Tế bào Hep3B: Nghiên cứu và khám phá ung thư tế bào gan

HEP3B là dòng tế bào ung thư gan được bất tử hóa từ tế bào gan người. Dòng tế bào này được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu độc tính gan và chuyển hóa thuốc. Hiệu suất chuyển gen của HEP3B rất cao; do đó, các tế bào này thường được sử dụng để nghiên cứu sự phát triển, tiến triển của ung thư gan và các can thiệp điều trị. Bài viết này cung cấp tất cả thông tin cần thiết về dòng tế bào HEP3B để hỗ trợ bạn trong quá trình làm việc với nó. Chủ yếu, bài viết sẽ bao gồm:

  1. Đặc điểm chung và nguồn gốc của tế bào HEP3B
  2. Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào HEP3B
  3. Dòng tế bào HEP3B: Ưu điểm & Hạn chế
  4. Ứng dụng của tế bào HEP3B trong nghiên cứu
  5. Các công bố khoa học về dòng tế bào HEP3B
  6. Tài nguyên cho dòng tế bào HEP3B: Quy trình, video và nhiều hơn nữa

1.      Đặc điểm chung và nguồn gốc của tế bào HEP3B

Thông tin cơ bản bạn cần biết về một dòng tế bào là nguồn gốc và đặc điểm chung của nó. Điều này giúp bạn quyết định việc sử dụng nó trong nghiên cứu và hỗ trợ bạn trong quá trình xử lý. Phần này của bài viết trình bày tất cả thông tin cần thiết về nguồn gốc và đặc điểm của HEP3B. Bạn sẽ tìm hiểu: Dòng tế bào Hep 3B là gì? Nguồn gốc của tế bào Hep3B là gì? Hình thái của tế bào HEP3B như thế nào?

  • HEP3B, một dòng tế bào ung thư gan người liên tục, có nguồn gốc từ mô gan của một cậu bé 8 tuổi người châu Phi bị ung thư gan tế bào (HCC). Nó được thiết lập bởi Aden và các đồng nghiệp vào năm 1979 tại phòng thí nghiệm của Barbara B. Knowles, Viện Wistar, Philadelphia, Hoa Kỳ [1].
  • Tế bào HEP3B có sự tích hợp của bộ gen virus viêm gan B (HBV) vào nhiễm sắc thể của nó.
  • Các tế bào ung thư gan này có hình thái biểu mô.
  • Các tế bào HEP3B có số lượng nhiễm sắc thể trung bình là 60. Khác với HepG2, chúng không có nhiễm sắc thể 1 bị sắp xếp lại.

Sự khác biệt giữa HepG2 và Hep3B là gì?

HepG2 và HEP3B khác nhau về số lượng nhiễm sắc thể trên mỗi tế bào. HEP3B chứa 60 nhiễm sắc thể, trong khi tế bào HepG2 có trung bình 55 nhiễm sắc thể. Hơn nữa, HepG2 là không gây ung thư và âm tính với viêm gan B, trong khi HEP3B là gây ung thư và dương tính với HBV.

Ung thư gan dưới kính hiển vi với độ phóng đại cao.

2.      Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào HEP3B

Kiến thức về thông tin nuôi cấy của một dòng tế bào có thể giúp bạn dễ dàng hơn trong quá trình nuôi cấy. Phần này bao gồm tất cả các điểm chính về nuôi cấy dòng tế bào HEP3B HBV, bao gồm: Thời gian nhân đôi của tế bào Hep3B là bao lâu? Điều kiện nuôi cấy HEP3B là gì? Cách nuôi cấy tế bào HEP3B HCC như thế nào?

Các điểm chính về nuôi cấy tế bào HEP3B

Thời gian nhân đôi:

Thời gian nhân đôi của tế bào HEP3B là khoảng 36 giờ.

Dính hoặc treo lơ lửng:

Dòng tế bào ung thư gan này là tế bào bám dính.

