Tế bào Hep3B: Nghiên cứu và khám phá về ung thư tế bào gan
HEP3B là một dòng tế bào ung thư gan bất tử có nguồn gốc từ người. Dòng tế bào này được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu độc tính gan và chuyển hóa thuốc. Hiệu quả chuyển gen của HEP3B rất cao; do đó, các tế bào này thường được sử dụng để nghiên cứu sự phát triển, tiến triển và các can thiệp điều trị ung thư gan. Bài viết này bao gồm tất cả thông tin cần thiết về dòng tế bào HEP3B để hỗ trợ bạn trong quá trình làm việc với nó. Chủ yếu, bài viết sẽ bao gồm:
- Môi trường nuôi cấy
- Môi trường EMEM chứa 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamine và Dung dịch muối cân bằng Earle (EBSS) được sử dụng để nuôi cấy tế bào HEP3B.
- Thời gian nhân đôi
- Thời gian nhân đôi của tế bào HEP3B là khoảng 36 giờ.
- Loại tăng trưởng
- Dòng tế bào ung thư gan này là loại bám dính.
- Mức độ an toàn sinh học
- Cấp độ an toàn sinh học 1
- Có sẵn tại
- Cytion — Đặt hàng HEP3B
- Đặc điểm chung và nguồn gốc của tế bào HEP3B
- Thông tin nuôi cấy về dòng tế bào HEP3B
- Dòng tế bào HEP3B: Ưu điểm & Hạn chế
- Ứng dụng của tế bào HEP3B trong nghiên cứu
- Các công bố về dòng tế bào HEP3B
- Tài nguyên cho dòng tế bào HEP3B: Quy trình, video và hơn thế nữa
Đặc điểm chung và nguồn gốc của tế bào HEP3B
Thông tin cơ bản bạn cần biết về một dòng tế bào là nguồn gốc và đặc điểm chung của nó. Thông tin này có thể giúp bạn quyết định việc sử dụng nó trong nghiên cứu và giúp bạn xử lý nó. Phần bài viết này bao gồm tất cả thông tin cần thiết về nguồn gốc và đặc điểm của HEP3B. Tại đây, bạn sẽ tìm hiểu: Dòng tế bào Hep 3B là gì? Nguồn gốc của tế bào Hep3B là gì? Hình thái của tế bào HEP3B là gì?
- HEP3B, một dòng tế bào ung thư gan người liên tục, có nguồn gốc từ mô gan của một cậu bé châu Phi 8 tuổi bị ung thư gan (HCC). Dòng tế bào này được Aden và các đồng nghiệp thiết lập vào năm 1979 tại phòng thí nghiệm của Barbara B. Knowles, Viện Wistar, Philadelphia, Hoa Kỳ [1].
- Tế bào HEP3B có sự tích hợp của bộ gen virus viêm gan B (HBV) vào nhiễm sắc thể của chúng.
- Các tế bào ung thư gan này có hình thái biểu mô.
- Số nhiễm sắc thể trung bình của tế bào HEP3B là 60. Không giống như HepG2, chúng không có nhiễm sắc thể 1 bị sắp xếp lại.
Sự khác biệt giữa HepG2 và Hep3B là gì?
HepG2 và HEP3B khác nhau về số lượng nhiễm sắc thể trên mỗi tế bào. HEP3B chứa 60 nhiễm sắc thể, trong khi tế bào HepG2 có trung bình 55 nhiễm sắc thể. Hơn nữa, HepG2 không gây ung thư và âm tính với viêm gan B, trong khi HEP3B gây ung thư và dương tính với HBV.
Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào HEP3B
Kiến thức về thông tin nuôi cấy dòng tế bào có thể giúp bạn dễ dàng hơn trong việc nuôi cấy. Phần này bao gồm tất cả các điểm chính để nuôi cấy dòng tế bào HEP3B HBV, bao gồm: Thời gian nhân đôi của tế bào Hep3B là bao lâu? Điều kiện nuôi cấy HEP3B là gì? Làm thế nào để nuôi cấy tế bào HEP3B HCC?
Các điểm chính về nuôi cấy tế bào HEP3B
Thời gian nhân đôi:
Thời gian nhân đôi của tế bào HEP3B là khoảng 36 giờ.
Bám dính hay lơ lửng:
Dòng tế bào ung thư gan này là tế bào bám dính.
Tỷ lệ chia tách:
Tế bào HEP3B được phân chia với tỷ lệ từ 1:2 đến 1:4. Tế bào HEP3B bám dính được rửa bằng dung dịch PBS 1x, sau đó ủ với dung dịch tách tế bào Accutase. Sau 8 đến 10 phút, thêm môi trường nuôi cấy mới và ly tâm tế bào. Sau đó, tế bào thu được được tái huyền phù cẩn thận và đổ vào các bình chứa môi trường nuôi cấy theo tỷ lệ phân chia khuyến nghị.
Môi trường nuôi cấy:
Môi trường EMEM chứa 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamine và Dung dịch muối cân bằng Earle (EBSS) được sử dụng để nuôi cấy tế bào HEP3B.
