Dòng tế bào A375 - Hướng dẫn nghiên cứu ung thư hắc tố

A375 là dòng tế bào u hắc tố người được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu độc học và miễn dịch ung thư. Các nhà nghiên cứu sử dụng dòng tế bào này để nghiên cứu sinh học ung thư, các con đường tín hiệu, thử nghiệm hoặc sàng lọc các tác nhân chống ung thư tiềm năng, và phát triển các liệu pháp mới và hiệu quả.

Nguồn gốc và đặc điểm chung của dòng tế bào A375

Hiểu rõ nguồn gốc và đặc điểm chung của một dòng tế bào có thể giúp bạn lập kế hoạch sử dụng nó trong nghiên cứu. Phần này của bài viết sẽ trình bày nguồn gốc và đặc điểm của dòng tế bào A375. Ví dụ: Dòng tế bào A375 là gì? Đặc điểm của dòng tế bào A375 là gì? Tế bào A375 có nguồn gốc từ đâu? Hình thái của tế bào u hắc tố A375 như thế nào? Kích thước của tế bào A375 là bao nhiêu?

Dòng tế bào ung thư da A375 có nguồn gốc từ nuôi cấy mô cắt bỏ của một khối u rắn ở một phụ nữ 54 tuổi bị ung thư hắc tố ác tính [1].
Tế bào A375 có hình thái tương tự tế bào biểu mô.
Kích thước của tế bào A375 tương đối nhỏ hơn so với các dòng tế bào khác. Chúng có đường kính khoảng 12 µm.
Các tế bào melanoma A375 là tế bào hypotriploid. Số lượng nhiễm sắc thể trung bình của dòng tế bào này là 62. Thông thường, mỗi tế bào có chín nhiễm sắc thể dấu hiệu và một bản sao của các nhiễm sắc thể N2, N6 và N22 bình thường.

Bác sĩ kiểm tra các khối u trên da của người trưởng thành để chẩn đoán ung thư da.

Tế bào A375: Thông tin về nuôi cấy tế bào

Việc nuôi cấy tế bào A375 rất dễ dàng. Chúng không có yêu cầu nuôi cấy tế bào phức tạp. Phần này sẽ giúp bạn nắm bắt thông tin cần thiết về nuôi cấy tế bào. Chẳng hạn như thời gian nhân đôi của tế bào A375 là bao lâu. Dung dịch nuôi cấy của dòng tế bào A375 là gì? Mật độ gieo tế bào A375 là bao nhiêu? Tế bào melanoma A375 có bám dính không?

Điểm chính khi nuôi cấy tế bào A375

Thời gian nhân đôi:	Thời gian nhân đôi của A375 là 20 giờ.
Bám dính hay nổi trong dung dịch:	A375 là dòng tế bào melanoma người bám dính.
Mật độ gieo tế bào:	mật độ^{tế bào}1 x^10⁴^{tế bào/cm²}là lý tưởng cho nuôi cấy tế bào A375. Tế bào bám dính được rửa bằng dung dịch đệm phosphate (PBS) và ủ với dung dịch chuyển dòng (Accutase). Sau đó, tế bào được thêm vào môi trường nuôi cấy và ly tâm. Tế bào thu hoạch được tái phân tán trong môi trường nuôi cấy và phân phối vào các bình mới để phát triển.
Dung dịch nuôi cấy:	DMEM được khuyến nghị là môi trường lý tưởng cho A375 khi bổ sung 10% huyết thanh bò non (FBS), 4,5 g/L glucose, 1,5 g/L NaHCO₃, 4 mM L-glutamine và 1,0 mM natri pyruvate. Môi trường nuôi cấy A375 nên được thay mới 2-3 lần mỗi tuần.
Điều kiện nuôi cấy:	Tế bào melanoma A375 được nuôi cấy trong tủ ấm có độ ẩm (37°C) với nồng độ CO2 5%.
Bảo quản:	Tế bào A375 đông lạnh nên được bảo quản ở nhiệt độ dưới -150°C trong pha hơi của nitơ lỏng hoặc tủ đông điện.
Quy trình đông lạnh và môi trường:	Dung dịch nuôi cấy CM-1 hoặc CM-ACF được sử dụng để đông lạnh dòng tế bào A375. Quá trình đông lạnh chậm cho phép giảm nhiệt độ dần dần 1°C được lựa chọn để bảo vệ sự sống còn của tế bào.
Quy trình rã đông:	Lọ tế bào melanoma A375 đông lạnh được lắc mạnh trong bể nước trong 40 đến 60 giây cho đến khi chỉ còn một khối băng nhỏ. Tế bào được thêm vào môi trường tươi và ly tâm để loại bỏ các thành phần môi trường đông lạnh. Cụm tế bào thu được được tái phân tán và đổ vào các bình mới.
Mức độ an toàn sinh học:	Văn hóa A375 được xử lý và duy trì trong môi trường phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1.

