Tế bào DLD-1: Ứng dụng và Nhận thức về Tế bào DLD-1 trong Nghiên cứu Ung thư Đại trực tràng
DLD-1 là dòng tế bào ung thư đại trực tràng của người thường được sử dụng trong nghiên cứu ung thư. Đây là công cụ quý giá để nghiên cứu các khía cạnh khác nhau của ung thư đại tràng, bao gồm sự phát triển khối u, tiến triển, cơ chế phân tử cơ bản và phản ứng với các tác nhân điều trị. Do đó, DLD-1 đóng vai trò quan trọng trong việc hiểu rõ bệnh lý và phát triển các chiến lược điều trị tiềm năng.
Bài viết này sẽ cung cấp thông tin quan trọng về dòng tế bào DLD-1 mà bạn cần biết trước khi làm việc với nó. Bài viết sẽ bao gồm:
- Đặc điểm chung và nguồn gốc của tế bào DLD-1
- Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào DLD-1
- Dòng tế bào DLD-1: Ưu điểm & Hạn chế
- Ứng dụng nghiên cứu của dòng tế bào DLD-1
- Các công bố nghiên cứu về dòng tế bào DLD-1
- Tài nguyên cho dòng tế bào DLD-1: Quy trình, video và nhiều hơn nữa
1. Đặc điểm chung và nguồn gốc của tế bào DLD-1
Trước khi làm việc với một dòng tế bào, yếu tố đầu tiên mà nhà nghiên cứu cần xem xét là nguồn gốc và các đặc điểm chung của nó. Phần này của bài viết là giới thiệu chi tiết về dòng tế bào DLD-1. Nó sẽ trả lời các câu hỏi thường gặp sau: Tế bào DLD-1 là gì? Dòng tế bào ung thư DLD-1 là gì? Các đột biến của dòng tế bào DLD-1 là gì? Kích thước của tế bào DLD-1 là bao nhiêu? Hình thái của tế bào DLD-1 như thế nào?
- DLD-1, một dòng tế bào ung thư đại tràng, có nguồn gốc từ ruột già của một bệnh nhân nam 67 tuổi bị ung thư đại tràng dạng tuyến. Nó được phân lập bởi D.L. Dexter và các đồng nghiệp trong khoảng thời gian 1977-1979. Dòng tế bào này có nguồn gốc chung với các dòng tế bào HCT-8, HCT-15 và HRT-18.
- Giống như ung thư đại trực tràng, tế bào DLD-1 có biểu hiện không ổn định microsatellite [1].
- Các đột biến trong DLD-1 bao gồm KRAS, P53, BRAF, BRCA1 và BRCA2. Do tình trạng P53 của DLD-1, đột biến BRCA, BRCA2 và KRAS trong DLD-1, các tế bào này được coi là lý tưởng cho các nghiên cứu về ung thư.
- Các tế bào này có hình thái tương tự biểu mô.
- Kích thước của dòng tế bào DLD-1 khoảng 15 µm.
- Dòng tế bào ung thư đại tràng người DLD-1 có karyotype giả nhị bội. Khoảng 86% tế bào có số lượng nhiễm sắc thể trung bình là 46. Tuy nhiên, đa bội thể có thể tồn tại trong 17,1% dân số tế bào.
2. Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào DLD-1
Trước khi nuôi cấy bất kỳ dòng tế bào nào, bạn cần nắm rõ các yêu cầu cơ bản về nuôi cấy tế bào. Phần này sẽ nêu rõ các điểm quan trọng bạn cần nắm vững trước khi bắt đầu làm việc với dòng tế bào DLD-1. Điều này bao gồm: Thời gian nhân đôi của DLD-1 là bao lâu? Vật liệu nuôi cấy DLD-1 là gì? Mật độ gieo tế bào DLD-1 là bao nhiêu? Cách nuôi cấy tế bào DLD-1 như thế nào?
