Tế bào HK-2 - Nghiên cứu chức năng và bệnh lý thận bằng tế bào HK-2 trong nghiên cứu thận
HK-2 là dòng tế bào biểu mô thận người bất tử hóa thường được sử dụng trong nghiên cứu độc học. Các nhà nghiên cứu đánh giá tác động của các chất độc môi trường lên các tế bào thận này. Ngoài ra, họ còn sử dụng tế bào HK-2 để nghiên cứu các bệnh thận và cơ chế cơ bản của chúng.
- Môi trường nuôi cấy
- Môi trường nuôi cấy dòng tế bào keratinocyte chứa 10% huyết thanh bò thai, 0,05 mg/ml chiết xuất tuyến yên bò (BPE) và 5 ng/ml yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF) là môi trường nuôi cấy tế bào HK-2 lý tưởng. Môi trường nuôi cấy nên được thay mới mỗi 2 đến 3 ngày một lần.
- Thời gian nhân đôi
- Thời gian nhân đôi của tế bào HK-2 dao động từ 47,3 giờ đến 61,7 giờ.
- Loại tăng trưởng
- Dòng tế bào biểu mô thận HK-2 là dòng tế bào bám dính.
- Mức độ an toàn sinh học
- BSL-2
- Có sẵn tại
- Cytion — Đặt hàng HK-2
Tế bào HK-2: Nguồn gốc và đặc điểm chung
Nguồn gốc và đặc điểm chung của dòng tế bào là những thông tin cần thiết để xử lý, bảo quản và sử dụng dòng tế bào một cách đúng đắn. Phần này của bài viết sẽ đề cập đến những nội dung sau: Tế bào HK-2 trong thận người 2 là gì? Vai trò của HK2 là gì? Tế bào HK2 là gì? Nguồn gốc của dòng tế bào HK-2 là gì? Kích thước và hình thái của tế bào HK-2 là gì?
- Tế bào Thận người 2 (HK-2) là một loại tế bào ống gần có nguồn gốc từ mô thận bình thường của người trưởng thành châu Âu. Dòng tế bào HK-2 được thiết lập bằng cách truyền các tế bào thận với một retrovirus tái tổ hợp bao gồm các gen E6/E7 của virus u nhú ở người 16. Thí nghiệm này đã dẫn đến sự bất tử hóa và thiết lập một dòng tế bào biểu mô thận HK-2 phát triển liên tục.
- Tế bào HK-2 có hình thái biểu mô.
- Kích thước tế bào HK-2 dao động từ 17,4 - 18,6 µm đường kính. Đường kính trung bình là 18,2 µm [1].
Dòng tế bào HK-2: Thông tin về nuôi cấy
Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào thận người 2 có thể giúp ích đáng kể cho bạn trước khi làm việc với dòng tế bào này. Thông tin cần thiết về nuôi cấy tế bào HK-2 được đề cập trong phần này của bài viết. Bạn sẽ biết: Tế bào HK-2 có bám dính không? Thời gian nhân đôi của tế bào HK-2 là bao lâu? Dung dịch nuôi cấy nào được sử dụng để nuôi cấy tế bào HK-2?
Những điểm chính về nuôi cấy tế bào HK-2
Thời gian nhân đôi quần thể:
Thời gian nhân đôi của tế bào HK-2 dao động từ 47,3 giờ đến 61,7 giờ.
Bám dính hay lơ lửng:
Dòng tế bào biểu mô thận HK-2 là tế bào bám dính.
Tỷ lệ nuôi cấy lại:
Tế bào HK-2 được nuôi cấy lại với tỷ lệ từ 1:2 đến 1:4. Tế bào HK-2 bám dính được rửa bằng dung dịch PBS 1x và ủ ở nhiệt độ phòng trong 8 đến 10 phút sau khi thêm dung dịch Accutase. Thêm môi trường nuôi cấy vào các tế bào đã tách rời và ly tâm. Các tế bào thu được được tái huyền phù cẩn thận và đổ vào các bình mới để nuôi cấy.
Môi trường tăng trưởng:
Môi trường nuôi cấy dòng tế bào keratinocyte chứa 10% huyết thanh bò thai, 0,05 mg/ml chiết xuất tuyến yên bò (BPE) và 5 ng/ml yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF) là môi trường nuôi cấy tế bào HK-2 lý tưởng. Môi trường nuôi cấy nên được thay mới mỗi 2 đến 3 ngày một lần.
Điều kiện phát triển:
Các dòng tế bào thận người 2 được nuôi cấy trong tủ ấm có độ ẩm với nồng độ CO2 5% ở nhiệt độ 37°C.