Lớp tế bào A375 bám dính liên tục ở độ phóng đại 20x.

Ưu điểm và Hạn chế của dòng tế bào A375

Giống như các dòng tế bào khác, dòng tế bào u hắc tố A375 có sự kết hợp độc đáo giữa ưu điểm và hạn chế, khiến nó trở thành công cụ quý giá cho nghiên cứu ung thư u hắc tố. Phần này chỉ liệt kê một số ưu điểm và nhược điểm quan trọng của dòng tế bào A375.

Ưu điểm

Các ưu điểm nổi bật của dòng tế bào A375 được liệt kê dưới đây:

Mô hình khối u melanoma: Dòng tế bào A375 được phân lập từ một khối u melanoma ác tính, do đó đóng vai trò là mô hình khối u vô giá để nghiên cứu sinh học melanoma và các can thiệp điều trị. Các tế bào này thể hiện các đặc tính tương tự melanoma, như tốc độ tăng sinh cao và khả năng xâm lấn.
Khả năng gây u: Tế bào A375 có khả năng gây u cao, nghĩa là chúng có thể hình thành u. Tế bào A375 được báo cáo là tạo ra các khối u melanoma không có sắc tố (amelanotic) hung hãn ở chuột NIH Swiss được điều trị bằng huyết thanh chống thymocyte (một chất ức chế miễn dịch).
Được đặc trưng rõ ràng: A375 là dòng tế bào được đặc trưng di truyền rõ ràng. Nó có các đột biến di truyền đặc trưng như u hắc tố. Các đột biến của A375 bao gồm sự biến đổi gen BRAF của A375, khiến nó nhạy cảm với các chất ức chế BRAF cụ thể. Hồ sơ di truyền này khiến các tế bào A375 trở thành công cụ nghiên cứu ung thư tuyệt vời để nghiên cứu các con đường phân tử cơ bản và liệu pháp nhắm mục tiêu.

Hạn chế

Các hạn chế liên quan đến tế bào A375 là:

Hạn chế trong ống nghiệm: A375 là mô hình khối u trong ống nghiệm. Mặc dù nó mô phỏng các đặc điểm của u hắc tố, nó không thể hoàn toàn đại diện cho sự phức tạp của khối u u hắc tố. Do đó, cần thận trọng khi áp dụng kết quả trong ống nghiệm vào các nghiên cứu lâm sàng.

Mua ngay các tế bào A375 của bạn

430,00 €*

Nội dung: 1.5 milliliter

Giá chưa bao gồm VAT và phí vận chuyển

cryovial

Số sản phẩm: 300110

Ứng dụng nghiên cứu của dòng tế bào A375

Dòng tế bào A375 có nhiều ứng dụng nghiên cứu trong lĩnh vực ung thư. Dưới đây là một số lĩnh vực phổ biến mà dòng tế bào A375 được sử dụng.

Nghiên cứu ung thư: Tế bàoA375 có ứng dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư da. Các nhà nghiên cứu đã sử dụng các tế bào này để nghiên cứu sinh học ung thư da, các quá trình và cơ chế tín hiệu tế bào cơ bản, bao gồm sự phát triển, di chuyển và xâm lấn của tế bào. Điều này cũng có thể giúp các nhà nghiên cứu xác định các mục tiêu điều trị phân tử mới. Một nghiên cứu do Lin Zhu và các đồng nghiệp thực hiện vào năm 2019 đã sử dụng các tế bào melanoma A375 có độ ác tính cao và phát hiện vai trò của microRNA-3662 đối với sự phát triển và xâm lấn của các tế bào melanoma A375. Kết quả nghiên cứu cho thấy microRNA-3662 nhắm vào gen ZEB1 và điều chỉnh sự phát triển của tế bào melanoma trong ống nghiệm và trên mô hình khối u A375 [2]. Tương tự, nghiên cứu được thực hiện vào năm 2018 cho thấy các con đường PI3K/AKT và MAPK/ERK tham gia vào sự phát triển và di căn của dòng tế bào A375 [3].
Phát hiện và thử nghiệm thuốc: Dòng tế bàoA375 là mô hình khối u in vitro hữu ích để thử nghiệm và sàng lọc các tác nhân chống ung thư tiềm năng. Các nhà nghiên cứu đánh giá độc tính và hiệu quả của các thuốc hóa trị mới, hợp chất và các liệu pháp khác bằng cách sử dụng các tế bào melanoma A375. Ví dụ, một nghiên cứu đã khám phá các đặc tính chống ung thư của các vi và nano vesicle có nguồn gốc từ bưởi trên các tế bào ung thư melanoma A375 của người. Kết quả cho thấy các vi và nano vesicle gây ức chế chu kỳ tế bào và apoptosis, đồng thời ức chế biểu hiện gen liên quan đến sự phát triển, di chuyển và xâm lấn của tế bào [4].

