas izmantošanas veidi:

Neironu attīstība: Neuro-2a ir in vitro neironu šūnu modelis, ko plaši izmanto, lai pētītu neironu attīstību un ar to saistītos procesus, piemēram, diferenciāciju, aksonu augšanu un sinapses veidošanos. Pētījumā, kas veikts 2020. gadā, tika izmantotas Neuro-2a šūnas, lai izpētītu mikroRNA-124 lomu retinoīnskābes izraisītā neironu šūnu diferenciācijā [2]. Citā pētījumā tika pētīta Neuro 2a retinoīnskābes receptoru gamma (RARG) un miRNA-124 ekspresija neiroblastomas šūnu līnijā (N2A). Šajā pētījumā tika ierosināts, ka RARG ir miR-124 mērķauditorija un nomāc neirītu augšanu [3].
Neirotoksicitāte: Neuro-2a izmanto arī, lai novērtētu zāļu, ķīmisko vielu vai vides faktoru toksisko ietekmi uz nervu šūnām. Piemēram, Zhihong Yin un līdzstrādnieku veiktajā pētījumā tika pētīta vides ķīmiskās vielas bisfenola A (BPA) neirotoksicitāte, izmantojot Neuro-2a šūnas. Viņi novēroja, ka BPA nomāc neironu šūnu diferenciāciju un proliferāciju, izjaucot to šūnu un sinaptisko integritāti [4].
Zāļu skrīnings: Neuro-2a šūnas tiek izmantotas arī vairāku zāļu, savienojumu un dabas produktu terapeitiskās aktivitātes novērtēšanai. Piemēram, kādā pētījumā, izmantojot Neuro-2a šūnas, tika pētīts Gingko biloba augu ekstrakta antioksidatīvais potenciāls. Turklāt pētījumā tika ierosināts, ka tas izraisa Aβ agregācijas samazināšanos un var būt potenciāls Alcheimera slimības ārstēšanas līdzeklis [5].

430,00 €*

Saturs: 1.5 milliliter

Cenas bez nodokļiem un piegādes izmaksām

cryovial

Produkta numurs: 400394

5. Pētnieciskās publikācijas ar Neuro-2a šūnām

Šeit ir daži interesanti pētījumi, kuros izmantota Neuro-2a šūnu līnija.

Piperine-like alkamides from Piper nigrum induce BDNF promotors and promote neurite outgrowth in Neuro-2a cell

Šajā pētījumā, kas 2018. gadā publicēts žurnālā Journal of Natural Medicines, tika pētīta no baltajiem pipariem (P. nigrum) izolētu alkamīdu terapeitiskā iedarbība uz Neuro-2a neironu šūnām.

Nkx2. 1 downregulation ir saistīta ar smadzeņu anomālijām, ko izraisa retinoīnskābes pārpalikums

Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020. gadā, ierosināts, ka Nkx2.1 gēnam ir svarīga loma peļu smadzeņu attīstībā, regulējot Shh signalizācijas kaskādi.

Bisfenola A iedarbība izraisa neirotoksicitāti, kas saistīta ar sinaptisko un citoskeleta disfunkciju neiro-2a šūnās

Šis raksts publicēts žurnālā Toxicology and Industrial Health (2023), un tajā ierosināts, ka vides ķīmiskā viela bisfenols A izraisa neirotoksicitāti neiro-2a šūnās un traucē to sinaptisko un citoskeleta disfunkciju.

Heksarelīna modulācija MAPK un PI3K/Akt ceļiem neiro-2A šūnās inhibē ūdeņraža peroksīda izraisīto apoptozes toksicitāti

Šajā rakstā, kas publicēts žurnālā Pharmaceuticals (2021), ierosināts, ka medikaments heksarelīns modulē PI3K/AKT un MAPK kaskādi neiroblastomas šūnās (Neuro-2a) un inhibē ūdeņraža peroksīda izraisītu neiroblastomas šūnu apoptozi.

Emblica officinalis etanoliskais augļu ekstrakts nomāc neiroinflammation mikroglijā un veicina neirītu augšanu Neuro2a šūnās

Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021), ierosināts, ka Emblica officinalis augļu ekstrakts nomāc neiroiekaisli Neuro-2a šūnās un tādējādi var labvēlīgi ietekmēt neiroinflammatory slimības.

6. Neuro-2a šūnu resursi: Protokoli, videomateriāli un citi resursi

Turpmāk uzskaitīti tiešsaistē pieejamie resursi par Neuro-2a šūnām. Tie ietver Neuro-2a šūnu kultūru un transfekcijas protokolu.

Neuro-2a transfekcijas protokols: Neuro-2a ir piemērots transfekcijas saimnieks. Šī saite sniegs norādījumus par šūnu līnijas transfekcijas protokolu. Neuro 2a transfekcijas efektivitāte atšķiras atkarībā no reaģenta.

Šajā saitē ir Neuro-2a šūnu kultūras protokols.

Neuro-2a šūnu kultūras protokols: Šī saite palīdzēs jums uzzināt neuro 2a šūnu subkulturēšanas protokolu.
Neuro-2a šūnas: Šajā tīmekļa vietnē ir sniegtas vispusīgas zināšanas par Neuro-2a šūnu barotnēm, izsējas blīvumu un protokoliem kriokonservēto un proliferatīvo kultūru subkulturēšanai un apstrādei.

Atsauces

Lulevich, V., et al., Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neironal cell interactions. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
You, Q., et al., MiR-124 loma retinoīnskābes izraisītas neiro-2A šūnu diferenciācijas regulēšanā. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
Su, X., et al., Retīnskābes gamma receptoru mērķē mikroRNA-124 un inhibē neirītu izaugšanu. Neuropharmacology, 2020. 163: p. 107657.
Yin, Z., et al., Bisphenol-A exposure induced neurotoxicity and related with synapse and cytoskeleton in Neuro-2a cells. Toxicology in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
Chen, L., et al., Gingko biloba ekstrakts (EGb) inhibē oksidatīvo stresu neiro 2A šūnās, kas pārmērīgi ekspresē APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.