Dòng tế bào A375 - Hướng dẫn nghiên cứu ung thư hắc tố

A375 là dòng tế bào ung thư hắc tố ở người được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu độc tính học và miễn dịch ung thư. Các nhà nghiên cứu sử dụng dòng tế bào này để nghiên cứu sinh học ung thư và các con đường truyền tín hiệu, thử nghiệm hoặc sàng lọc các chất chống ung thư tiềm năng, đồng thời phát triển các phương pháp điều trị mới và hiệu quả.

Nguồn gốc và đặc điểm chung của tế bào A375

Hiểu biết về nguồn gốc và đặc điểm chung của dòng tế bào có thể giúp bạn lên kế hoạch sử dụng chúng trong nghiên cứu. Phần này của bài viết sẽ đề cập đến nguồn gốc và các đặc điểm của dòng tế bào A375. Ví dụ, dòng tế bào A375 là gì? Các đặc điểm của dòng tế bào A375 là gì? Tế bào A375 có nguồn gốc từ đâu? Hình thái của tế bào u ác tính A375 như thế nào? Kích thước tế bào A375 là bao nhiêu?

• Dòng tế bào ung thư da A375 có nguồn gốc từ nuôi cấy mô ghép của một khối u rắn ở một phụ nữ 54 tuổi bị u ác tính [1].
• Tế bào A375 có hình thái giống biểu mô.
• Kích thước tế bào A375 tương đối nhỏ hơn so với các dòng tế bào khác. Chúng có đường kính khoảng 12 µm.
• Các tế bào u hắc tố A375 là tế bào hypotriploid. Số nhiễm sắc thể trung bình của dòng tế bào này là 62. Thông thường, mỗi tế bào có chín nhiễm sắc thể đánh dấu và một bản sao của các nhiễm sắc thể bình thường N2, N6 và N22.

Tế bào A375: Thông tin về nuôi cấy tế bào

Việc nuôi cấy tế bào A375 rất dễ dàng. Chúng không có bất kỳ yêu cầu nuôi cấy tế bào phức tạp nào. Phần này sẽ giúp bạn tìm hiểu các thông tin cần thiết về nuôi cấy tế bào. Chẳng hạn như thời gian nhân đôi của A375 là bao lâu. Môi trường nuôi cấy dòng tế bào A375 là gì? Mật độ gieo cấy của A375 là bao nhiêu? Tế bào u ác tính A375 có bám dính không?

Những điểm chính trong nuôi cấy tế bào A375

Thời gian nhân đôi quần thể:

Thời gian nhân đôi của A375 là 20 giờ.

Bám dính hay lơ lửng:

A375 là dòng tế bào u ác tính ở người bám dính.

Mật độ gieo tế bào:

Mật độ tế bào 1 x 10⁴ tế ^bào/cm² là lý tưởng cho nuôi cấy tế bào A375. Các tế bào bám dính được rửa bằng dung dịch muối đệm phosphate (PBS) 1x và ủ với dung dịch chuyển dòng (Accutase). Sau đó, các tế bào được thêm vào môi trường nuôi cấy và ly tâm. Các tế bào thu hoạch được tái huyền phù trong môi trường nuôi cấy và phân phối vào các bình mới để phát triển.

Môi trường nuôi cấy:

DMEM được khuyến nghị là môi trường nuôi cấy A375 lý tưởng khi được bổ sung 10% huyết thanh bò thai (FBS), 4,5 g/L Glucose, 1,5 g/L NaHCO3, 4 mM L-Glutamine và 1,0 mM Sodium pyruvate. Môi trường nuôi cấy A375 nên được thay mới 2-3 ngày mỗi tuần.

Điều kiện nuôi cấy:

Tế bào u hắc tố A375 được nuôi cấy trong tủ ấm có độ ẩm (37°C) với nồng độ CO₂ 5%.

Bảo quản:

Tế bào A375 đông lạnh nên được bảo quản ở nhiệt độ dưới -150°C trong pha hơi của nitơ lỏng hoặc tủ đông điện.

Quy trình đông lạnh và môi trường:

Môi trường CM-1 hoặc CM-ACF được sử dụng để đông lạnh dòng tế bào A375. Quá trình đông lạnh chậm, cho phép nhiệt độ giảm dần 1°C, được lựa chọn để bảo vệ khả năng sống của tế bào.