Điều kiện phát triển:
Tế bào HEP3B được nuôi cấy trong tủ ấm có độ ẩm 37°C với nguồn cung cấp CO2 liên tục 5%.
Bảo quản:
Tế bào HEP3B đông lạnh được bảo quản ở nhiệt độ dưới -150°C trong tủ đông điện hoặc trong pha hơi của nitơ lỏng.
Quy trình đông lạnh và môi trường:
Môi trường đông lạnh được khuyến nghị cho tế bào HEP3B là CM-1 hoặc CM-ACF. Tế bào được đông lạnh bằng quy trình đông lạnh chậm, chỉ cho phép nhiệt độ giảm 1°C mỗi phút để bảo vệ khả năng sống của tế bào.
Quy trình rã đông:
Các tế bào đông lạnh được rã đông trong bể nước được cài đặt sẵn ở 37°C trong 40 đến 60 giây. Sau đó, các tế bào này được thêm vào môi trường nuôi cấy mới và ly tâm để loại bỏ các thành phần môi trường đông lạnh. Các tế bào thu được được tái huyền phù và phân phối vào các bình mới để nuôi cấy.
Cấp độ an toàn sinh học:
Cần có phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1 để nuôi cấy tế bào HEP3B.
Dòng tế bào HEP3B: Ưu điểm và hạn chế
HEP3B là một dòng tế bào ung thư gan được sử dụng rộng rãi. Phần này sẽ tập trung vào một số ưu điểm và hạn chế chính của các tế bào ung thư gan này.
Ưu điểm
Những ưu điểm chính của tế bào HEP3B là:
Dễ nuôi cấy
Tế bào HEP3B không có yêu cầu nuôi cấy tế bào phức tạp, giúp dễ dàng xử lý và duy trì trong phòng thí nghiệm nghiên cứu. Điều này giúp đơn giản hóa các quy trình thí nghiệm.
Hiệu suất chuyển gen cao
Tế bào HEP3B thể hiện hiệu suất chuyển gen đáng chú ý, khiến chúng được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu liên quan đến thao tác gen và biểu hiện gen.
Khả năng gây ung thư
HEP3B là dòng tế bào ung thư gan có khả năng gây ung thư, có thể hình thành khối u khi tiêm vào chuột bị suy giảm miễn dịch. Điều này giúp nghiên cứu sự tiến triển và phát triển của ung thư bằng cách sử dụng các mô hình cấy ghép HEP3B.
Tình trạng P53 của HEP3B
Các tế bào HEP3B có đột biến gen P53 tương tự như ung thư gan (HCC) và các loại ung thư khác, khiến chúng trở nên phù hợp để nghiên cứu tác động của đột biến P53 đối với sự phát triển, tiến triển và lan rộng của ung thư.
Hạn chế
Hạn chế liên quan đến dòng tế bào HEP3B là:
Mô hình tế bào in vitro
Dòng tế bào HEP3B đóng vai trò là mô hình in vitro của tế bào ung thư gan (HCC). Tuy nhiên, nó có thể không thể hiện đầy đủ sự phức tạp của HCC như trong cơ thể sống. Do đó, kết quả thí nghiệm in vitro có thể khác với kết quả quan sát được in vivo.
Ứng dụng của tế bào HEP3B trong nghiên cứu
Dòng tế bào HEP3B mang lại nhiều ứng dụng nghiên cứu trong lĩnh vực y sinh học. Một số ứng dụng nghiên cứu chính của tế bào HEP3B bao gồm:
- Sinh học ung thư: HEP3B là dòng tế bào ung thư gan ở người. Đây là mô hình tế bào vô cùng quý giá để nghiên cứu các cơ chế tế bào và phân tử cơ bản dẫn đến sự phát triển và tiến triển của HCC. Các nhà nghiên cứu sử dụng các tế bào này để nghiên cứu các đột biến gen, quá trình tế bào và các con đường truyền tín hiệu tế bào liên quan đến ung thư gan. Chẳng hạn như một nghiên cứu đã sử dụng tế bào HEP3B và phát hiện ra rằng microRNA-223-3p điều chỉnh các thành phần của phức hợp NLRP3, ức chế sự tăng sinh và tăng cường quá trình apoptosis của tế bào ung thư gan HEP3B [2].
- Sàng lọc và phát triển thuốc: Dòng tế bào HEP3B cũng được sử dụng để thử nghiệm, sàng lọc và phát triển các phương pháp điều trị mới chống lại ung thư gan. Hơn nữa, nó còn được sử dụng để đánh giá độc tính và hiệu quả của các loại thuốc và phương pháp điều trị ung thư khác nhau. Các nhà nghiên cứu cũng sử dụng các tế bào ung thư gan này để nghiên cứu quá trình chuyển hóa thuốc. Các nhà nghiên cứu đã sử dụng tế bào HEP3B và đánh giá tiềm năng gây độc tế bào của chiết xuất thực vật Cotinus coggygria trên các tế bào ung thư gan HEP3B [3].
