Dòng tế bào HT22
HT22 là một dòng tế bào thần kinh chuột thường được sử dụng trong nghiên cứu thần kinh học. Dòng tế bào này rất có giá trị trong việc nghiên cứu các rối loạn thoái hóa thần kinh và thử nghiệm các liệu pháp hoặc phương pháp điều trị bảo vệ thần kinh tiềm năng. Ngoài ra, các tế bào HT22 nhạy cảm với glutamate, do đó được sử dụng để nghiên cứu độc tính do glutamate gây ra hoặc tổn thương tế bào thần kinh.
- Môi trường nuôi cấy
- Môi trường DMEM được sử dụng để nuôi cấy tế bào HT22. Môi trường này được bổ sung 10% FBS, 4,5 g/L Glucose, 4 mM L-Glutamine, 1,5 g/L NaHCO3 và 1,0 mM Sodium pyruvate để tế bào phát triển tối ưu.
- Thời gian nhân đôi
- Thời gian nhân đôi của tế bào HT22 là khoảng 15 giờ.
- Loại tăng trưởng
- Tế bào HT22 là tế bào bám dính.
- Mức độ an toàn sinh học
- Cấp độ an toàn sinh học BSL-1
- Có sẵn tại
- Cytion — Đặt hàng HT22
Bài viết này nêu bật các khía cạnh quan trọng của tế bào HT22 có thể hỗ trợ bạn trong công việc nghiên cứu. Bài viết sẽ chủ yếu thảo luận về:
- Các đặc tính chung và nguồn gốc của tế bào HT22
- Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào HT22
- Ưu điểm và nhược điểm của dòng tế bào HT22
- Các ứng dụng nghiên cứu của dòng tế bào HT22
- Các công bố nghiên cứu liên quan đến tế bào HT22
- Tài nguyên về tế bào HT22: Quy trình, video và hơn thế nữa
Các đặc tính chung và nguồn gốc của tế bào HT22
Phần này của bài viết sẽ làm sáng tỏ nguồn gốc và các đặc điểm chung của tế bào HT22. Việc nắm rõ thông tin về dòng tế bào này là cần thiết trước khi bắt đầu nghiên cứu trên nó. Trong phần này, bạn sẽ tìm hiểu: Tế bào HT22 là gì? Hình thái của tế bào HT22 vùng hải mã như thế nào? Kích thước của tế bào HT22 là bao nhiêu?
HT22 là một dòng tế bào liên tục có nguồn gốc từ vùng hồi hải mã của não chuột. Đây là một dòng tế bào con của dòng tế bào mẹ HT-4, được phát triển bằng cách bất tử hóa các mô thần kinh của chuột thông qua kháng nguyên T của virus simian 40 (SV40) thuộc họ polyomavirus nhạy cảm với nhiệt độ.
Các tế bào này khác với các tế bào hồi hải mã trưởng thành vì chúng thiếu các thụ thể glutamate và cholinergic như các tế bào thần kinh trưởng thành có nguồn gốc từ hồi hải mã. Do đó, chúng không phù hợp cho các nghiên cứu liên quan đến trí nhớ [1].
Tế bào HT22 có hình thái giống tế bào biểu mô.
Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào HT22
Tế bào HT22 được sử dụng trong các phòng thí nghiệm nghiên cứu thần kinh học. Trước khi nuôi cấy các tế bào này, các nhà nghiên cứu tìm kiếm thông tin nuôi cấy tế bào cần thiết để công việc của họ trở nên dễ dàng và hiệu quả. Phần này bao gồm tất cả các điểm chính về nuôi cấy tế bào HT22. Bạn sẽ biết: Thời gian nhân đôi của tế bào HT22 là bao lâu? Làm thế nào để nuôi cấy tế bào HT22? Quy trình nuôi cấy tế bào HT22 là gì? Môi trường nuôi cấy tế bào HT22 là gì?
Các điểm chính về nuôi cấy tế bào HT22
Thời gian nhân đôi:
Thời gian nhân đôi của tế bào HT22 là khoảng 15 giờ.
Bám dính hay lơ lửng:
Tế bào HT22 là tế bào bám dính.
Tỷ lệ phân chia:
Tỷ lệ nuôi cấy lại cho tế bào HT22 vùng hải mã là 1:3 đến 1:6. Tóm tắt, môi trường nuôi cấy được loại bỏ, và các tế bào bám dính được rửa bằng 1 x PBS. Dung dịch phân ly Accutase được thêm vào bình, và các tế bào được ủ trong 8 đến 10 phút ở nhiệt độ phòng. Sau đó, môi trường nuôi cấy mới được thêm vào, và các tế bào được thu thập trong một lọ để ly tâm. Cục tế bào thu được được tái huyền phù cẩn thận, và các tế bào được phân phối vào bình nuôi cấy để phát triển.
