Šūnu kultūras barotnes
Cytion lepojas ar to, ka piedāvā plašu šūnu kultūras barotņu klāstu, kas veicina veselīgu zīdītāju šūnu augšanu. Mūsu šūnu kultūras barotnes spēlē būtisku lomu optimālas kultūras vides radīšanā, nodrošinot šūnu funkcionēšanai un augšanai nepieciešamos barības vielas un augšanas faktorus.
Mūsu šūnu kultūras barotnes ir ieguvušas uzticību pētniekiem visā pasaulē. Katrs produkts ir ražots precīzi, ievērojot publicētās sākotnējās formulas vai tālāk attīstīts, lai atbilstu augstākajām prasībām. No labi iedibinātajām klasiskajām barotnēm, piemēram, DMEM vai RPMI, līdz specializētām barotnēm un kriokonservācijas barotnēm, mums ir plašs klāsts, lai apmierinātu dažādu lietojumu un šūnu tipu unikālās prasības.
Izvēloties Cytion kā uzticamu šūnu kultūras barotņu piegādātāju, jūs varat būt pārliecināts par veiksmīgu šūnu kultūru veidošanu, vienlaikus baudot konkurētspējīgas cenas. Mēs esam apņēmušies atbalstīt jūsu pētniecības centienus un palīdzēt jums sasniegt izcilus rezultātus.
Kas ir EMEM sastāvā?
EMEM ir modificēta Eagle's minimālās nepieciešamās barotnes versija, kas satur Earle's Balanced Salt Solution Solution, nebūtiskas aminoskābes, L-glutamīnu, nātrija piruvātu un nātrija bikarbonātu. Svarīgi atzīmēt, ka šāds nātrija bikarbonāta līmenis ir paredzēts lietošanai 5 % CO2 gaisā. Lai saglabātu tās efektivitāti, ieteicams barotni uzglabāt 2 °C līdz 8 °C temperatūrā tumsā, kad tā netiek lietota.
Kam izmanto EMEM?
Eagle's minimal essential medium (EMEM) ir šūnu kultūru barotne, kas var uzturēt šūnas audu kultūrā. Šī barotne satur aminoskābju augstāku koncentrāciju, kas ļauj precīzāk tuvināt kultivēto zīdītāju šūnu olbaltumvielu sastāvu. EMEM var izmantot dažādu šūnu, tostarp fibroblastu, cilvēka aknu vēža šūnu līnijas (HepG2) šūnu un cilvēka augļa smadzeņu progenitoru atvasinātu astrocītu šūnu (PDA) kultivēšanai. Parasti to izmanto, pievienojot fetālo liellopu serumu (FBS), teļa vai zirga serumu.
Ar ko EMEM atšķiras no citām šūnu kultūru barotnēm?
Lai gan EMEM un Dulbekko modificētajai Eagle barotnei (DMEM) ir dažas līdzības, tās arī atšķiras. Abās barotnēs trūkst olbaltumvielu, un tās satur aminoskābes, sāļus, glikozi un vitamīnus, kas nepieciešami, lai nodrošinātu šūnu ar enerģiju un uzturētu tās audu kultūrā. Tomēr DMEM sastāvs ir modificēts tā, ka tajā ir līdz četrām reizēm vairāk vitamīnu un aminoskābju un divas līdz četras reizes vairāk glikozes nekā EMEM. Ir vērts atzīmēt, ka EMEM atšķiras arī no oriģinālā MEM sastāva.
Kvalitātes kontrole
Sterili filtrēts
Uzglabāšana un derīguma termiņš
Uzglabāt no gaismas pasargātā +2°C līdz +8°C temperatūrā.
Pēc atvēršanas uzglabāt 4°C temperatūrā un izmantot 6-8 nedēļu laikā.
Pārvadāšanas nosacījumi
Apkārtējā temperatūra
Uzturēšana
Uzglabāt ledusskapī no +2°C līdz +8°C temperatūrā, tumsā. Izvairīties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37°C, jo tas samazina produkta kvalitāti.
Nesildiet barotni augstāk par 37°C un neizmantojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis.
Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai.
Sastāvs
Kategorija
Sastāvdaļas
Koncentrācija (mg/l)
Aminoskābes
L-arginīns HCl
126.00
L-cistīns 2 HCl
31.30
L-glutamīns
292.00
L-Histidīns HClH2O
42.00
L-izoleicīns
52.00
L-leicīns
52.00
L-lizīns HCl
72.50
L-metionīns
15.00
L-fenilalanīns
32.00
L-treonīns
48.00
L-triptofāns
10.00
L-tirozīns 2 Na 2H2O
51.90
L-valīns
46.00
Vitamīni
Holīna hlorīds
1.00
Vitamīni
D-kalcija pantotenāts
1.00
Folijskābe
1.00
mio-Inozitols
2.00
Nikotīnamīds
1.00
Piridoksāls HCl
1.00
Riboflavīns
0.10
Tiamīna HCl
1.00
Neorganiskie sāļi
CaCl2 2H2O
265.00
Neorganiskie sāļi
KCl
400.00
MgSO4
97.67
NaCl
6800.00
NaHCO3
2200.00
NaH2PO4
122.00
Citi komponenti
D-glikoze
1000.00
Citi komponenti
Fenola sarkanais nātrija sāls
11.00
Freeze Medium CM-1 galvenās īpašības:
Plaša saderība: Efektīva dažādiem šūnu tipiem, tostarp primārajām šūnām, cilmes šūnām un izveidotām šūnu līnijām.