Tế bào A375: Các công bố

Một số công bố nghiên cứu quan trọng sử dụng tế bào A375 được đề cập ở đây.

Vitamin D và các chất tương tự có hàm lượng canxi thấp điều chỉnh tính chất chống ung thư của cisplatin và dacarbazine trong dòng tế bào melanoma A375 của người

Nghiên cứu này được công bố trên Tạp chí Oncology vào năm 2019. Nghiên cứu đề xuất rằng việc điều trị kết hợp vitamin D và các dẫn xuất cải thiện hoạt tính chống ung thư của cisplatin và dacarbazine trong tế bào melanoma A375.

Đánh giá in vitro về tác dụng chống u hắc tố (dòng tế bào A375) của gel và chiết xuất lá toàn phần từ các loài lô hội được chọn lọc

Nghiên cứu này được công bố trên Tạp chí Y học Thảo dược vào năm 2022. Nghiên cứu này đã khám phá tác dụng chống u hắc tố của gel lô hội trong tế bào u hắc tố A375.

Thành viên 2 của gia đình Fermitin thúc đẩy sự tiến triển của melanoma bằng cách tăng cường sự gắn kết của p-α-Pix với Rac1 để kích hoạt con đường MAPK

Nghiên cứu trên tạp chí Oncogene (2021) đề xuất rằng thành viên gia đình Fermitin 2 (FERMT2 hoặc kindlin-2) thúc đẩy sự tiến triển của melanoma thông qua việc kích hoạt con đường MAPK bằng cách liên kết với p-α-Pix và Rac1.

FARP1 thúc đẩy sự phát triển của tế bào thông qua điều chỉnh con đường tín hiệu MAPK trong ung thư hắc tố da

Nghiên cứu trên tạp chí The American Journal of Dermatopathology (2019) đề xuất rằng FARP1 có thể thúc đẩy sự phát triển và tiến triển của ung thư hắc tố da. Do đó, nó có thể là một mục tiêu điều trị hữu ích.

Tiềm năng gây độc tế bào và gây chết tế bào của chiết xuất Phyllodium elegans trên các dòng tế bào ung thư người

Bài báo nghiên cứu này được công bố trên Bioengineered (2019). Nghiên cứu này đã khám phá hoạt tính độc tế bào và gây apoptosis của chiết xuất từ cây Phyllodium elegans trên các dòng tế bào ung thư người, bao gồm A375.

Nguồn tài liệu cho dòng tế bào A375: Quy trình, Video và Hơn thế nữa

Dưới đây là một số tài nguyên trực tuyến liên quan đến dòng tế bào A375.

Chuyển gen cho dòng tế bào A375: Video hướng dẫn này sẽ giúp bạn học cách chuyển gen cho dòng tế bào A375 từng bước.
Nuôi cấy tế bào: Videonày cung cấp thông tin hữu ích về quy trình nuôi cấy dòng tế bào.

Các quy trình nuôi cấy tế bào A375 được liệt kê tại đây.

Dòng tế bào A375: Liên kết này chứa thông tin hữu ích về nuôi cấy và bảo quản dòng tế bào A375, bao gồm môi trường nuôi cấy A375 và cách xử lý các mẫu tế bào A375 đông lạnh và đang phát triển.

Câu hỏi thường gặp (FAQ) về tế bào A375

Tài liệu tham khảo

Avram, S., et al., Tiêu chuẩn hóa mô hình u hắc tố người A375 trên màng chorioallantoic của phôi gà và chuột Balb/c nude. Tạp chí Báo cáo Ung thư, 2017. 38(1): tr. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 nhắm mục tiêu ZEB1 và làm giảm khả năng xâm lấn của dòng tế bào u hắc tố A375 có độ ác tính cao. Cancer Manag Res, 2019. 11: tr. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C ức chế sự phát triển và di căn của tế bào melanoma A375 thông qua ức chế các con đường PI3K/Akt và MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206: tr. 35-44.
Stanly, C., et al., Các vi và nano vesicle chiết xuất từ bưởi có các hồ sơ chuyển hóa và hoạt tính chống ung thư khác biệt trên dòng tế bào melanoma A375 của người. Cells, 2020. 9(12): tr. 2722.