- Nhiễm virus: HEP3B là dòng tế bào dương tính với virus viêm gan B; do đó, nó được sử dụng để nghiên cứu các bệnh nhiễm virus có thể dẫn đến sự phát triển của ung thư gan, tức là HBV và HCV. Điều này có thể giúp hiểu rõ hơn về các bệnh nhiễm virus và phát triển các phương pháp điều trị kháng virus tiềm năng. Ví dụ, một nghiên cứu đã sử dụng tế bào ung thư gan HEP3B và điều tra tầm quan trọng của quá trình ubiquitin hóa đối với sự lây lan của virus viêm gan C. Kết quả nghiên cứu cho thấy protease 15 đặc hiệu ubiquitin (USP15) có liên quan đến sự lây lan của HCV thông qua việc điều chỉnh các chức năng đặc hiệu của tế bào gan, bao gồm sự hình thành giọt lipid và sự dịch mã RNA của HCV [4].
5. Các công trình nghiên cứu về dòng tế bào HEP3B
Phần này của bài viết sẽ đề cập đến một số công trình nghiên cứu thú vị về tế bào HEP3B.
Điều hòa quá trình apoptosis và autophagy bởi luteolin trong tế bào ung thư gan người HEP3B
Bài báo này trên tạp chí Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) đề xuất rằng căng thẳng lưới nội chất do hợp chất luteolin gây ra có thể phát huy tác dụng chống khối u trong các tế bào HEP3B thiếu P53 theo cơ chế độc lập với P53.
Khả năng nhắm mục tiêu tế bào ung thư gan Hep3B bằng lupeol được phân lập từ Avicennia marina
Nghiên cứu này trên tạp chí Archiv der Pharmazie (2021) đề xuất một triterpenoid pentacyclic, lupeol, là một chất chống ung thư tiềm năng chống lại các tế bào HEP3B.
Bài báo này được công bố trên tạp chí Molecular Medicine Reports (2017). Kết quả nghiên cứu cho thấy chiết xuất ethanol từ Cnidium monnieri (L.) Cusson gây ra chết tế bào (apoptosis) và ức chế chu kỳ tế bào trong các tế bào ung thư gan HepG2 và HEP3B thông qua việc điều hòa con đường tín hiệu p53 và Akt/GSK-3β.
Nghiên cứu này được công bố trên tạp chí Biomolecules and Therapeutics (2020) đã đề xuất rằng auranofin thể hiện hoạt tính hiệp đồng và thúc đẩy quá trình apoptosis do sulforaphane gây ra ở các tế bào HEP3B thông qua việc kích hoạt con đường tín hiệu PI3K/AKT.
RNA vòng 0072309 có tác dụng chống ung thư trên dòng tế bào Hep3B bằng cách nhắm vào microRNA-665
Bài báo nghiên cứu trên tạp chí BioFactors (2023) đề xuất rằng RNA vòng 0072309 phát huy tác dụng chống ung thư trên các tế bào ung thư gan HEP3B thông qua việc nhắm mục tiêu vào miRNA-665.
Tài nguyên về dòng tế bào HEP3B: Quy trình, video và hơn thế nữa
Dưới đây là một số tài nguyên có sẵn về tế bào HEP3B:
- Truyền gen HEP3B: Video này sẽ giải thích quy trình truyền gen cho tế bào HEP3B.
- Hiệu quả chuyển gen HEP3B: Liên kết này sẽ giúp bạn tìm hiểu thành phần môi trường DMEM HEP3B, quá trình nhân giống tế bào và quy trình chuyển gen cho tế bào HEP3B. Ngoài ra, nó còn cung cấp thông tin để tối ưu hóa thuốc thử lipofectamine 3000 HEP3B trong quy trình chuyển gen của bạn.
Liên kết sau đây chứa quy trình nuôi cấy tế bào HEP3B:
- Điều kiện nuôi cấy HEP3B: Liên kết này sẽ giúp bạn tìm hiểu quy trình xử lý và duy trì các môi trường nuôi cấy Huh7 và HEP3B.
- Tế bào HEP3B: Trang web này có nhiều thông tin về tế bào HEP3B, bao gồm môi trường HEP3B, quy trình phân chia tế bào, rã đông và xử lý các nuôi cấy sinh sôi và đông lạnh.
Tài liệu tham khảo
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Nguồn gốc và đặc tính của các dòng tế bào ung thư gan. Tạp chí Nghiên cứu Tiêu hóa Nhật Bản, 2021. 1(8): tr. 1040.
- Wan, L., et al., miRNA-223-3p điều chỉnh NLRP3 để thúc đẩy quá trình apoptosis và ức chế sự tăng sinh của tế bào HEP3B. Y học Th sperimental và Điều trị, 2018. 15(3): tr. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. và S. Selen-Isbilir, Tác dụng gây độc tế bào của chiết xuất Cotinus coggygria trên dòng tế bào ung thư Hep3B. Nghiên cứu Sản phẩm Tự nhiên, 2022: tr. 1-4.
- Kusakabe, S., et al., USP15 tham gia vào quá trình lây lan của virus viêm gan C thông qua việc điều chỉnh quá trình dịch mã RNA của virus và sự hình thành giọt lipid. Tạp chí Virology, 2019. 93(6): tr. 10.1128/jvi. 01708-18.