Augsta dzīvotspēja: Optimizēta, lai pēc atkausēšanas maksimāli palielinātu šūnu reģenerāciju un dzīvotspēju, nodrošinot uzticamus eksperimentu rezultātus.
Gatavs lietošanai: Ērti sagatavotas un sterilizētas tūlītējai lietošanai, samazinot sagatavošanas laiku un piesārņojuma risku.
Uzlabota stabilitāte: Uztur nemainīgu veiktspēju standarta kriokonservēšanas apstākļos, nodrošinot reproducējamus rezultātus.
Ilgs glabāšanas laiks: CM-1 ir serumu saturoša, lietošanai gatava kriokonservēšanas barotne, ko var uzglabāt ledusskapī līdz pat vienam gadam.
CM-1 izmantošana šūnu sasaldēšanai
Lai izmantotu CM-1 gan adhēzijas, gan suspensijas šūnu sasaldēšanai, izpildiet šādas darbības
Attiecībā uz adhēzīvām šūnām tās nomazgā un atdala no kultūras substrāta. Suspensijas šūnām pārejiet uz nākamo soli.
Saskaitiet šūnas, lai pārliecinātos, ka to koncentrācija ir atbilstoša.
Centrifugējiet šūnas, lai tās granulētu, pēc tam atkārtoti suspendējiet CM-1 sasaldēšanas barotnē.
Resuspendētās šūnas pārvietot kriokivās.
Pirms šūnu pārvietošanas uz ilgtermiņa uzglabāšanu izmantojiet lēnas sasaldēšanas metodi
Metode
Apraksts
Soļi
❄️
Manuāla sasaldēšana
Pakāpeniska metode, kas ietver pakāpenisku temperatūras pazemināšanu, lai nodrošinātu šūnu dzīvotspēju
1️⃣ Ievietojiet šūnas sasaldēšanas barotnē 4 °C saldētavā uz 40 minūtēm.
2️⃣ Uz 24 stundām pārvietot uz -80°C saldētavu.
3️⃣ Ilgtermiņa uzglabāšanai šūnas uzglabāt šķidrā slāpeklī
❄️
Frosty kunga izmantošana
Ērta ierīce, kas ļauj kontrolēt sasaldēšanas ātrumu bez elektriskās strāvas
1️⃣ Sagatavojiet šūnas krioviālos ar sasaldēšanas barotni.
2️⃣ Ievietojiet krioviālus Mr. Frosty konteinerā.
3️⃣ Pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli 24 stundas uzglabāt -80 °C temperatūrā
❄️
Kontrolēta ātruma saldētava
Thermo Fisher vai citu ražotāju augstas precizitātes saldētava, kas paredzēta kontrolētai temperatūras pazemināšanai
1️⃣ Ierīci ieprogrammējiet tā, lai pakāpeniski pazeminātu temperatūru.
2️⃣ Ievietojiet sagatavotās šūnas saldētavā.
3️⃣ Pēc sasaldēšanas cikla šūnas pārceliet uz šķidro slāpekli
Glabājiet krioviālus temperatūrā, kas zemāka par -130 °C, vai šķidrā slāpeklī ilgstošai uzglabāšanai.
Sastāvdaļas
Satur FBS, DMSO, glikozi, glikozi, sāļus
Buferizācijas spēja: pH = 7,2 līdz 7,6
Cytion's Freeze Medium CM-1 piedāvā uzticamu risinājumu kriokonservēšanai, nodrošinot augstu šūnu dzīvotspēju un funkcionalitāti pēc atkausēšanas visdažādākajiem pētniecības lietojumiem.
- specializētu Ham's F-12 barotnes modifikāciju, kas izstrādāta, lai atbilstu unikālām bioloģisko pētījumu prasībām. Šī uzlabotā barotne piedāvā īpašas priekšrocības, uzlabojot primāro cilvēka hepatocītu, kā arī žurku un vistu aknu šūnu kultivēšanu, jo īpaši pazemināta seruma apstākļos.
Ham's F-12K (Kaighn's) barotne ir rūpīgi izstrādāta, lai optimizētu šūnu kultūras apstākļus. Tai ir bagātināts sastāvs, kas nodrošina paaugstinātu tādu būtisku sastāvdaļu kā aminoskābju un nātrija piruvāta, kā arī papildu elementu, tostarp putrescīna, timidīna, hipoksantīna un cinka, līmeni. Šie papildinājumi ļauj pētniekiem papildināt barotni ar minimālu seruma daudzumu vai noteiktiem komponentiem konkrētiem šūnu tipiem, tādējādi atvieglojot precīzus eksperimentālos apstākļus.
Hama F-12K (Kaigna) barotne nesatur olbaltumvielas vai augšanas faktorus. Tāpēc bieži vien ir nepieciešama papildināšana ar augšanas faktoriem un Fetal Bovine Serum (FBS), kas ļauj pētniekiem pielāgot barotni savu konkrēto šūnu līniju prasībām. Lai nodrošinātu optimālu veiktspēju, FBS koncentrācija ir rūpīgi jāoptimizē katrai šūnu līnijai, nodrošinot optimālu augšanu un funkcionalitāti.