Môi trường nuôi cấy:
Môi trường DMEM được sử dụng để nuôi cấy tế bào HT22. Môi trường này được bổ sung 10% FBS, 4,5 g/L Glucose, 4 mM L-Glutamine, 1,5 g/L NaHCO3 và 1,0 mM Sodium pyruvate để tế bào phát triển tối ưu.
Điều kiện nuôi cấy:
Các nuôi cấy tế bào HT22 được giữ trong tủ ấm có độ ẩm (nhiệt độ 37 °C) với nguồn cung cấp 5% CO2.
Bảo quản:
Tế bào HT22 đông lạnh có thể được bảo quản ở nhiệt độ dưới -150 °C trong pha hơi của nitơ lỏng hoặc trong tủ đông điện nhiệt độ cực thấp để bảo quản lâu dài.
Quy trình đông lạnh và môi trường:
Tế bào HT22 có thể được đông lạnh trong môi trường CM-1 hoặc CM-ACF bằng phương pháp đông lạnh chậm. Quá trình này chỉ cho phép nhiệt độ mẫu giảm 1 °C mỗi phút, bảo vệ tế bào khỏi sốc và giúp duy trì khả năng sống của tế bào.
Quy trình rã đông:
Tế bào được rã đông trong bể nước 37 °C trong 40 đến 60 giây cho đến khi còn lại một cục băng nhỏ. Sau đó, môi trường nuôi cấy được thêm vào tế bào và chúng được ly tâm để loại bỏ các thành phần môi trường đông lạnh. Cục tế bào được tái phân tán và tế bào được đổ vào bình mới chứa môi trường nuôi cấy. Sau đó, tế bào được ủ ở 37 °C trong tủ ấm trong ít nhất 24 giờ.
Mức độ an toàn sinh học:
Phải có phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1 để nuôi cấy tế bào HT22.
Ưu điểm và nhược điểm của dòng tế bào HT22
Các tế bào hồi hải mã HT22 có một số ưu và nhược điểm khiến chúng khác biệt so với các dòng tế bào thần kinh khác. Một số ưu và nhược điểm đáng chú ý của dòng tế bào này được đề cập ở đây.
Ưu điểm
Những ưu điểm của dòng tế bào thần kinh chuột HT22 là:
-
Tốc độ tăng trưởng nhanh
Tế bào HT22 có thời gian nhân đôi là 15 giờ, cho phép thực hiện thí nghiệm nhanh chóng và hiệu quả, đồng thời giúp đạt được kết quả nghiên cứu kịp thời.
-
Khả năng bất tử
HT22 là dòng tế bào bất tử, đảm bảo sự phát triển liên tục trong thời gian dài. Điều này giúp cung cấp tế bào ổn định, giảm thời gian và chi phí, đồng thời tạo điều kiện thuận lợi cho các thí nghiệm dài hạn với kết quả nhất quán.
Nhược điểm
Những nhược điểm của tế bào HT22 là:
-
Nguồn gốc từ chuột
Dòng tế bào HT22 được lấy từ mô hồi hải mã não chuột, điều này có thể không phản ánh đầy đủ sự phức tạp về sinh lý và hành vi của tế bào thần kinh người, do đó hạn chế tính ứng dụng lâm sàng của chúng.
4. Ứng dụng nghiên cứu của dòng tế bào HT22
Các tế bào HT22 được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu sinh học thần kinh. Một số ứng dụng đầy hứa hẹn của dòng tế bào này được thảo luận trong phần này của bài viết:
- Nghiên cứu thần kinh học: Tế bào HT22 được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu bệnh thoái hóa thần kinh, ví dụ như bệnh Alzheimer và Parkinson. Chúng được coi là công cụ nghiên cứu quý giá để nghiên cứu cơ chế độc tính thần kinh và căng thẳng oxy hóa liên quan đến các bệnh này. Một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2020 cho thấy con đường PI3K/AKT/CREB có liên quan đến độc tính thần kinh do tăng đường huyết gây ra trong tế bào HT22 [2]. Tương tự, một nghiên cứu gần đây cho rằng con đường Nrf2/HO‐1 và trục tín hiệu NF-κB đóng vai trò quan trọng trong độc tính amyloid beta của HT22 [3].