Điểm chính khi nuôi cấy tế bào DLD-1
|
Thời gian nhân đôi: |
Thời gian nhân đôi của DLD-1 là khoảng 15 giờ. |
|
Dính bám hay treo lơ lửng: |
DLD-1 là dòng tế bào ung thư đại tràng người bám dính. Tế bào phát triển thành lớp đơn. |
|
Mật độ gieo tế bào: |
Tế bào DLD-1 được gieo với mật độ 1 đến 2 x10⁴tế bào/cm². Tế bào bám dính được rửa bằng dung dịch đệm phosphate (PBS) và ủ với dung dịch chuyển dòng (Accutase) ở nhiệt độ phòng. Sau khi ủ trong 8 đến 10 phút, các tế bào tách ra được thêm vào môi trường nuôi cấy và ly tâm. Cặn tế bào sau đó được tái phân tán cẩn thận và tế bào được đổ vào các bình nuôi cấy mới chứa môi trường tăng trưởng. |
|
Dung dịch nuôi cấy: |
RPMI 1640 với các chất bổ sung môi trường, bao gồm 10% huyết thanh bò non (FBS), 2,1 mM glutamine ổn định và 2,0 g/L NaHCO₃ được sử dụng để nuôi cấy tế bào DLD-1. Môi trường nên được thay thế 2-3 lần mỗi tuần. |
|
Điều kiện nuôi cấy: |
Văn hóa DLD-1 được duy trì trong tủ ấm 37°C có độ ẩm và cung cấp 5% CO2. |
|
Bảo quản: |
Tế bào DLD-1 được bảo quản trong pha hơi của nitơ lỏng hoặc tủ đông siêu lạnh điện (ở nhiệt độ dưới -150°C). |
|
Quy trình đông lạnh và môi trường: |
Có thể sử dụng môi trường đông lạnh CM-1 hoặc CM-ACF để đông lạnh tế bào DLD-1. Quá trình đông lạnh chậm luôn được khuyến nghị, cho phép giảm nhiệt độ dần dần 1°C, từ đó ngăn ngừa tế bào bị sốc và bảo vệ khả năng sống sót của chúng. |
|
Quá trình rã đông: |
Tế bào đông lạnh được rã đông trong bể nước đã được cài đặt sẵn ở nhiệt độ 37°C trong 40 đến 60 giây cho đến khi còn lại một khối băng nhỏ. Sau đó, tế bào được thêm vào môi trường tươi và ly tâm. Bước này là cần thiết để loại bỏ các thành phần của môi trường đông lạnh khỏi tế bào. Tế bào thu được được tái phân tán trong môi trường tăng trưởng và phân phối vào bình nuôi cấy để phát triển. |
|
Mức độ an toàn sinh học: |
Dòng tế bào DLD-1 được duy trì trong phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1. |
3. Dòng tế bào DLD-1: Ưu điểm & Hạn chế
Trong phần này của bài viết, chúng ta sẽ xem xét các ưu điểm và hạn chế của dòng tế bào ung thư đại tràng DLD-1.
Ưu điểm
Các ưu điểm chính của dòng tế bào DLD-1 là:
|
Mô hình ung thư đại tràng |
Tế bào DLD-1 mang các đột biến thường gặp ở bệnh nhân ung thư đại tràng, như đột biến KRAS DLD-1, BRCA DLD-1 và BRCA2 DLD-1. Tính liên quan này khiến chúng trở thành mô hình tế bào phù hợp về mặt lâm sàng để nghiên cứu bệnh này. |
|
Dòng tế bào gây u |
Tế bào DLD-1 có khả năng gây ung thư. Chúng có thể gây ra khối u khi được tiêm vào chuột nude. Do đó, các nhà nghiên cứu sử dụng các tế bào này để phát triển các mô hình khối u xenograft, giúp nghiên cứu quá trình hình thành, phát triển và tiến triển của khối u trong cơ thể sống. |
Hạn chế
Các hạn chế liên quan đến tế bào DLD-1 là:
|
Sự đa dạng |
Các quần thể tế bào ung thư đại tràng DLD-1 có tính đa dạng về mặt di truyền và biểu hiện hình thái. Điều này có thể ảnh hưởng đến tính tổng quát của kết quả nghiên cứu. |
4. Ứng dụng nghiên cứu của dòng tế bào DLD-1
Dòng tế bào DLD-1 cung cấp nhiều ứng dụng trong nghiên cứu ung thư. Một số ứng dụng nổi bật được thảo luận trong phần này.
- Nghiên cứu ung thư: Tế bàoDLD-1 là mô hình in vitro quý giá để hiểu các cơ chế phân tử cơ bản của sự phát triển, tiến triển và tăng trưởng của ung thư đại tràng. Ngoài ra, chúng được sử dụng để nghiên cứu biểu hiện gen, các con đường tín hiệu và ảnh hưởng của các đột biến gen cụ thể đối với hành vi của tế bào ung thư. Nghiên cứu được thực hiện vào năm 2022 cho thấy chuỗi tín hiệu PI3K/Akt/YAP điều chỉnh quá trình di chuyển và xâm lấn của dòng tế bào ung thư đại trực tràng DLD-1 [2].
