Dòng tế bào HT-29
HT-29 là dòng tế bào ung thư đại trực tràng của người, được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu về ung thư và độc tính. Ví dụ, các tế bào này nhạy cảm với các phương pháp điều trị hóa trị tiêu chuẩn đối với ung thư đại trực tràng. Ngoài ra, dòng tế bào HT-29 là mô hình in vitro được nghiên cứu kỹ lưỡng để điều tra phản ứng của biểu mô ruột đối với nhiễm trùng vi khuẩn. Các tế bào HT-29 mô phỏng đặc điểm của các tế bào ruột trưởng thành, tức là các tế bào biểu mô ruột (enterocytes), do đó phù hợp cho các nghiên cứu về sự bám dính và cơ chế hoạt động.
Bài viết này sẽ trình bày tất cả các khía cạnh của dòng tế bào HT-29 mà bạn cần biết trước khi làm việc với nó. Chủ yếu bao gồm:
- Tế bào HT-29: Nguồn gốc và thông tin chung
- Thông tin nuôi cấy tế bào của dòng tế bào HT-29
- Tế bào HT-29: Ưu điểm và hạn chế
- Tế bào HT-29: Ứng dụng
- Các công bố nghiên cứu về dòng tế bào HT-29
- Nguồn tài nguyên về tế bào HT-29: Quy trình, video và nhiều hơn nữa
1. Tế bào HT-29: Nguồn gốc và thông tin chung
Trước khi sử dụng bất kỳ dòng tế bào nào, bạn nên tìm hiểu về các đặc điểm chung và nguồn gốc của dòng tế bào đó. Phần này sẽ giúp bạn tìm hiểu: Tế bào HT-29 là gì? HT-29 có phải là dòng tế bào ung thư đại trực tràng không? Hình thái của tế bào HT-29 như thế nào?
Dòng tế bào HT-29 là gì? HT-29 là dòng tế bào ung thư đại trực tràng được thành lập vào năm 1964 bởi Trempe và Fogh. Các tế bào ban đầu được lấy từ khối u nguyên phát của một phụ nữ da trắng (44 tuổi) bị ung thư đại trực tràng [1]. Kể từ khi được thành lập, dòng tế bào này đã được sử dụng để nghiên cứu sinh học của các loại ung thư.
Hình thái của tế bào HT-29: Dòng tế bàoHT-29 thường có hình thái tương tự biểu mô. Các tế bào biệt hóa phát triển thành lớp đơn, tạo ra các liên kết tế bào chặt chẽ và có biên giới chổi apical. Nếu các tế bào này được nuôi cấy trong môi trường thiếu glucose hoặc được cung cấp các chất kích thích như butyrate hoặc axit, chúng sẽ thể hiện các đặc điểm tương tự tế bào ruột.
Kích thước tế bào: Đường kính của dòng tế bào ung thư đại tràng HT-29 là 11 μm.
Genome và ploidy: Số lượng nhiễm sắc thể trung bình của dòng tế bào HT-29 là 71. Nó có thể dao động từ 68-72. Hơn nữa, số lượng nhiễm sắc thể được tối ưu hóa của tế bào HT-29 là hyper-triploid, với thành phần 2S xảy ra với tỷ lệ 2,4%.
HT29 MTX là gì? HT29 MTX là dòng tế bào kháng methotrexate được tách ra từ dòng tế bào ung thư đại tràng người HT-29 ban đầu bằng cách thích nghi với 10 µM methotrexate. Các tế bào này có đặc điểm của tế bào goblet trưởng thành tiết nhầy.