Lai uzturētu fizioloģisko pH, Hama F-12K (Kaighn's) barotnē izmanto nātrija bikarbonāta buferisko sistēmu (2,5 g/l), tāpēc kultivēšanas laikā ir nepieciešama kontrolēta 5-10 % CO2 vide. Tas nodrošina, ka barotnes pH saglabājas ideālā diapazonā šūnu augšanai un dzīvotspējai
Kvalitātes kontrole
pH = 7,2 +/
- 0,02 20-25 °C temperatūrā.
Katra partija ir pārbaudīta attiecībā uz sterilitāti un mikoplazmas un baktēriju neesamību.
Uzturēšana
Glabāt ledusskapī +2°C līdz +8°C temperatūrā tumsā. Sasaldēšana, kā arī sasilšana līdz +37°C samazina produkta kvalitāti.
Nesildiet barotni līdz temperatūrai, kas pārsniedz 37°C, un neizmantojiet nekontrolējamus siltuma avotus (piemēram, mikroviļņu krāsnis).
Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, izņemiet šo daudzumu no pudeles un uzsildiet to istabas temperatūrā.
Jebkuras barotnes, izņemot pamata barotni, derīguma termiņš ir 8 nedēļas no izgatavošanas datuma.
Sastāvs
Sastāvdaļas
mg/l
Neorganiskie sāļi
Kalcija hlorīds x 2H2O
135,24
Vara(II) sulfāts x 5H2O
0,00
Dzelzs (II) sulfāts x 7H2O
0,83
Magnija hlorīds x 6H2O
105,72
Magnija sulfāts x 7H2O
394,49
Kālija hlorīds
283,29
Kālija dihidrogēnfosfāts
58,52
Nātrija hlorīds
7597,20
nātrija hidrogēnfosfātsbezūdens
115,02
Cinka sulfāts x 7H2O
0,14
Citi komponenti
D(+)-glikoze, bezūdens viela
1260,00
Hipoksantīns
4,08
DL-α-liposkābe
0,21
Fenola sarkanais
3,00
Putrescīns x 2HCl
0,32
Nātrija piruvāts
220,00
NaHCO3
2500,00
Timidīns
0,73
Aminoskābes
L-alanīns
17,82
L-arginīns x HCl
421,40
L-asparagīns x H2O
30,02
L-asparagīnskābe
26,62
L-cisteīns x HCl x H2O
70,24
L-glutamīns
292,20
L-glutamīnskābe
29,42
Glicīns
15,01
L-histidīns x HCl x H2O
41,92
L-izoleicīns
7,87
L-leicīns
26,24
L-lizīns x HCl
73,04
L-metionīns
8,95
L-fenilalanīns
9,91
L-Prolīns
69,06
L-serīns
21,02
L-treonīns
23,82
L-triptofāns
4,08
L-tirozīns
10,87
L-valīns
23,42
Vitamīni
D(+)-biotīns
0,07
D-kalcija pantotenāts
0,48
Holīna hlorīds
13,96
Folijskābe
1,32
mio-inositols
18,02
Nikotīnamīds
0,04
Piridoksīns x HCl
0,06
Riboflavīns
0,04
Tiamīns x HCl
0,34
B12 vitamīns
1,36
Sākotnēji izstrādāta cilvēka leikēmisko šūnu augšanai suspensijas un monoslāņa kultūrās, RPMI 1640 barotne, pētniekiem un komerciālajiem piegādātājiem veicot modifikācijas, ir kļuvusi piemērota dažādām zīdītāju šūnām. Tā ir īpaši saderīga ar tādām šūnu līnijām kā HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocīti un karcinomas.
RPMI 1640 barotne atšķiras no citām šūnu kultūru barotnēm ar savu unikālo sastāvu. Tā satur ievērojamu daudzumu fosfātu, aminoskābju un vitamīnu. Īpaši svarīgi, ka tajā ir biotīns, vitamīns B12 un PABA, kas nav iekļauti Eagle's Minimal Essential Medium vai Dulbecco's Modified Eagle Medium. Turklāt RPMI 1640 barotnē ir ievērojami paaugstināta vitamīnu inozitola un holīna koncentrācija. Tomēr tā nesatur olbaltumvielas, lipīdus vai augšanas faktorus. Tāpēc, lai nodrošinātu optimālus apstākļus šūnu augšanai, parasti ir nepieciešama papildināšana ar 10 % Fetal Bovine Serum (FBS).
RPMI 1640 barotnes buferēšanas sistēma balstās uz nātrija bikarbonātu, un, lai uzturētu fizioloģiski piemērotu pH, tai nepieciešama 5-10 % CO2 vide. Reducējošā aģenta glutationa iekļaušana vēl vairāk atšķir šo barotni no citām.
Kvalitātes kontrole
Sterili filtrēts
Uzglabāšana un derīguma termiņš
Uzglabāt no gaismas pasargātā +2 °C līdz +8 °C temperatūrā.
Pēc atvēršanas uzglabāt 4°C temperatūrā un lietot 6-8 nedēļu laikā.
Pārvadāšanas nosacījumi
Apkārtējā temperatūra
Uzturēšana
Uzglabāt ledusskapī no +2°C līdz +8°C temperatūrā, tumsā. Izvairīties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37°C, jo tas samazina produkta kvalitāti.
Nesildiet barotni augstāk par 37°C un neizmantojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis.
Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai.