Tỷ lệ chia tách:

Tế bào HEP3B được phân chia với tỷ lệ từ 1:2 đến 1:4. Tế bào HEP3B bám dính được rửa bằng 1 x PBS và sau đó ủ với dung dịch phân tách Accutase. Sau 8 đến 10 phút, thêm môi trường tươi và tế bào được ly tâm. Tế bào thu hoạch sau đó được tái phân tán cẩn thận và đổ vào bình chứa môi trường nuôi cấy với tỷ lệ phân chia khuyến nghị.

Dung dịch nuôi cấy:

Dung dịch nuôi cấy EMEM chứa 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO₃, 2 mM L-Glutamine và Dung dịch Muối Cân bằng Earle (EBSS) được sử dụng để nuôi cấy tế bào HEP3B.

Điều kiện nuôi cấy:

Tế bào HEP3B được nuôi cấy trong tủ ấm 37°C có độ ẩm và cung cấp CO2 liên tục ở nồng độ 5%.

Bảo quản:

Tế bào HEP3B đông lạnh được bảo quản ở nhiệt độ dưới -150°C trong tủ đông điện hoặc pha hơi của nitơ lỏng.

Quy trình đông lạnh và môi trường:

Phương tiện đông lạnh được khuyến nghị cho tế bào HEP3B là CM-1 hoặc CM-ACF. Tế bào được đông lạnh bằng quy trình đông lạnh chậm, cho phép giảm nhiệt độ chỉ 1°C mỗi phút để bảo vệ khả năng sống của tế bào.

Quy trình rã đông:

Tế bào đông lạnh được rã đông trong bể nước đã được cài đặt sẵn ở 37°C trong 40 đến 60 giây. Sau đó, các tế bào này được thêm vào môi trường nuôi cấy tươi và ly tâm để loại bỏ các thành phần của môi trường đông lạnh. Các tế bào thu được được tái phân tán và phân phối vào các bình mới để nuôi cấy.

Mức độ an toàn sinh học:

Phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1 là yêu cầu bắt buộc cho việc nuôi cấy tế bào HEP3B.

 

Lớp tế bào Hep3B bám dính, gần như phủ kín, ở độ phóng đại 10× và 20×.

3.      Dòng tế bào HEP3B: Ưu điểm & Hạn chế

HEP3B là dòng tế bào ung thư gan được sử dụng rộng rãi. Phần này sẽ tập trung vào một số ưu điểm và hạn chế chính của các tế bào ung thư gan này.

Ưu điểm

Các ưu điểm chính của dòng tế bào HEP3B là:

Dễ nuôi cấy

Tế bào HEP3B không có yêu cầu nuôi cấy phức tạp, giúp dễ dàng xử lý và duy trì trong phòng thí nghiệm nghiên cứu. Điều này đơn giản hóa các quy trình thí nghiệm.

Hiệu suất chuyển gen cao

Tế bào HEP3B có hiệu suất chuyển gen đáng kể, khiến chúng được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu về thao tác gen và biểu hiện gen.

Khả năng gây ung thư

HEP3B là dòng tế bào ung thư gan có khả năng gây ung thư, có thể hình thành khối u khi tiêm vào chuột suy giảm miễn dịch. Điều này hỗ trợ nghiên cứu sự tiến triển và phát triển của ung thư thông qua mô hình xenograft HEP3B.

Tình trạng P53 của HEP3B

Tế bào HEP3B mang đột biến gen P53 tương tự như ung thư gan (HCC) và các loại ung thư khác, làm cho chúng phù hợp để nghiên cứu tác động của đột biến P53 đối với sự phát triển, tiến triển và tăng trưởng của ung thư.

 

Hạn chế

Hạn chế liên quan đến dòng tế bào HEP3B là:

Mô hình tế bào in vitro

Dòng tế bào HEP3B được sử dụng như một mô hình in vitro của tế bào ung thư gan (HCC). Tuy nhiên, nó có thể không hoàn toàn phản ánh độ phức tạp của HCC như trong cơ thể sống. Do đó, kết quả thí nghiệm in vitro có thể khác biệt so với những gì quan sát được in vivo.