- Phát triển thuốc: Các nhà nghiên cứu sử dụng dòng tế bào DLD-1 để kiểm tra hiệu quả của các loại thuốc chống ung thư và đánh giá tiềm năng của chúng trong điều trị ung thư đại tràng. Điều này hỗ trợ quá trình phát triển thuốc và chống lại bệnh tật một cách hiệu quả. Một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2022 đã sử dụng dòng tế bào ung thư DLD-1 và khám phá hoạt tính chống ung thư của các hợp chất silicon phthalocyanines, được tổng hợp hóa học. Kết quả nghiên cứu cho thấy các hợp chất này là các tác nhân chống ung thư mạnh mẽ [3]. Đáng chú ý, một nghiên cứu khác đã phát hiện tiềm năng chống ung thư của protein P8 có nguồn gốc từ probiotic bằng cách sử dụng các tế bào DLD-1 [4].
5. Các công bố nghiên cứu về tế bào DLD-1
Phần này sẽ giới thiệu một số công bố nghiên cứu thú vị và được trích dẫn nhiều liên quan đến dòng tế bào ung thư đại tràng DLD-1.
Bài báo này được đăng trên Tạp chí Sản phẩm Hoạt tính Sinh học từ Thiên nhiên (2022). Nghiên cứu cho thấy diosmin, một flavonoid, gây chết tế bào trong các tế bào DLD-1 và cũng gây ức chế chu kỳ tế bào; do đó, nó có thể là một tác nhân chống ung thư tiềm năng.
Nghiên cứu trên Tạp chí Tế bào và Hệ thống Động vật (2018) đề xuất rằng bromelain, một enzyme, ức chế đột biến KRAS trong DLD-1 và gây ra tác dụng độc tế bào mạnh mẽ.
Bài báo nghiên cứu này được công bố vào năm 2019 trên tạp chí “Environmental Toxicology”. Nghiên cứu đã khám phá tác dụng chống ung thư của hợp chất tự nhiên Bergapten, sử dụng dòng tế bào ung thư đại tràng DLD-1.
Nghiên cứu trên tạp chí Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) cho thấy các hợp chất nano curcumin/oxit sắt có hiệu quả cao đối với các tế bào ung thư đại tràng DLD-1.
Bài báo nghiên cứu này được công bố vào năm 2020 trên Tạp chí Sinh học Thổ Nhĩ Kỳ. Nghiên cứu đề xuất rằng hoạt chất tự nhiên epibrassinolide kích hoạt AKT trong các tế bào DLD-1, kích thích quá trình tự thực liên quan đến polyamine.
6. Tài nguyên cho dòng tế bào DLD-1: Quy trình, Video và Hơn thế nữa
Dưới đây là một số tài nguyên về dòng tế bào DLD-1:
- DLD-1 transfection: Video hướng dẫn này là hướng dẫn chi tiết về quy trình transfection in vitro của DLD-1.
- Tế bào DLD-1: Bài báo nghiên cứu này mô tả ngắn gọn các yêu cầu nuôi cấy tế bào DLD-1, bao gồm môi trường nuôi cấy và điều kiện nuôi cấy. Ngoài ra, nó có thể giúp bạn hiểu quy trình chuyển gen được sử dụng cho tế bào DLD-1.
Các liên kết sau đây chứa quy trình nuôi cấy DLD-1, dòng tế bào ung thư đại tràng có nguồn gốc từ người.
- Dòng tế bào DLD-1: Trang web này cung cấp thông tin cơ bản về dòng tế bào DLD-1. Nó sẽ giúp bạn tìm hiểu các quy trình nuôi cấy tế bào DLD-1 khác nhau, bao gồm nuôi cấy lại và xử lý các mẫu tế bào đông lạnh và đang phát triển.
Tham khảo
- Gavrilas, L.I., et al., Các gen gây apoptosis là mục tiêu mới cho điều trị đơn lẻ và kết hợp với resveratrol và curcumin trong ung thư đại tràng. Food & function, 2019. 10(6): tr. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., Tín hiệu PI3K/Akt/YAP thúc đẩy di chuyển và xâm lấn củatế bào ung thư đại trực tràng DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): tr. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Hoạt tính chống ung thư của các phthalocyanine silic mới đối với dòng tế bào ung thư đại trực tràng DLD-1. New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): tr. 19863-19873.
- An, B.C., et al., Vai trò chống ung thư của protein P8 có nguồn gốc từ probiotic trong dòng tế bào ung thư đại trực tràng DLD-1. Tạp chí Quốc tế về Khoa học Molecule, 2023. 24(12): tr. 9857.