Sastāvs
Kategorija
Sastāvdaļas
Koncentrācija (mg/l)
Aminoskābes
Glicīns
10.00
L-alanil-L-glutamīns
434.40
L-arginīns
200.00
L-asparagīnsH2O
56.82
L-asparagīnskābe
20.00
L-cistīns 2HCl
65.20
L-glutamīnskābe
20.00
L-Histidīns HClH2O
20.27
L-Hidroksi-L-Prolīns
20.00
L-izoleicīns
50.00
L-leicīns
50.00
L-lizīns HCl
40.00
L-metionīns
15.00
L-fenilalanīns
15.00
L-Prolīns
20.00
L-serīns
30.00
L-treonīns
20.00
L-triptofāns
5.00
L-tirozīns 2Na 2H2O
28.83
L-Valīns
20.00
Vitamīni
p-amīnbenzoskābe
1.00
D-Biotīns
0.20
Holīna hlorīds
3.00
D-kalcija pantotenāts
0.25
Folijskābe
1.00
mio-Inozitols
35.00
Nikotīnamīds
1.00
Piridoksīna HCl
1.00
Riboflavīns
0.20
Tiamīna HCl
1.00
B12 vitamīns
0.005
Neorganiskie sāļi
Ca(NO3)2 4H2O
100.00
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
100.00
NaCl
6000.00
NaHCO3
2000.00
Na2HPO4
800.00
Citi komponenti
D-glikoze
2000.00
L-Glutationa reducēts
1.00
Fenola sarkanais nātrija sāls
5.30
Šis unikālais preparāts apvieno Dulbekko modificēto Ērgļa barotni (DMEM) un Hama F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) precīzā proporcijā 1:1. Tās sastāvu vēl vairāk uzlabo L-glutamīna pievienošana.
DMEM, kas atvasināts no Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), piedāvā lielāku aminoskābju un vitamīnu koncentrāciju, salīdzinot ar iepriekšējo. Turpretī Ham's F-12 pamatā ir Ham's F-10 barotne, kas nodrošina papildu svarīgāko sastāvdaļu kopumu.
Lai nodrošinātu optimālu šūnu augšanu, DMEM:Ham's F12 parasti papildina ar FBS 5-10 % koncentrācijā. Šī piedeva ir nepieciešama, jo barotnei trūkst augšanas hormonu, lipīdu un olbaltumvielu, kas ir būtiski šūnu attīstībai.
DMEM:Ham's F12 ietver pH buferu sistēmu, un to bieži papildina ar pH indikatoru
- fenola sarkano. Lai uzturētu atbilstošu pH līmeni, šūnām, kas kultivētas DMEM:Ham's F12 vai jebkurā barotnē, kurā izmantota bikarbonāta bufera sistēma, nepieciešama kontrolēta CO2 vide 5-10 % apmērā.
Kvalitātes kontrole
Sterili filtrēts
Uzglabāšana un derīguma termiņš
Uzglabāt no gaismas pasargātā +2 °C līdz +8 °C temperatūrā.
Pēc atvēršanas uzglabāt 4°C temperatūrā un lietot 6-8 nedēļu laikā.
Pārvadāšanas nosacījumi
Apkārtējā temperatūra
Uzturēšana
Uzglabāt ledusskapī no +2°C līdz +8°C temperatūrā, tumsā. Izvairīties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37°C, jo tas samazina produkta kvalitāti.
Nesildiet barotni augstāk par 37°C un neizmantojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis.
Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai.
Sastāvs
Kategorija
Sastāvdaļas
Koncentrācija (mg/l)
Aminoskābes
Glicīns
18.75
L-alanīns
4.45
L-arginīns HCl
147.50
L-asparagīns H₂O
7.50
L-asparagīnskābe
6.65
L-cisteīns HCl H₂O
17.56
L-cistīns 2 HCl
31.29
L-glutamīnskābe
7.35
L-glutamīns
365.00
L-Histidīna HCl H₂O
31.48
L-izoleicīns
54.47
L-leicīns
59.05
L-lizīna HCl
91.25
L-metionīns
17.24
L-fenilalanīns
35.48
L-Prolīns
17.25
L-serīns
26.25
L-treonīns
53.45
L-triptofāns
9.02
L-tirozīna dinātrija sāls
48.10
L-valīns
52.85
Vitamīni
D-Biotīns
0.0035
Holīna hlorīds
8.98
D-kalcija pantotenāts
2.24
Folijskābe
2.66
mio-Inozitols
12.60
Nikotīnamīds
2.02
Piridoksīna HCl
0.031
Piridoksāla HCl
2.00
Riboflavīns
0.219
Tiamīna HCl
2.17
B12 vitamīns
0.68
Neorganiskie sāļi
CaCl₂ 2 H₂O
154.50
CuSO₄ 5 H₂O
0.0013
Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05
FeSO₄ 7 H₂O
0.417
KCl
311.80
MgCl₂ 6 H₂O
61.20
MgSO₄
48.84
NaCl
6996.00
NaHCO₃
1200.00