 

4.      Ứng dụng của dòng tế bào HEP3B trong nghiên cứu

Dòng tế bào HEP3B cung cấp nhiều ứng dụng nghiên cứu trong lĩnh vực y sinh học. Một số ứng dụng nghiên cứu chính của tế bào HEP3B bao gồm:

  • Sinh học ung thư: HEP3B là dòng tế bào ung thư gan tế bào gan của người. Đây là mô hình tế bào vô giá để nghiên cứu các cơ chế tế bào và phân tử liên quan đến sự phát triển và tiến triển của HCC. Các nhà nghiên cứu sử dụng các tế bào này để nghiên cứu các đột biến gen, quá trình tế bào và các con đường tín hiệu tế bào liên quan đến ung thư gan. Ví dụ, một nghiên cứu đã sử dụng tế bào HEP3B và phát hiện ra rằng microRNA-223-3p điều chỉnh các thành phần của NLRP3 inflammasome, ức chế sự phát triển và tăng cường quá trình apoptosis của các tế bào ung thư gan HEP3B [2].
  • Màn hình và phát triển thuốc: Dòng tế bàoHEP3B cũng được sử dụng để thử nghiệm, sàng lọc và phát triển các liệu pháp mới chống lại ung thư gan. Ngoài ra, nó được sử dụng để đánh giá độc tính và hiệu quả của các loại thuốc và phương pháp điều trị chống ung thư khác nhau. Các nhà nghiên cứu cũng sử dụng các tế bào ung thư gan này để nghiên cứu chuyển hóa thuốc. Các nhà nghiên cứu đã sử dụng tế bào HEP3B và đánh giá tiềm năng độc tế bào của chiết xuất từ cây Cotinus coggygria trên các tế bào ung thư gan HEP3B [3].
  • Nhiễm trùng virus: HEP3B là dòng tế bào dương tính với virus viêm gan B (HBV); do đó, nó được sử dụng để nghiên cứu các nhiễm trùng virus có thể dẫn đến sự phát triển của ung thư gan, chẳng hạn như HBV và HCV. Điều này có thể giúp hiểu rõ hơn về các nhiễm trùng virus và phát triển các phương pháp điều trị kháng virus tiềm năng. Ví dụ, một nghiên cứu đã sử dụng tế bào ung thư gan HEP3B và điều tra vai trò của quá trình ubiquitin hóa trong sự lây lan của virus viêm gan C. Kết quả cho thấy protease ubiquitin đặc hiệu 15 (USP15) tham gia vào sự lây lan của HCV thông qua việc điều chỉnh các chức năng đặc hiệu của tế bào gan, bao gồm hình thành giọt lipid và dịch mã RNA của HCV [4].

5.      Các công bố về dòng tế bào HEP3B

Phần này của bài viết sẽ giới thiệu một số công trình nghiên cứu thú vị về dòng tế bào HEP3B.

Điều hòa quá trình apoptosis và autophagy bởi luteolin trong tế bào ung thư gan người Hep3B

Công bố này trên tạp chí Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) đề xuất rằng stress lưới nội chất do hợp chất luteolin gây ra có thể phát huy tác dụng chống ung thư trên tế bào HEP3B không có P53 theo cơ chế độc lập với P53.

Tiềm năng nhắm mục tiêu vào các tế bào ung thư gan Hep3B bằng lupeol được tách chiết từ Avicennia marina

Nghiên cứu này trên tạp chí Archiv der Pharmazie (2021) đề xuất lupeol, một triterpenoid pentacyclic, là một tác nhân chống ung thư tiềm năng đối với tế bào Hep3B.