2. Thông tin về nuôi cấy tế bào của dòng tế bào HT-29
Hiểu rõ các yêu cầu cơ bản về nuôi cấy của một dòng tế bào có thể giúp công việc của bạn trở nên dễ dàng hơn. Bạn nên biết: Thời gian nhân đôi của dòng tế bào HT-29 là bao lâu? Mật độ gieo tế bào HT-29 là bao nhiêu? Loại môi trường nuôi cấy nào phù hợp cho tế bào HT-29?
|
Thời gian nhân đôi |
Thời gian nhân đôi trung bình của dòng tế bào HT-29 là 24 giờ. |
|
Dính/lơ lửng |
HT-29 là dòng tế bào bám dính. |
|
Mật độ gieo tế bào |
Mật độ gieo tế bào khuyến nghị cho tế bào HT-29 là 3 x10⁴tế bào/cm². Tế bào được rửa bằng 1 X PBS và tách ra sau khi ủ với Accutase trong 8-10 phút. Thêm môi trường tươi, tế bào được ly tâm. Cặn tế bào được tái phân tán và tế bào được phân phối vào các bình mới ở mật độ tế bào khuyến nghị. |
|
Dung dịch nuôi cấy |
Dung dịch nuôi cấy tối thiểu của Eagle (EMEM) được bổ sung 2,5 mM L-glutamine và 10% huyết thanh bò phôi (FBS) được sử dụng để nuôi cấy tối ưu tế bào HT-29. Dung dịch nuôi cấy nên được thay 2-3 lần mỗi tuần. |
|
Điều kiện nuôi cấy |
Tế bào HT-29 yêu cầu tủ ấm có độ ẩm với nhiệt độ 37°C và cung cấp 5%CO2 để phát triển. |
|
Bảo quản |
Các tế bào này được bảo quản trong pha hơi của nitơ lỏng ở nhiệt độ dưới -195°C. |
|
Dung dịch đông lạnh và quy trình |
Dung dịch đông lạnh được sử dụng cho dòng tế bào HT-29 là CM-1 hoặc CM-ACF. Tế bào được đông lạnh bằng quy trình đông lạnh chậm, gây giảm nhiệt độ 1°C và bảo vệ hiệu quả sự sống còn của tế bào. |
|
Quy trình rã đông |
Các tế bào HT-29 đông lạnh được rã đông trong bể nước có nhiệt độ 37°C. Các tế bào này có thể được tái phân tán và trực tiếp phân phối vào bình nuôi cấy môi trường tươi. Ngược lại, các tế bào đã rã đông có thể được ly tâm để loại bỏ các thành phần của môi trường đông lạnh, tái phân tán trong môi trường tươi và nuôi cấy trong bình. |
|
Mức độ an toàn sinh học |
Mức an toàn sinh học 1 được sử dụng để xử lý và duy trì dòng tế bào HT-29. |
3. Tế bào HT-29: Ưu điểm và Hạn chế
Mỗi dòng tế bào đều có những ưu điểm và nhược điểm riêng biệt, giúp phân biệt nó với các dòng tế bào khác. Phần này sẽ trình bày các ưu điểm và hạn chế chính liên quan đến tế bào HT-29.
Ưu điểm
Các ưu điểm chính của tế bào HT-29 là:
-
Dễ nuôi cấy
Dòng tế bào HT-29 dễ dàng xử lý và duy trì, không yêu cầu điều kiện nuôi cấy phức tạp. Nó được nuôi cấy rộng rãi trong các phòng thí nghiệm nghiên cứu.
-
Mô hình tế bào ruột trong ống nghiệm
Tế bào HT-29 có thể phân hóa thành các tế bào ruột trưởng thành (tế bào biểu mô ruột và tế bào sản xuất chất nhầy) dưới điều kiện nuôi cấy cụ thể. Chúng được sử dụng như một mô hình tế bào để nghiên cứu quá trình tiêu hóa thức ăn và khả năng hấp thu sinh học.
-
Hiệu suất chuyển gen cao
Tế bào ung thư đại tràng HT-29 có hiệu suất chuyển gen cao, phù hợp cho các nghiên cứu về biểu hiện và điều hòa gen. Cả các thí nghiệm chuyển gen tạm thời và ổn định đều có thể được thực hiện bằng các phương pháp khác nhau.
-
Độ nhạy cảm với thuốc
Tế bào HT-29 nhạy cảm với các thuốc hóa trị như fluorouracil và oxaliplatin, thường được sử dụng trong điều trị ung thư đại tràng. Chúng được sử dụng để nghiên cứu kháng thuốc và sàng lọc các thuốc điều trị tiềm năng cho ung thư đại trực tràng.