- Sàng lọc thuốc: Tế bào HT22 được sử dụng rộng rãi cho mục đích thử nghiệm và sàng lọc thuốc. Chúng giúp các nhà nghiên cứu xác định các tác nhân điều trị tiềm năng có tác dụng bảo vệ thần kinh để chống lại các bệnh thoái hóa thần kinh. Một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2019 đã khám phá tiềm năng bảo vệ thần kinh của hợp chất tetrahydro curcumin trong các tế bào hồi hải mã HT22 được xử lý bằng glutamate. Trong đó, glutamate gây ra stress oxy hóa trong các tế bào HT22 và gây chết tế bào bằng cách kích hoạt các protein kinase được kích hoạt bởi mitogen [4].
5. Các công trình nghiên cứu liên quan đến dòng tế bào HT22
Dưới đây là một số bài báo nghiên cứu thú vị về dòng tế bào HT22:
Nghiên cứu này trên Tạp chí Y học Phân tử Quốc tế (2019) đã đề xuất tiềm năng bảo vệ thần kinh của crocin, một hợp chất được phân lập từ Crocus sativus L., trong các tế bào HT22 bị tổn thương do L-glutamate.
Bài báo này trên tạp chí Neuropharmacology (2018) đã báo cáo rằng các dẫn xuất oxindole bảo vệ tế bào HT22 khỏi sự chết do stress oxy hóa gây ra.
Bài báo nghiên cứu này được công bố trên tạp chí Journal of Ginseng Research vào năm 2019. Nghiên cứu này đã khám phá tác dụng bảo vệ thần kinh của một sản phẩm tự nhiên, ginsenoside Rb2, bằng cách sử dụng dòng tế bào HT22. Nghiên cứu cho thấy ginsenoside Rb2 làm giảm hiệu quả stress oxy hóa do glutamate gây ra và sự chết tế bào trong các tế bào vùng đồi thị HT22 của chuột.
Nghiên cứu này trên tạp chí Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) đã đánh giá tiềm năng gây độc tế bào của các hạt nano bạc trong dòng tế bào HT22.
Ferrostatin-1 bảo vệ tế bào HT-22 khỏi độc tính oxy hóa
Bài báo nghiên cứu này được công bố vào năm 2020 trên tạp chí Neural regeneration research. Bài báo đề xuất rằng ferrostatin-1, một chất ức chế quá trình ferroptosis, ngăn ngừa độc tính oxy hóa trong các tế bào vùng đồi thị HT22.
Tài nguyên về tế bào HT22: Quy trình, video và hơn thế nữa
Một số tài nguyên trực tuyến về tế bào HT22 giải thích các quy trình chuyển gen, biệt hóa và nuôi cấy tế bào:
- Truyền gen HT22: Tài liệu này chứa quy trình tối ưu hóa để truyền gen HT22 trong các đĩa nuôi cấy tế bào 24 và 96 giếng.
- Phân hóa tế bào HT22: Bài viết này sẽ hướng dẫn bạn một cách toàn diện về quy trình phân hóa HT22.
Liên kết sau đây chứa quy trình nuôi cấy tế bào HT22:
- Phân lập tế bào HT22: Liên kết này sẽ giúp bạn tìm hiểu quy trình phân lập dòng tế bào HT22. Hơn nữa, nó sẽ hỗ trợ bạn trong việc tìm hiểu quy trình gây độc thần kinh cho tế bào.
- Tế bào hồi hải mã HT22: Trang web này chứa nhiều thông tin hữu ích về thời gian nhân đôi tế bào HT22, môi trường nuôi cấy và quy trình nuôi cấy tế bào.
Tài liệu tham khảo
- He, M., et al., Sự biệt hóa làm tăng tính nhạy cảm với độc tính kích thích ở các neuron HT22. Neural Regen Res, 2013. 8(14): tr. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Fisetin ngăn chặn độc tính thần kinh do glucose cao gây ra ở tế bào HT22 thông qua con đường tín hiệu PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: tr. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Tác dụng bảo vệ của berberine chống lại độc tính thần kinh do β-amyloid gây ra ở tế bào HT22 thông qua con đường Nrf2/HO‐1. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: tr. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Tác dụng bảo vệ thần kinh của tetrahydrocurcumin chống lại stress oxy hóa do glutamate gây ra trong các tế bào HT22 vùng đồi thị. Molecules, 2019. 25(1): tr. 144.