Tế bào DLD-1: Ứng dụng và những phát hiện mới về tế bào DLD-1 trong nghiên cứu ung thư đại trực tràng
DLD-1 là một dòng tế bào ung thư đại trực tràng ở người thường được sử dụng trong nghiên cứu ung thư. Đây là một công cụ quý giá để nghiên cứu các khía cạnh khác nhau của ung thư đại tràng, bao gồm sự phát triển và tiến triển của khối u, các cơ chế phân tử cơ bản, cũng như phản ứng với các tác nhân điều trị. Do đó, DLD-1 đóng vai trò nổi bật trong việc hiểu rõ bệnh lý và phát triển các chiến lược điều trị tiềm năng.
- Môi trường nuôi cấy
- RPMI 1640 với các chất bổ sung môi trường, bao gồm 10% huyết thanh bò thai FBS, 2,1 mM Glutamine ổn định và 2,0 g/L NaHCO3 được sử dụng để nuôi cấy tế bào DLD-1. Môi trường nên được thay 2-3 lần mỗi tuần.
- Thời gian nhân đôi
- Thời gian nhân đôi của DLD-1 là khoảng 15 giờ.
- Loại tăng trưởng
- DLD-1 là dòng tế bào ung thư đại tràng người bám dính. Tế bào phát triển thành lớp đơn.
- Mức độ an toàn sinh học
- BSL-1
- Có sẵn tại
- Cytion — Đặt hàng DLD-1
Đặc điểm chung và nguồn gốc của tế bào DLD-1
Trước khi nghiên cứu về một dòng tế bào, điều đầu tiên mà nhà nghiên cứu cần xem xét là nguồn gốc và các đặc điểm chung của dòng tế bào đó. Phần bài viết này là phần giới thiệu chi tiết về dòng tế bào DLD-1. Phần này sẽ trả lời các câu hỏi thường gặp sau: Tế bào DLD-1 là gì? Dòng tế bào ung thư DLD-1 là gì? Các đột biến của dòng tế bào DLD-1 là gì? Kích thước của tế bào DLD-1 là bao nhiêu? Hình thái của tế bào DLD-1 như thế nào?
- DLD-1, một dòng tế bào ung thư đại tràng, có nguồn gốc từ ruột già của một bệnh nhân nam 67 tuổi bị ung thư biểu mô tuyến đại tràng. Dòng tế bào này được D.L. Dexter và các đồng nghiệp phân lập trong giai đoạn 1977-1979. Dòng tế bào này có cùng nguồn gốc với các dòng tế bào HCT-8, HCT-15 và HRT-18.
- Giống như các trường hợp ung thư đại trực tràng, các tế bào DLD-1 có biểu hiện bất ổn định vi vệ tinh [1].
- Các đột biến của DLD-1 bao gồm KRAS, P53, BRAF, BRCA1 và BRCA2. Do tình trạng P53 của DLD-1, đột biến BRCA, BRCA2 và KRAS của DLD-1, các tế bào này được coi là lý tưởng cho các nghiên cứu về ung thư.
- Các tế bào này có hình thái giống biểu mô.
- Kích thước của dòng tế bào DLD-1 là khoảng 15 µm.
- Dòng tế bào ung thư đại tràng ở người DLD-1 có kiểu nhiễm sắc thể giả lưỡng bội. Khoảng 86% tế bào có số nhiễm sắc thể trung bình là 46. Tuy nhiên, đa bội thể cũng có thể tồn tại ở 17,1% quần thể tế bào.
Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào DLD-1
Trước khi nuôi cấy bất kỳ dòng tế bào nào, bạn phải nắm rõ các yêu cầu cơ bản về nuôi cấy tế bào. Phần này sẽ nêu bật những điểm quan trọng mà bạn cần nắm vững trước khi bắt đầu làm việc với dòng tế bào DLD-1. Điều này bao gồm: Thời gian nhân đôi của DLD-1 là bao lâu? Môi trường nuôi cấy DLD-1 là gì? Mật độ gieo tế bào DLD-1 là bao nhiêu? Làm thế nào để nuôi cấy tế bào DLD-1?
Các điểm chính trong việc nuôi cấy tế bào DLD-1
Thời gian nhân đôi:
Thời gian nhân đôi của DLD-1 là khoảng 15 giờ.
Bám dính hay lơ lửng:
DLD-1 là dòng tế bào ung thư đại tràng người bám dính. Tế bào phát triển thành lớp đơn.