Na₂HPO₄
71.02
NaH₂PO₄
54.30
ZnSO₄ 7 H₂O
0.432
Citi komponenti
D-glikoze
3151.00
Hipoksantīns
2.40
HEPES
3574.50
Linolskābe
0.042
Liposkābe
0.105
Fenola sarkanais nātrija sāls
8.63
Putrescīns 2 HCl
0.081
Nātrija piruvāts
55.00
Timidīns
0.365
- 0,02 pie 20-25 °C. Katra partija ir pārbaudīta uz sterilitāti un mikoplazmas un baktēriju neesamību. Uzglabāšana Uzglabāt ledusskapī +2 °C līdz +8 °C temperatūrā, nošķirti no gaismas. Saldēšana un sildīšana līdz +37 °C pazemina produkta kvalitāti. Neuzkarsējiet barotni līdz vairāk nekā 37 °C un neizmantojiet nekontrolējamas siltuma avotus (piemēram, mikroviļņu krāsnis). Ja ir jāizmanto tikai daļa barotnes, izņemiet šo daudzumu no pudeles un sildiet to istabas temperatūrā. Jebkura barotnes, izņemot pamata barotni, glabāšanas termiņš ir 6 līdz 8 nedēļas no atvēršanas brīža. Sastāvs Sastāvdaļas mg/L Neorganiskie sāļiKalcija hlorīds x 2H2O132,00 Magnija sulfāts97,67 Kālija hlorīds400,00 Nātrija hlorīds6460,00 Dinātrija hidrogēnfosfāts (bezūdens)504,00 Citi komponentiD(+)-glikoze (bezūdens)3000 Glutationa (reducēts)0,5 Gaļas peptonis600,00 Fenola sarkanais nātrija sāls11 AminoskābesL-alanīns13,36 L-arginīns x HCl42,14 L-asparagīns x H2O45,03 L-asparagīnskābe19,97 L-cisteīns x HCl x H2O31,75 L-glutamīns (stabils)219,15 L-glutamīnskābe22,07 Glicīns7,51 L-histidīns x HCl x H2O20,96 L-hidroksiprolīns19,67 L-izoleicīns39,36 L-leicīns39,36 L-lizīns x HCl36,54 L-metionīns14,92 L-fenilalanīns16,52 L-prolīns17,27 L-serīns26,28 L-treonīns17,87 L-triptofāns3,06 L-tirozīna dinātrija sāls26,10 L-valīns17,57 Vitamīnip-Aminobenzoīnskābe1,0 Askorbīnskābe0,56 D(+)-biotīns0,20 D-kalcija pantotenāts0,20 Holīna hlorīds5,0 Folijskābe10 mio-inozitols36 Nikotinamīds0,5 Nikotīnskābe0,5 Piridoksāla HCl0,50 Piridoksīna HCl0,50 Riboflavīns0,20 Tiamīna HCl0,20 Vitamīns B122,00
Barotne 199 piedāvā virkni pielietojumu šajā jomā. Ar to var efektīvi uzturēt kumulus-ocītu kompleksu (COC) un atbalstīt olšūnu nobriešanu in vitro. Turklāt to izmanto aspirācijas līniju skalošanai, vācot olšūnas no Vācijas Holšteinas govīm. Turklāt Medium 199 ir lieliska barotne no žurkām iegūtu sirds endotēlija šūnu kultivēšanai. Šie pielietojumi liecina par barotnes 199 daudzpusību un pielāgojamību dažādām eksperimentālām vajadzībām.
Vēsture
Šķīduma Nr. 199 izstrāde pagājušā gadsimta 50. gados iezīmēja ievērojamu progresu audu kultūru barotņu jomā. Pirms tās ieviešanas daudzas barotnes balstījās uz dzīvnieku izcelsmes produktiem un audu ekstraktiem. Tomēr Morgans un kolēģi radīja apvērsumu šajā jomā, formulējot pilnīgi noteiktu barības avotu šūnu kultūrām. Veicot eksperimentus ar dažādām vitamīnu, aminoskābju un citu faktoru kombinācijām, viņi atklāja, ka barotnei Nr. 199 piemīt izcilas augšanu veicinošas īpašības.
Kvalitātes kontrole
pH = 7,2 +/
- 0,02 20-25 °C temperatūrā.
Katra partija ir pārbaudīta attiecībā uz sterilitāti un mikoplazmas un baktēriju neesamību.
Uzturēšana
Uzglabāt ledusskapī +2°C līdz +8°C temperatūrā, tumsā. Sasaldēšana un sasilšana līdz +37 °C samazina produkta kvalitāti.
Nesildiet barotni līdz temperatūrai, kas pārsniedz 37° C, un neizmantojiet nekontrolējamus siltuma avotus (piemēram, mikroviļņu krāsnis).
Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, izņemiet šo daudzumu no pudeles un uzsildiet to istabas temperatūrā.
Jebkuras barotnes, izņemot pamata barotni, derīguma termiņš ir 8 nedēļas no izgatavošanas datuma.