Bảo quản:
Các tế bào đông lạnh được bảo quản trong pha hơi của nitơ lỏng hoặc ở nhiệt độ dưới -150 °C trong tủ đông nhiệt độ cực thấp.
Quy trình đông lạnh và môi trường:
Môi trường đông lạnh CM-1 hoặc CM-ACF là lý tưởng để đông lạnh tế bào HK-2. Tóm lại, phương pháp đông lạnh chậm được lựa chọn để nhiệt độ chỉ giảm 1 độ C mỗi phút và bảo vệ tế bào khỏi mọi cú sốc.
Quy trình rã đông:
Các tế bào đông lạnh được rã đông trong bể nước được đặt ở nhiệt độ 37 độ C. Các tế bào này được thêm vào môi trường nuôi cấy mới và tái huyền phù. Sau đó, các tế bào được phân phối vào một bình mới chứa môi trường sinh trưởng. Sau 24 giờ, môi trường được thay thế để loại bỏ các thành phần môi trường đông lạnh.
Cấp độ an toàn sinh học:
Các nuôi cấy tế bào HK-2 được duy trì trong các phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1.
Ưu điểm và hạn chế của dòng tế bào HK-2
HK-2 là dòng tế bào biểu mô ống gần thận người được sử dụng rộng rãi. Giống như các dòng tế bào khác, nó cũng có một số ưu điểm và hạn chế. Phần này sẽ thảo luận về một số ưu và nhược điểm chính của dòng tế bào thận người 2.
Ưu điểm
Các ưu điểm chính của dòng tế bào HK-2 bao gồm:
Đặc điểm rõ ràng
Dòng tế bào HK-2 được đặc trưng rộng rãi về mặt hình thái, kích thước và bộ gen. Nhiều nghiên cứu đã được thực hiện trên các tế bào thận bình thường này.
Bất tử
HK-2 là một dòng tế bào liên tục với tuổi thọ kéo dài, cho phép nhân giống qua nhiều lần truyền. Đặc điểm này đảm bảo nguồn cung cấp tế bào liên tục cho các thí nghiệm trong phòng thí nghiệm.
Đặc điểm biểu mô ống gần
Các tế bào HK-2 thể hiện kiểu hình biệt hóa rõ ràng, đặc trưng của các tế bào ống gần (PTC) có trong thận người. Đặc điểm độc đáo này khiến các tế bào HK-2 trở thành mô hình in vitro quý giá để nghiên cứu sinh lý thận, các quá trình tế bào và phản ứng với các kích thích khác nhau.
Hạn chế
Dưới đây là một số hạn chế của dòng tế bào HK-2:
Mô hình in vitro
HK-2 đóng vai trò là mô hình in vitro của các tế bào thận bình thường, đặc biệt thể hiện các đặc điểm của tế bào biểu mô ống gần. Tuy nhiên, nó có thể không tái tạo đầy đủ sự phức tạp của mô thận người và môi trường vi mô trong cơ thể sống.
Ứng dụng của dòng tế bào HK-2 trong nghiên cứu
Dòng tế bào HK-2 có nhiều ứng dụng trong nghiên cứu độc tính học. Ở đây, chúng tôi đã thảo luận về một số ứng dụng nghiên cứu cụ thể và quan trọng của dòng tế bào ống gần của người này.
- Sinh lý thận: Tế bào HK-2 thường được sử dụng để nghiên cứu sinh lý và chức năng thận bình thường. Các nhà nghiên cứu sử dụng các tế bào biểu mô ống gần này để nghiên cứu các kênh ion, quá trình vận chuyển và các cơ chế tế bào khác điều chỉnh cân bằng nội môi thận. Ví dụ, các nhà nghiên cứu đã nghiên cứu vai trò của các kênh Transient Receptor Potential Channel 6 (TRPC6) trong quá trình chết tế bào do (+)-Conocarpan (CNCP), một neolignan, gây ra ở các tế bào biểu mô thận, HK-2 [2].
- Bệnh thận: Dòng tế bào thận 2 của người được sử dụng để nghiên cứu các bệnh thận khác nhau, ví dụ như tổn thương thận cấp tính và bệnh thận do tiểu đường, cũng như các cơ chế tế bào và phân tử cơ bản của chúng. Chẳng hạn như nghiên cứu đã phát hiện ra rằng mức độ methyl hóa protein klotho có liên quan đến tổn thương thận. Giảm mức độ methyl hóa của promoter gen Klotho có thể tăng cường sự biểu hiện của gen này và làm giảm tổn thương thận gây ra ở các mô hình chuột db/db bị tiểu đường và các tế bào HK-2 được xử lý bằng glucose cao [3].