Mật độ gieo tế bào:
Tế bào DLD-1 được gieo với mật độ 1 đến 2 x 10⁴ tế bào/cm². Tế bào bám dính được rửa bằng dung dịch đệm phosphate (PBS) 1x và ủ với dung dịch tách tế bào (Accutase) ở nhiệt độ phòng. Sau khi ủ từ 8 đến 10 phút, các tế bào đã bong ra được thêm vào môi trường nuôi cấy và ly tâm. Sau đó, cặn tế bào được tái huyền phù cẩn thận và các tế bào được đổ vào các bình nuôi cấy mới chứa môi trường sinh trưởng.
Môi trường nuôi cấy:
RPMI 1640 với các chất bổ sung môi trường, bao gồm 10% huyết thanh bò thai FBS, 2,1 mM Glutamine ổn định và 2,0 g/L NaHCO3 được sử dụng để nuôi cấy tế bào DLD-1. Môi trường nên được thay 2-3 lần mỗi tuần.
Điều kiện phát triển:
Các nuôi cấy DLD-1 được duy trì trong tủ ấm có độ ẩm 37°C với nguồn cung cấp CO2 5%.
Bảo quản:
Tế bào DLD-1 được bảo quản trong pha hơi của nitơ lỏng hoặc tủ đông điện siêu lạnh (ở nhiệt độ dưới -150°C).
Quy trình đông lạnh và môi trường:
Có thể sử dụng môi trường đông lạnh CM-1 hoặc CM-ACF để đông lạnh tế bào DLD-1. Luôn khuyến nghị thực hiện quy trình đông lạnh chậm, cho phép nhiệt độ giảm dần 1°C, từ đó ngăn ngừa sốc cho tế bào và bảo vệ khả năng sống của chúng.
Quy trình rã đông:
Các tế bào đông lạnh được rã đông trong bể nước được cài đặt sẵn ở nhiệt độ 37 °C trong 40 đến 60 giây cho đến khi chỉ còn lại một cục băng nhỏ. Sau đó, tế bào được thêm vào môi trường mới và ly tâm. Bước này là cần thiết để loại bỏ các thành phần môi trường đông lạnh khỏi tế bào. Các tế bào thu được được tái huyền phù trong môi trường nuôi cấy và phân phối vào bình để nuôi cấy.
Cấp độ an toàn sinh học:
Dòng tế bào DLD-1 được duy trì trong các phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1.
Dòng tế bào DLD-1: Ưu điểm và hạn chế
Trong phần này của bài viết, chúng ta sẽ xem xét những ưu điểm và hạn chế của dòng tế bào ung thư đại tràng DLD-1.
Ưu điểm
Những ưu điểm chính của dòng tế bào DLD-1 là:
Mô hình ung thư đại trực tràng
Các tế bào DLD-1 có các đột biến thường thấy ở bệnh nhân ung thư đại tràng, chẳng hạn như đột biến DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA và DLD-1 BRCA2. Tính liên quan này khiến chúng trở thành mô hình tế bào phù hợp về mặt lâm sàng để nghiên cứu căn bệnh này.
Dòng tế bào gây ung thư
Tế bào DLD-1 có khả năng gây ung thư. Chúng có thể gây ra khối u khi được tiêm vào chuột nude. Do đó, các nhà nghiên cứu sử dụng các tế bào này để phát triển các mô hình khối u cấy ghép giúp nghiên cứu sự hình thành, phát triển và tiến triển của khối u trong cơ thể sống.
Hạn chế
Các hạn chế liên quan đến tế bào DLD-1 là:
Tính không đồng nhất
Các quần thể tế bào ung thư đại tràng DLD-1 thể hiện sự đa dạng về mặt di truyền và kiểu hình. Điều này có thể ảnh hưởng đến khả năng khái quát hóa các kết quả nghiên cứu.
Ứng dụng nghiên cứu của dòng tế bào DLD-1
Dòng tế bào DLD-1 có nhiều ứng dụng trong nghiên cứu ung thư. Một số ứng dụng nổi bật được thảo luận trong phần này.
- Nghiên cứu ung thư: Tế bào DLD-1 đóng vai trò là mô hình in vitro quý giá để hiểu các cơ chế phân tử cơ bản của sự phát triển, tiến triển và di căn của ung thư đại tràng. Hơn nữa, chúng còn được sử dụng để nghiên cứu biểu hiện gen, các con đường truyền tín hiệu và ảnh hưởng của các đột biến gen cụ thể đối với hành vi của tế bào ung thư. Một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2022 đã quan sát thấy rằng chuỗi tín hiệu PI3K/Akt/YAP điều chỉnh sự di chuyển và xâm lấn của dòng tế bào ung thư đại tràng DLD-1 [2].