Chiết xuất ethanol từ Cnidium monnieri (L.) Cusson gây ức chế chu kỳ tế bào và apoptosis thông qua điều hòa con đường độc lập với p53 trong các tế bào ung thư gan HepG2 và Hep3B

Bài báo này được công bố trên tạp chí Molecular Medicine Reports (2017). Kết quả nghiên cứu cho thấy chiết xuất ethanol từ Cnidium monnieri (L.) Cusson gây chết tế bào (apoptosis) và ức chế chu kỳ tế bào trong các tế bào ung thư gan HepG2 và HEP3B thông qua điều hòa con đường tín hiệu p53 và Akt/GSK-3β.

Auranofin tăng cường apoptosis do sulforaphane gây ra trong tế bào ung thư gan Hep3B thông qua ức chế con đường tín hiệu PI3K/Akt

Nghiên cứu được công bố trên tạp chí Biomolecules and Therapeutics (2020) đề xuất rằng auranofin có hoạt tính hiệp đồng và thúc đẩy quá trình apoptosis do sulforaphane gây ra ở tế bào HEP3B thông qua việc kích hoạt con đường tín hiệu PI3K/AKT.

Circular RNA-0072309 có tác dụng chống ung thư trong dòng tế bào Hep3B bằng cách nhắm mục tiêu microRNA-665

Bài báo nghiên cứu trên tạp chí BioFactors (2023) đề xuất rằng RNA tròn-0072309 có tác dụng chống ung thư trên tế bào ung thư gan HEP3B thông qua việc nhắm mục tiêu vào miRNA-665.

6.      Tài nguyên cho dòng tế bào HEP3B: Quy trình, Video và Hơn thế nữa

Dưới đây là một số tài nguyên có sẵn về dòng tế bào HEP3B:

  • HEP3B transfection: Video này sẽ giải thích quy trình transfection cho tế bào HEP3B.
  • Hiệu suất chuyển gen HEP3B: Liên kết này sẽ giúp bạn tìm hiểu thành phần môi trường DMEM cho tế bào HEP3B, quy trình nuôi cấy tế bào và quy trình chuyển gen cho tế bào HEP3B. Ngoài ra, nó cung cấp thông tin về cách tối ưu hóa chất Lipofectamine 3000 trong quy trình chuyển gen của bạn.

Liên kết sau đây chứa quy trình nuôi cấy tế bào HEP3B:

  • Điều kiện nuôi cấy HEP3B: Liên kếtnày sẽ giúp bạn tìm hiểu quy trình xử lý và duy trì nuôi cấy Huh7 và HEP3B.
  • Tế bào HEP3B: Trang web này cung cấp nhiều thông tin về tế bào HEP3B, bao gồm môi trường nuôi cấy HEP3B, quy trình tách tế bào, rã đông và xử lý các văn hóa tế bào tăng sinh và đông lạnh.

Tham khảo

  1. Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Nguồn gốc và đặc tính của các dòng tế bào ung thư gan. Tạp chí Nghiên cứu Tiêu hóa Nhật Bản, 2021. 1(8): tr. 1040.
  2. Wan, L., et al., miRNA-223-3p điều chỉnh NLRP3 để thúc đẩy apoptosis và ức chế sự phát triển của tế bào Hep3B. Tạp chí Y học Th sperimental và Điều trị, 2018. 15(3): tr. 2429-2435.
  3. Danjolli-Hashani, D. và S. Selen-Isbilir, Tác dụng độc tế bào của chiết xuất Cotinus coggygria trên dòng tế bào ung thư Hep3B. Nghiên cứu Sản phẩm Tự nhiên, 2022: tr. 1-4.
  4. Kusakabe, S., et al., USP15 tham gia vào quá trình lây lan của virus viêm gan C thông qua điều hòa dịch mã RNA virus và hình thành giọt lipid. Tạp chí Vi sinh học, 2019. 93(6): tr. 10.1128/jvi. 01708-18.

 

Chúng tôi đã phát hiện rằng bạn đang ở một quốc gia khác hoặc đang sử dụng ngôn ngữ trình duyệt khác với ngôn ngữ hiện tại đã chọn. Bạn có muốn chấp nhận các cài đặt được đề xuất không?

Đóng