Sastāvs
Sastāvdaļas
mg/l
Neorganiskie sāļi
Kalcija hlorīds x 2H2O
264,92
Dzelzs (III) nitrāts x 9H2O
0,72
Magnija sulfāts
97,67
Kālija hlorīds
400,00
Nātrija acetāts x 3H2O
82,95
Nātrija hlorīds
6,800.00
Nātrija dihidrogēnfosfāts x H2O
140,00
Citi komponenti
Adenīna sulfāts
10,00
AMP
0,20
ATP
1,00
Holesterīns
0,20
2'-deoksiriboze
0,50
D(+)-glikoze bezūdens
1,000.00
Glutations (sarkans)
0,05
Guanīns x HCl
0,30
Hipoksantīns
0,30
Fenola sarkanais
10,00
D-riboze
0,50
Timīns
0,30
Tween 80
4,90
Uracils
0,30
Ksantīns
0,30
NaHCO3
2,200.00
Aminoskābes
L-alanīns
25,00
L-arginīns x HCl
70,00
L-asparagīnskābe
30,00
L-cisteīns x HCl x H2O
0,10
L-cistīns
20,00
L-glutamīns stabils
149,00
L-glutamīnskābe
67,00
Glicīns
50,00
L-histidīns x HCl x H2O
21,88
L-hidroksiprolīns
10,00
L-izoleicīns
20,00
L-leicīns
60,00
L-lizīns x HCl
70,00
L-metionīns
15,00
L-fenilalanīns
25,00
L-Prolīns
40,00
L-serīns
25,00
L-treonīns
30,00
L-triptofāns
10,00
L-tirozīns
40,00
L-valīns
25,00
Vitamīni
4-amino benzoskābe
0,05
Askorbīnskābe
0,05
D(+)-biotīns
0,01
Kalciferols
0,10
D-kalcija pantotenāts
0,01
Holīna hlorīds
0,50
Folijskābe
0,01
mio-inositols
0,05
Menadions
0,01
Nikotīnskābe
0.025
Nikotīnamīds
0.025
Piridoksāls x HCl
0.025
Piridoksols x HCl
0.025
Riboflavīns
0,01
DL-α-tokoferola fosfāta dinātrija sāls
0,01
Tiamīns x HCl
0,01
Vitamīna A acetāts
0,14
IMDM ir labi piemērots strauji proliferējošām, augsta blīvuma šūnu kultūrām, tostarp Jurkat, COS-7 un makrofāgu šūnām. Dažādas IMDM modifikācijas, kas pieejamas dažādiem šūnu kultūru lietojumiem, var atrast, izmantojot barotņu atlases rīku. Šķidrās barotnes nodrošina būtiskas barības vielas visiem šūnu kultūru lietojumiem. Katra no mūsu augstas kvalitātes šūnu kultūru barotnēm tiek ražota saskaņā ar sākotnēji publicēto formulu vai modifikācijām, kas nepieciešamas, lai nodrošinātu kultūras barotnes nemainīgu veiktspēju un stabilitāti.
IMDM pret DMEM
IMDM dzelzs nitrāta vietā ir kālija nitrāts, kā arī HEPES un nātrija piruvāts. IMDM papildu komponenti padara to piemērotāku specializētiem šūnu tipiem un specifiskiem lietojumiem nekā DMEM.
IMDM pret RPMI
IMDM un RPMI ir atšķirīgi sastāvi, kas var būt svarīgi PMA/jonomicīna stimulācijai. Viena būtiska atšķirība ir Ca2+ koncentrācija. RPMI satur 0,42 mM Ca2+, bet IMDM
- 1,49 mM.
Kvalitātes kontrole
pH = 7,2 +/
- 0,02 20-25 °C temperatūrā.
Katra partija ir pārbaudīta attiecībā uz sterilitāti un mikoplazmas un baktēriju neesamību.
Uzturēšana
Uzglabāt ledusskapī +2°C līdz +8°C temperatūrā tumsā. Sasaldēšana un sasilšana līdz +37 °C samazina produkta kvalitāti.
Nesildiet barotni līdz temperatūrai, kas pārsniedz 37° C, un neizmantojiet nekontrolējamus siltuma avotus (piemēram, mikroviļņu krāsnis).
Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, izņemiet šo daudzumu no pudeles un uzsildiet to istabas temperatūrā.
Jebkuras barotnes, izņemot pamata barotni, derīguma termiņš ir 8 nedēļas no izgatavošanas datuma.
Sastāvs
Sastāvdaļas
mg/l
Neorganiskie sāļi
Kalcija hlorīds x 2 H2O
219,00
Kālija hlorīds
330,00
Kālija nitrāts
0.076
Bezūdens magnija sulfāts
97,73
Nātrija hlorīds
4,505.00
Bezūdens nātrija dihidrogēnfosfāts
109,00
Nātrija selenīts
0,02
Citi komponenti
D(+)-glikoze bezūdens
4,500.00
HEPES
5,958.00
Nātrija piruvāts
110,00
Fenola sarkanais
15,00
Aminoskābes
L-alanīns
25,00
L-arginīns x HCl
84,00
L-asparagīns x H2O
25,00
L-asparagīnskābe
30,00
L-cistīns x 2HCl
91,24
L-glutamīns
584,00
L-glutamīnskābe
75,00
Glicīns
30,00
L-histidīns x HCl x H2O
42,00
L-izoleicīns
104,80
L-leicīns
104,80
L-lizīns x HCl
146,20
L-metionīns
30,00
L-fenilalanīns
66,00
L-Prolīns
40,00
L-serīns
42,00
L-treonīns
95,20
L-triptofāns
16,00
L-tirozīns x 2Na
104,20
L-valīns
93,60
Vitamīni
D(+)-biotīns
0.013
D-kalcija pantotenāts
4,00
Holīna hlorīds
4,00
Folijskābe
4,00
mio-inositols
7,20
Viena no tās ievērojamām priekšrocībām ir spēja atbalstīt šūnu augšanu bez seruma papildināšanas. Tas novērš iespējamās seruma sastāvdaļu radītās iejaukšanās, nodrošinot konsekventus un uzticamus eksperimentu rezultātus. Nodrošinot kultūru vidi bez seruma, Hama F-12 barotne pētniekiem nodrošina lielāku kontroli pār saviem pētījumiem.