- Phát triển thuốc: Các nhà nghiên cứu sử dụng dòng tế bào DLD-1 để kiểm tra hiệu quả của các loại thuốc chống ung thư và đánh giá tiềm năng của chúng trong điều trị ung thư đại tràng. Điều này hỗ trợ phát triển thuốc và chống lại bệnh tật một cách hiệu quả. Một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2022 đã sử dụng dòng tế bào ung thư DLD-1 và khám phá hoạt tính chống ung thư của silicon phthalocyanines, các hợp chất được tổng hợp hóa học. Kết quả nghiên cứu cho thấy các hợp chất này là các chất chống ung thư mạnh [3]. Điều thú vị là, một nghiên cứu khác đã phát hiện tiềm năng chống ung thư của protein P8 có nguồn gốc từ men vi sinh bằng cách sử dụng tế bào DLD-1 [4].
5. Các công trình nghiên cứu về dòng tế bào DLD-1
Phần này sẽ nêu bật một số công trình nghiên cứu thú vị và thường được trích dẫn liên quan đến dòng tế bào ung thư đại tràng DLD-1.
Công bố này được đăng trên Tạp chí Các Sản Phẩm Hoạt Tính Sinh Học Từ Thiên Nhiên (2022). Nghiên cứu cho thấy diosmin, một flavonoid, gây chết tế bào trong dòng tế bào DLD-1 và cũng gây ức chế chu kỳ tế bào; do đó, nó có thể là một tác nhân chống ung thư tiềm năng.
Bromelain ức chế hiệu quả ung thư đại tràng đột biến Kras bằng cách kích thích quá trình ferroptosis
Nghiên cứu này trên tạp chí Animal Cells and Systems (2018) đề xuất rằng bromelain, một loại enzyme, ức chế đột biến DLD-1 KRAS và phát huy tác dụng gây độc tế bào mạnh mẽ.
Bài báo nghiên cứu này được công bố vào năm 2019 trên tạp chí “Environmental Toxicology”. Nghiên cứu đã khám phá tác dụng chống ung thư của một hợp chất tự nhiên, Bergapten, bằng cách sử dụng dòng tế bào đại tràng DLD-1.
Nghiên cứu này trên tạp chí Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) đã phát hiện ra rằng các hợp chất nano curcumin/oxit sắt có hiệu quả cao đối với các tế bào ung thư đại tràng DLD-1.
Bài báo nghiên cứu này được công bố vào năm 2020 trên Tạp chí Sinh học Thổ Nhĩ Kỳ. Nghiên cứu đề xuất rằng một sản phẩm tự nhiên, epibrassinolide, thông qua việc kích hoạt AKT trong các tế bào DLD-1, kích thích quá trình tự thực liên quan đến polyamine.
Tài nguyên về dòng tế bào DLD-1: Quy trình, video và hơn thế nữa
Dưới đây là một số tài nguyên về tế bào DLD-1:
- Truyền gen DLD-1: Video hướng dẫn này là một hướng dẫn toàn diện về quy trình truyền gen DLD-1 trong ống nghiệm.
- Tế bào DLD-1: Bài báo nghiên cứu này mô tả ngắn gọn các yêu cầu nuôi cấy tế bào DLD-1, bao gồm môi trường và điều kiện nuôi cấy. Ngoài ra, nó có thể giúp bạn tìm hiểu quy trình chuyển gen được sử dụng cho tế bào DLD-1.
Các liên kết sau đây chứa quy trình nuôi cấy DLD-1, tế bào ung thư đại tràng có nguồn gốc từ người.
- Dòng tế bào DLD-1: Trang web này sẽ cung cấp thông tin cơ bản về dòng tế bào DLD-1. Nó sẽ giúp bạn tìm hiểu các quy trình nuôi cấy tế bào DLD-1 khác nhau, bao gồm nuôi cấy thứ cấp và xử lý các môi trường nuôi cấy đông lạnh và đang sinh sôi.
Tài liệu tham khảo
- Gavrilas, L.I., et al., Các gen gây apoptosis là mục tiêu mới cho các liệu pháp đơn lẻ và kết hợp với resveratrol và curcumin trong ung thư đại tràng. Food & function, 2019. 10(6): tr. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., Tín hiệu PI3K/Akt/YAP thúc đẩy sự di chuyển và xâm lấn của các tế bào ung thư đại trực tràng DLD‑1. Oncology Letters, 2022. 23(4): tr. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Hoạt tính chống ung thư của phthalocyanines silicon mới đối với dòng tế bào ung thư biểu mô tuyến đại tràng (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): tr. 19863-19873.
- An, B.C., et al., Vai trò chống ung thư của protein P8 có nguồn gốc từ men vi sinh trong dòng tế bào ung thư đại tràng DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): tr. 9857.