- Các nghiên cứu độc tính: Tế bào HK-2 là một công cụ nghiên cứu tuyệt vời để đánh giá tác dụng tiềm năng của các loại thuốc, hóa chất và chất ô nhiễm môi trường khác nhau. Các nghiên cứu này có thể giúp các nhà nghiên cứu đánh giá tính an toàn của thuốc và tác dụng phụ đối với tế bào thận. Chẳng hạn như một nghiên cứu được công bố vào năm 2022 đã đánh giá tác dụng tiềm năng của polysaccharide và chiết xuất nước từ thảo mộc tự nhiên Polygonatumkingianum (PK) đối với độc tính thận do uranium gây ra ở tế bào HK-2. Họ phát hiện ra rằng PK có tác dụng bảo vệ và ngăn ngừa ngộ độc uranium trong tế bào thận [4].
5. Tế bào HK-2: Các công trình nghiên cứu
Dưới đây là một số công bố nghiên cứu thú vị liên quan đến tế bào biểu mô thận HK-2.
Nghiên cứu này trên tạp chí Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) đề xuất rằng RNA vòng HIPK3 có thể làm giảm sự ức chế tăng sinh tế bào HK-2 do độc tính của glucose cao gây ra. Ngoài ra, nó có thể ức chế sự chết tế bào bằng cách điều chỉnh chuỗi phản ứng miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.
Bài báo nghiên cứu này trên tạp chí Nanomedicine (2020) đã đánh giá các cơ chế độc tính khác nhau của các hạt nano vàng (AuNPs) trong tế bào ung thư 786-0 và tế bào biểu mô ống gần HK-2.
Độc tính do glucose cao gây ra ở tế bào HK-2 có thể được giảm nhẹ bằng cách ức chế miRNA-320c
Bài báo này được đăng trên tạp chí Renal Failure (2022). Kết quả nghiên cứu cho thấy microRNA-320c có thể làm giảm độc tính do đường huyết cao gây ra ở tế bào thận (HK-2) bằng cách nhắm vào PTEN và ức chế tín hiệu PI3K/AKT.
Nghiên cứu này trên tạp chí Tissue Engineering Part A (2022) đề xuất rằng exosome có nguồn gốc từ tế bào gốc trung mô ngăn chặn quá trình chuyển đổi biểu mô-trung mô của tế bào thận HK-2.
Bài báo trên tạp chí Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) cho biết lncRNA TapSAKI làm tăng phản ứng viêm và chết tế bào ở tế bào HK-2 bằng cách điều chỉnh con đường tín hiệu microRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB.
Tài nguyên về dòng tế bào HK-2: Quy trình, video và hơn thế nữa
HK-2 là một dòng tế bào nổi tiếng. Dưới đây là một số tài nguyên mô tả quy trình nuôi cấy tế bào HK-2.
- Nuôi cấy tế bào HK-2: Trang web này cung cấp nhiều thông tin về nuôi cấy tế bào HK-2. Chẳng hạn như công thức môi trường nuôi cấy tế bào HK-2, quy trình chuyển dòng và quy trình xử lý và duy trì các nuôi cấy sinh sôi và đông lạnh.
- Chuyển dòng tế bào: Video này sẽ giúp bạn tìm hiểu quy trình phân chia hoặc chuyển dòng chung cho các dòng tế bào bám dính.
Tài liệu tham khảo
- Handl, J., et al., Ảnh hưởng của việc truyền tế bào lặp đi lặp lại đến độ nhạy cảm của tế bào ống thận gần HK-2 của người đối với các hợp chất độc hại. Physiological Research, 2020. 69(4): tr. 731.
- Yang, G., et al., Sự kích hoạt các kênh TRPC6 góp phần vào quá trình chết tế bào do apoptosis do (+)-conocarpan gây ra ở các tế bào HK-2. Food and Chemical Toxicology, 2019. 129: tr. 281-290.
- Yang, X.H., et al., EGCG làm giảm tổn thương thận bằng cách đảo ngược quá trình hypermethylation của gen klotho ở chuột db/db mắc bệnh tiểu đường và tế bào HK-2. Y học Oxy hóa và Tuổi thọ Tế bào, 2020. 2020.
- Li, W., et al., Tác dụng bảo vệ của polysaccharides và chiết xuất nước từ Polygonatum kingianum đối với độc tính do uranium gây ra trong tế bào thận người (HK-2). Tạp chí Quốc tế về Đại phân tử Sinh học, 2022. 202: tr. 68-79.