Accutase šūnu atdalīšanas šķīdums ar EDTA un fenolsarkano – 100 ml

Accutase ir gatavs lietošanai, sterili filtrēts šūnu atdalīšanas šķīdums, kas izstrādāts kā maiga alternatīva tripsīnam/EDTA, lai atdalītu piekļāvušās zīdītāju šūnas no standarta audu kultūras plastmasas traukiem un ar adhezīvu pārklātām virsmām. Tas apvieno proteolītisko un kolagenolītisko enzīmu aktivitāti sabalansētā sāls šķīdumā, lai nodrošinātu efektīvu, bet kontrolētu atdalīšanu, saglabājot šūnu virsmas proteīnus un veicinot augstu dzīvotspēju pēc pārneses un ātru atkārtotu piekļāvēšanos.

Accutase sastāvs ir balstīts uz Dulbecco fosfāta buferšķīdumu (DPBS) ar EDTA un fenolsarkano kā vizuālu pH indikatoru. Fermenti ir ne-zīdītāju un ne-baktēriju izcelsmes, padarot Accutase īpaši piemērotu cilmes šūnu pētniecībai, vakcīnu ražošanas procesiem un jebkurai lietošanai, kurā ir jāminimizē dzīvnieku vai mikrobiālas izcelsmes piesārņotāji. Šķīdums automātiski inhibējas 37 °C temperatūrā, tādēļ pēc atdalīšanas nav nepieciešams neitralizējošs reaģents vai serumu saturošs barotne – šūnas var pārnest tieši svaigā barotnē.

Galvenās īpašības

Lietošanai gatavs 1x sterili filtrēts šķidrums – nav nepieciešama atšķaidīšana vai atjaunošana
Kombinēta proteolītiskā un kolagenolītiskā enzīmu aktivitāte maigai disociācijai
Katra partija standartizēta atbilstoši noteiktam disociācijas aktivitātes līmenim, lai nodrošinātu partiju savstarpēju atbilstību
Enzīmu izcelsme nav saistīta ar zīdītājiem vai baktērijām
Automātiska inhibīcija 37 °C temperatūrā – nav nepieciešams neitralizējošs šķīdums
Formulēts Dulbecco PBS ar EDTA
Fenolsarkans iekļauts kā vizuāls pH indikators
pH 6,8–7,8


Tipiski pielietojumi
Accutase maigi disociē plašu klāstu adhezīvu un jutīgu šūnu tipu, tostarp cilvēka embrionālās cilmes šūnas (hESCs), cilvēka indukcijas pluripotentās cilmes šūnas (iPSCs), neironu cilmes šūnas, primāros neironus un rutīniski kultivētas adhezīvās šūnu līnijas, piemēram, HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 un A549. Tipiski lietošanas gadījumi ietver:

Rutīniska adhezīvo zīdītāju šūnu subkultivēšana un pasāžēšana
Maiga hESCs, iPSCs un citu jutīgu līniju atsevišķu šūnu atdalīšana
Paraugu sagatavošana plūsmas citometrijai un FACS analīzei
Šūnu virsmas marķieru analīze, kur svarīga ir epitopa integritāte
Šūnu migrācijas, proliferācijas un apoptozes analīzes
Miera stāvokļa testi, izmantojot seruma izsīkšanu un onkogēnu transfekcijas pētījumus
Audzēja šūnu un neirālo krastu šūnu migrācijas testi
Ražošanas apjoma palielināšana bioreaktoru darba plūsmās

Ikdienas darbā uzklājiet aptuveni 10 ml Accutase uz 75 cm2 kultūras virsmas un inkubējiet 5–10 minūtes istabas temperatūrā. Optimālais inkubācijas laiks jānosaka katrai šūnu līnijai atsevišķi, un tas nedrīkst pārsniegt vienu stundu. Pirms pievienošanas noskalojiet šūnu slāni ar Ca2+/Mg2+-nesaturošu sāls šķīdumu, piemēram, DPBS bez kalcija un magnija, lai noņemtu seruma atliekas un divvērtīgos katjonus.

Rīkošanās un uzglabāšana
Neatvērtu pudeli uzglabājiet sasaldētu -15 °C vai zemākā temperatūrā. Atkausējiet istabas temperatūrā vai nakti +2 °C līdz +8 °C temperatūrā. Neatkausējiet Accutase 37 °C ūdens vannā, jo paaugstināta temperatūra samazina fermentu aktivitāti. Pēc atkausēšanas šķīdumu var uzglabāt līdz 2 mēnešiem +2 °C līdz +8 °C temperatūrā; neuzglabājiet istabas temperatūrā. Pirms lietošanas reaģentu neiesildiet līdz 37 °C – pievienojiet to tieši izskalotām šūnām istabas temperatūrā. Lai nodrošinātu ilgu glabāšanas laiku, ieteicams izmantot vienreizējās lietošanas alikvotas, lai izvairītos no atkārtotiem atkausēšanas cikliem. Vienmēr strādājiet aseptiskos apstākļos.

Kvalitāte
Ražots saskaņā ar stingriem kvalitātes standartiem. Katra Accutase partija tiek sterilizēta ar filtrēšanu un pārbaudīta attiecībā uz sterilitāti, pH, izskatu un disociācijas aktivitāti, lai nodrošinātu vienmērīgu, reproducējamu darbību no partijas uz partiju.

Produkta specifikācijas



Specifikācija
Sīkāka informācija



Produkta veidsŠūnu atdalīšanas / disociācijas reaģents
FormātsSterili filtrēts šķidrums, gatavs lietošanai
Tilpums100 ml
Darba koncentrācija1x (gatavs lietošanai)
Enzīmu aktivitāteKombinēta proteolītiska un kolagenolītiska
Fermentu izcelsmeNe no zīdītājiem un ne no baktērijām
Buferu sistēmaDulbecco PBS ar EDTA
pH indikatorsFenolsarkans
pH diapazons6,8 – 7,8
IzskatsDzidrs, gaiši sarkans līdz oranžs šķīdums
Uzglabāšanas temperatūra-15 °C vai zemāka
Stabilitāte pēc atkausēšanasLīdz 2 mēnešiem temperatūrā no +2 °C līdz +8 °C
Ieteicamais lietošanas daudzums~10 ml uz 75 cm2 kultūras virsmas
Tipisks inkubācijas laiks5–10 minūtes istabas temperatūrā
Piegādes nosacījumiSasaldēts uz sausā ledus
Paredzētais lietojumsTikai pētniecības vajadzībām un turpmākai ražošanai



Sastāvs (sastāvs uz litru)



Sastāvdaļa
Koncentrācija (mg/l)




Neorganiskie sāļi

Nātrija hlorīds (NaCl)8000,00
Dinātrija hidrogēnfosfāts (Na2HPO4)1150,00
Kālija hlorīds (KCl)200,00
Kālija dihidrogēnfosfāts (KH2PO4)200,00

Citas sastāvdaļas

EDTA · 4Na (tetranātrija EDTA)220,00
Fenolsarkans3,00
Patentēts fermentu maisījums (proteolītiska un kolagenolītiska aktivitāte)1x



Accutase ir Innovative Cell Technologies, Inc. reģistrēta preču zīme.