Hạn chế
-
Sự không đồng nhất
Tế bào HT-29, giống như các dòng tế bào ung thư khác, có tính dị thể và có thể không tạo thành một quần thể tế bào đồng nhất. Điều này có thể ảnh hưởng đến tính tái hiện của kết quả trong một số thử nghiệm và dẫn đến những biến động nhỏ trong kết quả thí nghiệm.
-
Khả năng biệt hóa hạn chế
Tế bào HT-29 có tiềm năng phân hóa hạn chế. Chúng không phân hóa hoàn toàn thành tế bào ruột hoặc tế bào đại tràng mà chỉ thể hiện một số đặc điểm đặc trưng. Hạn chế này có thể giới hạn việc sử dụng chúng trong nghiên cứu các quá trình sinh học phức tạp hơn.
4. HT-29 cells: Ứng dụng
Dòng tế bào HT-29 được nuôi cấy rộng rãi trong các phòng thí nghiệm nghiên cứu do phạm vi ứng dụng đa dạng của nó. Phần này sẽ chỉ đề cập đến một số ứng dụng quan trọng của tế bào HT-29.
Nghiên cứu ung thư: HT-29 là dòng tế bào ung thư tuyến đại tràng, do đó được sử dụng để nghiên cứu sự tiến triển, phát triển và các cơ chế phân tử cơ bản của ung thư. Một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2018 đã sử dụng dòng tế bào HT-29 để điều tra các phân tử tế bào chịu trách nhiệm cho quá trình di căn. Nghiên cứu này quan sát thấy rằng các gen vimentin và CXCR4 điều chỉnh quá trình di căn của tế bào. Trong khi đó, việc chuyển gen microRNA-193a-5p mimic có thể làm giảm mức mRNA của các gen này và thành công trong việc giảm quá trình di căn của tế bào ung thư [2].
Nghiên cứu độc tính: Dòng tế bàoHT-29 được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu độc tính. Các tế bào ung thư đại tràng này được sử dụng để đánh giá độc tính của các ứng cử viên thuốc khác nhau thông qua các thử nghiệm khác nhau. Ví dụ, một nghiên cứu đã khám phá tiềm năng độc tính của chiết xuất etanol từ cây Syzygium cumini trên dòng tế bào HT-29. Kết quả cho thấy sự ức chế đáng kể sự phát triển của tế bào HT-29, cho thấy tiềm năng chống ung thư hứa hẹn của chiết xuất [3].
Vi sinh học: HT-29 có thể được sử dụng như một hệ thống tế bào chủ để nghiên cứu cơ chế bệnh lý của các vi sinh vật tiềm năng, chẳng hạn như vi khuẩn và virus. Các nhà nghiên cứu có thể nhiễm vi sinh vật vào tế bào HT-29 để nghiên cứu độc lực của chúng và phản ứng của tế bào chủ. Một nghiên cứu đã sử dụng tế bào HT-29 để khám phá các đặc tính probiotic của vi khuẩn axit lactic [4]. Một nghiên cứu khác đã sử dụng tế bào HT-29 để đánh giá hiệu quả và an toàn của các liệu pháp vi rút ăn vi khuẩn [5].
5. Các công bố nghiên cứu về tế bào HT-29
Phần này sẽ giới thiệu một số công bố nghiên cứu nổi bật về tế bào HT-29, giúp bạn lập kế hoạch cho nghiên cứu của mình.
Nghiên cứu này đề xuất chiết xuất ethanol từ Syzygium cumini là một tác nhân chống ung thư tiềm năng đối với dòng tế bào ung thư đại tràng HT-29. Chiết xuất này đã ức chế đáng kể sự phát triển của tế bào ung thư.
Bài báo này trên tạp chí Bioscience Reports đã kiểm tra hoạt tính chống ung thư của hợp chất Tetradrine trên các tế bào HT-29. Kết quả cho thấy tetrandrine ức chế sự phát triển và tăng sinh của tế bào ung thư thông qua việc điều chỉnh các con đường tín hiệu tế bào.
Nghiên cứu này đề xuất rằng miRNA-193a-5p có thể điều chỉnh quá trình di căn của tế bào HT-29 bằng cách điều chỉnh các gen liên quan đến di căn.