Vēl viena būtiska Ham's F-12 barotnes īpašība ir tās piemērotība vienšūnu uzslāņošanai. Tāpēc tā ir lieliska izvēle dažādām šūnu līnijām, tostarp CHO šūnām, plaušu šūnām un peļu L šūnām. Barotnes optimizētais barības vielu sastāvs atvieglo atsevišķu šūnu efektīvu piestiprināšanos un augšanu, ļaujot izveidot homogēnas šūnu kultūras ar uzlabotu reproducējamību.
Turklāt Hama F-12 barotne ir atzīta par vēlamo barotni klonu toksicitātes noteikšanai (CTA). Šim testam ir izšķiroša nozīme, novērtējot vielu citotoksisko iedarbību uz šūnām. Izmantojot Hama F-12 barotni CTA, pētnieki var precīzi novērtēt dažādu savienojumu vai apstrādes ietekmi uz atsevišķām šūnām, sniedzot vērtīgu ieskatu par toksikoloģiskajiem profiliem.
Kvalitātes kontrole
pH = 7,2 +/
- 0,02 20-25 °C temperatūrā.
Katra partija ir pārbaudīta attiecībā uz sterilitāti un mikoplazmas un baktēriju neesamību.
Uzturēšana
Uzglabāt ledusskapī +2°C līdz +8°C temperatūrā tumsā. Sasaldēšana un sasilšana līdz +37 °C samazina produkta kvalitāti.
Nesildiet barotni līdz temperatūrai, kas pārsniedz 37° C, un neizmantojiet nekontrolējamus siltuma avotus (piemēram, mikroviļņu krāsnis).
Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, izņemiet šo daudzumu no pudeles un uzsildiet to istabas temperatūrā.
Jebkuras barotnes, izņemot pamata barotni, derīguma termiņš ir 8 nedēļas no izgatavošanas datuma.
Sastāvs
Sastāvdaļas
mg/l
Neorganiskie sāļi
Kalcija hlorīds x 2H2O
44,00
Vara(II) sulfāts x 5H2O
0,00
Dzelzs (II) sulfāts x 7H2O
0,83
Magnija hlorīds x 6H2O
122,00
Kālija hlorīds
223,65
Nātrija hlorīds
7599,00
dinātrija hidrogēnfosfātsbezūdens
142,04
Cinka sulfāts x 7H2O
0,86
Citi komponenti
D(+)-glikoze bezūdens
1801,60
Hipoksantīns
4,08
Linolskābe
0,08
DL-α-liposkābe
0,21
Fenola sarkanais
1,20
Putrescīns x 2HCl
0,16
Nātrija piruvāts
110,00
Timidīns
0,73
NaHCO3
1176,00
Aminoskābes
L-alanīns
8,91
L-arginīns x HCl
210,70
L-asparagīns x H2O
15,01
L-asparagīnskābe
13,31
L-cisteīns x HCl x H2O
35,12
L-alanil-L-Glutamīns
217,30
L-glutamīnskābe
14,71
Glicīns
7,51
L-histidīns x HCl x H2O
20,96
L-izoleicīns
3,94
L-leicīns
13,12
L-lizīns x HCl
36,54
L-metionīns
4,48
L-fenilalanīns
4,96
L-Prolīns
34,53
L-serīns
10,51
L-treonīns
11,91
L-triptofāns
2,04
L-tirozīns
5,44
L-valīns
11,71
Vitamīni
D(+)-biotīns
0,01
D-kalcija pantotenāts
0,24
Holīna hlorīds
13,96
Folijskābe
1,32
mio-inositols
18,02
Nikotīnamīds
0,04
Piridoksīns x HCl
0,06
Riboflavīns
0,04
Tiamīns x HCl
0,34
B12 vitamīns
1,36
Iepazīstiet uzlaboto NCI-H295R šūnu augšanas barotni, kas ir prasmīgi izstrādāts barības šķīdums, kas īpaši paredzēts zīdītāju šūnu līniju, tostarp specializēto NCI-H295R šūnu, augšanas un uzturēšanas veicināšanai. Šī barotne izceļas ar unikālu Dulbekko modificētās Ērgļa barotnes (DMEM) un Hama F-12 (Nutrient Mixture F-12) maisījumu precīzā proporcijā 1:1, kas bagātināts ar būtiskiem papildinājumiem, lai apmierinātu sarežģītās šūnu kultūras vajadzības.
Uzlabots sastāvs izcilai šūnu kultūru veiktspējai
Papildināts bāzes līmenis: Pamata barotne jau ir bagāta, apvienojot DMEM augsto aminoskābju un vitamīnu koncentrāciju ar daudzveidīgām Ham's F-12 barības vielām. Šim spēcīgajam maisījumam mēs esam pievienojuši 5 % Fetālā liellopu seruma (FBS), kas nodrošina svarīgus augšanas faktorus, hormonus un olbaltumvielas.
Pielāgotas piedevas: Papildus FBS šī barotne ir bagātināta ar tādām svarīgām piedevām kā insulīns, transferīns, liellopu seruma albumīns, selēnskābe un linelīnskābe. Šīs piedevas atbilst īpašām šūnu vajadzībām, veicinot šūnu augšanu, metabolisma funkciju un vispārējo veselību.
L-glutamīna Boost: L-glutamīna klātbūtne vēl vairāk pastiprina barotnes efektivitāti, atbalstot būtiskus vielmaiņas procesus un veicinot spēcīgu šūnu proliferāciju.