Bài báo này được công bố trên Nature Scientific Reports vào năm 2018. Nghiên cứu này đã sử dụng dòng tế bào ung thư HT-29 làm mô hình tế bào ruột để đánh giá hiệu quả của phương pháp điều trị bằng vi khuẩn ăn vi khuẩn được đề xuất.
Trong nghiên cứu này, các nhà nghiên cứu đã sử dụng tế bào HT-29 để điều tra hoạt động probiotic của vi khuẩn axit lactic. Đáng chú ý, nghiên cứu cho thấy vi khuẩn Lactobacillus ngăn chặn sự bám dính của vi khuẩn gây bệnh vào tế bào ruột kết.
6. Tài nguyên về tế bào HT-29: Quy trình, Video & Hơn thế nữa
Phần này sẽ giới thiệu một số tài nguyên trực tuyến có sẵn về tế bào HT-29, giúp người dùng nắm bắt các quy trình bảo quản, nuôi cấy và chuyển gen.
Quy trình nuôi cấy tế bào
Các tài nguyên sau đây sẽ hướng dẫn bạn về việc nuôi cấy lại tế bào HT-29.
- Nuôi cấy tế bào HT-29: Liên kếtnày cung cấp kiến thức cơ bản về môi trường nuôi cấy, rã đông và nuôi cấy lại tế bào HT-29.
- Bảo quản văn hóa HT-29: Bài viếtnày chứa tất cả thông tin hữu ích về nuôi cấy và bảo quản tế bào HT-29.
Quy trình chuyển gen
Dòng tế bào HT-29 có hiệu suất chuyển gen cao và thường được sử dụng trong các nghiên cứu biểu hiện gen. Các tài nguyên sau đây mô tả các quy trình chuyển gen có thể áp dụng cho các tế bào này.
- Điện chuyển gen cho HT-29: Liên kết trang web này chứa quy trình chi tiết về điện chuyển gen cho tế bào HT-29.
- Điện chuyển dòng tế bào HT-29: Tài liệu này mô tả quy trình điện chuyển dòng tế bào HT-29 bằng DNA plasmid.
Video liên quan đến dòng tế bào HT-29
Dưới đây là một số video về việc nuôi cấy và duy trì dòng tế bào gây ung thư này.
- Chuyển giao tế bào: Videonày trình bày quy trình chuyển giao tế bào cho các dòng tế bào bám dính.
- Điện chuyển gen cho tế bào HT-29: Videonày sẽ hướng dẫn bạn về phương pháp điện chuyển gen được sử dụng cho tế bào HT-29.
Chúng tôi hy vọng rằng thông tin trong bài viết này là hữu ích và đủ để bạn có thể xử lý và duy trì dòng tế bào HT-29. Nếu bạn có kế hoạch sử dụng tế bào HT-29 trong nghiên cứu của mình, hãy đặt hàng từ chúng tôi.
Tham khảo
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, và I. Recio, Dòng tế bào HT29. Tác động của các chất sinh học trong thực phẩm đối với sức khỏe: các mô hình in vitro và ex vivo, 2015: tr. 113-124.
- Shirafkan, N., et al., microRNA-193a-5p ức chế sự di chuyển của tế bào ung thư đại tràng HT-29 ở người thông qua ức chế con đường di căn. Tạp chí Sinh hóa Tế bào, 2019. 120(5): tr. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean, và R. Safaralizadeh, Đánh giá tác dụng chống ung thư của chiết xuất ethanol từ Syzygium cumini trên dòng tế bào ung thư đại tràng HT-29. Tạp chí Ung thư Tiêu hóa, 2021. 52: tr. 575-581.
- Fonseca, H.C., et al., Tính chất probiotic của lactobacilli và khả năng ức chế sự bám dính của vi khuẩn gây bệnh đường ruột vào các tế bào Caco-2 và HT-29. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: tr. 102-112.
- Shan, J., et al., Vi rút ăn vi khuẩn có độc lực cao hơn đối với vi khuẩn trong tế bào người so với trong môi trường nuôi cấy vi khuẩn; những phát hiện từ tế bào HT-29. Báo cáo khoa học, 2018. 8(1): tr. 5091.