Optimizēts šūnu kultūrām
pH kontrolēta vide: Barotne nodrošina stabilu pH vidi, jo tajā ir bikarbonāta buferis un fenola sarkanais indikators. Tā ir optimizēta 5 % CO2 atmosfērai, kas ļauj precīzi uzraudzīt un regulēt pH.
Kvalitāte un tīrība: Katrai pamatnes barotnes partijai tiek veiktas stingras sterilitātes, mikoplazmas un baktēriju pārbaudes, nodrošinot barotnes integritāti. Ar pH uzturētu barotni jūs varat paļauties uz šīs barotnes nemainīgu kvalitāti un veiktspēju.
Apstrāde un uzglabāšana
Uzturiet barotnes kvalitāti, uzglabājot to ledusskapī no +2 °C līdz +8 °C temperatūrā, pasargājot no gaismas. Lai saglabātu tās efektivitāti, izvairieties no ekstrēmām situācijām, piemēram, sasalšanas vai pārkaršanas. Daļējas lietošanas gadījumā nepieciešamo daudzumu viegli uzsildiet istabas temperatūrā, nodrošinot, ka barotne tiek sagatavota atbilstošā stāvoklī, nepasliktinot tās sastāvdaļas.
Derīguma termiņš
NCI-H295R šūnu augšanas barotne ar 8 nedēļu glabāšanas termiņu no izgatavošanas datuma ir uzticama izvēle jūsu šūnu kultūru vajadzībām, nodrošinot jūsu pētījumu dzīvotspēju un produktivitāti.
DMEM atšķiras no citām barotnēm ar unikālu sastāvu. Tā satur iespaidīgu četrkāršu aminoskābju un vitamīnu koncentrācijas palielinājumu, salīdzinot ar oriģinālo Eagle's Minimal Essential Medium. Sākotnēji DMEM tika izstrādāta ar zemu glikozes (1 g/l) un nātrija piruvāta saturu, bet tagad to bieži izmanto ar augstāku glikozes saturu, ar nātrija piruvātu vai bez tā. DMEM nesatur olbaltumvielas, lipīdus vai augšanas faktorus, tāpēc to nepieciešams papildināt. Lai panāktu optimālu augšanu, DMEM parasti papildina ar 10 % liellopu fetālā seruma (FBS). Turklāt DMEM izmanto nātrija bikarbonāta bufera sistēmu, un, lai uzturētu fizioloģisku pH, ir nepieciešama 5-10 % CO2 vide.
Dulbekko modificētā Ērgļa barotne (DMEM) ir augsti novērtēta kā noteikta šūnu un audu kultūru barotne, kas apmierina dažādu adherējošu šūnu fenotipu augšanas vajadzības. Tā pārspēj oriģinālo Ērgļa barotni, kas tika izstrādāta pagājušā gadsimta 50. gados vistas šūnu kultivēšanai, pateicoties uzlabotam papildu sastāvam, kas pazīstams kā Dulbekko modifikācija. Šī modifikācija ievērojami palielina atsevišķu aminoskābju un vitamīnu saturu līdz pat četrām reizēm, salīdzinot ar oriģinālo barotni.
Šūnu kultūru jomā DMEM ir būtiska nozīme kā dažādu šūnu tipu, tostarp primāro šūnu, cilmes šūnu un transformētu šūnu, augšanas barotnei. Pētnieki izmanto modificēto DMEM versiju arī dažādiem pētījumiem, piemēram, zāļu atklāšanai, audu inženierijai un šūnu signalizācijas ceļu izpētei.
Kvalitātes kontrole
Sterili filtrēts
Uzglabāšana un derīguma termiņš
Uzglabāt no gaismas pasargātā +2°C līdz +8°C temperatūrā.
Pēc atvēršanas uzglabāt 4°C temperatūrā un izmantot 6-8 nedēļu laikā.
Pārvadāšanas nosacījumi
Apkārtējā temperatūra
Uzturēšana
Uzglabāt ledusskapī no +2°C līdz +8°C temperatūrā, tumsā. Izvairīties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37°C, jo tas samazina produkta kvalitāti.
Nesildiet barotni augstāk par 37°C un neizmantojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis.
Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai.
Sastāvs
Kategorija
Sastāvdaļas
Koncentrācija (mg/l)
Aminoskābes
Glicīns
30.00
L-arginīns HCl
84.00
L-cistīns 2 HCl
62.57
L-glutamīns
584.00
L-Histidīns HClH2O
42.00
L-izoleicīns
105.00
L-leicīns
105.00
L-lizīns HCl
146.00
L-metionīns
30.00
L-fenilalanīns
66.00
L-serīns
42.00
L-treonīns
95.00
L-triptofāns
16.00
L-tirozīns 2 Na 2H2O
103.79
L-valīns
94.00
Vitamīni
Holīna hlorīds
4.00
D-kalcija pantotenāts
4.00
Folijskābe
4.00
mio-Inozitols
7.20
Nikotīnamīds
4.00
Piridoksāls HCl
4.00
Riboflavīns
0.40
Tiamīna HCl
4.00
Neorganiskie sāļi
CaCl2 2H2O
265.00
Fe(NO3)3 9H2O
0.10
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
200.10
NaCl
6400.00
NaHCO3
3700.00
NaH2PO4 2H2O
141.73
Citi komponenti
D-glikoze
4500.00
Fenola sarkanais nātrija sāls
15.90
Nātrija piruvāts
110.00