Quy trình rã đông:

Lọ tế bào u ác tính A375 đông lạnh được khuấy nhanh trong bể nước trong 40 đến 60 giây cho đến khi chỉ còn lại một cục băng nhỏ. Tế bào được thêm vào môi trường mới và ly tâm để loại bỏ các thành phần môi trường đông lạnh. Cục tế bào thu được được tái huyền phù và đổ vào các bình mới.

Mức độ an toàn sinh học:

Các nuôi cấy A375 được xử lý và duy trì trong môi trường phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1.

Các ứng dụng nghiên cứu của dòng tế bào A375

Dòng tế bào A375 có nhiều ứng dụng nghiên cứu trong lĩnh vực nghiên cứu ung thư. Dưới đây là một số lĩnh vực phổ biến mà tế bào A375 được sử dụng.

• Nghiên cứu ung thư: Tế bào A375 có ứng dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư hắc tố. Các nhà nghiên cứu đã sử dụng các tế bào này để nghiên cứu sinh học ung thư da, các quá trình và cơ chế truyền tín hiệu tế bào cơ bản, bao gồm sự tăng sinh, di chuyển và xâm lấn của tế bào. Điều này cũng có thể giúp các nhà nghiên cứu xác định các mục tiêu điều trị phân tử mới. Một nghiên cứu do Lin Zhu và các đồng nghiệp thực hiện vào năm 2019 đã sử dụng các tế bào u hắc tố A375 có tính xâm lấn cao và phát hiện vai trò của microRNA-3662 đối với sự phát triển và xâm lấn của các tế bào u hắc tố A375. Kết quả nghiên cứu cho thấy microRNA-3662 nhắm vào gen ZEB1 và điều chỉnh sự phát triển của tế bào u hắc tố trong ống nghiệm và trên mô hình khối u A375 [2]. Tương tự, nghiên cứu được thực hiện vào năm 2018 đã phát hiện ra rằng các con đường PI3K/AKT và MAPK/ERK có liên quan đến sự tăng sinh và di căn của dòng tế bào A375 [3].
• Phát hiện và thử nghiệm thuốc: Dòng tế bào A375 là một mô hình khối u in vitro hữu ích để thử nghiệm và sàng lọc các chất chống ung thư tiềm năng. Các nhà nghiên cứu đánh giá độc tính và hiệu quả của các loại thuốc hóa trị mới, các hợp chất và các liệu pháp khác bằng cách sử dụng các tế bào u ác tính A375 này. Ví dụ, một nghiên cứu đã khám phá các đặc tính chống ung thư của các vi và nano túi nhỏ chiết xuất từ bưởi trên các tế bào ung thư ác tính A375 ở người. Kết quả cho thấy các vi và nano túi nhỏ gây ra sự ngừng chu kỳ tế bào và quá trình chết tế bào theo chương trình, đồng thời cản trở sự biểu hiện gen trong sự tăng sinh, di chuyển và xâm lấn của tế bào [4].

Tế bào A375: Các công bố

Một số công bố nghiên cứu quan trọng liên quan đến tế bào A375 được đề cập ở đây.

Vitamin D và các chất tương tự có hàm lượng canxi thấp điều chỉnh các đặc tính chống ung thư của cisplatin và dacarbazine trong dòng tế bào ung thư hắc tố A375 ở người

Nghiên cứu này được công bố trên Tạp chí Ung thư học vào năm 2019. Nghiên cứu đề xuất rằng việc điều trị kết hợp với vitamin D và các chất tương tự giúp cải thiện hoạt tính chống ung thư của cisplatin và dacarbazine trong các tế bào ung thư hắc tố A375.

Đánh giá in vitro về tác dụng chống ung thư hắc tố (dòng tế bào A375) của gel và chiết xuất toàn lá từ các loài lô hội được chọn lọc

Nghiên cứu này được công bố trên Tạp chí Y học Thảo dược vào năm 2022. Nghiên cứu này đã khám phá tác dụng chống ung thư hắc tố của gel lô hội trên các tế bào ung thư hắc tố A375.

Thành viên thứ 2 của họ Fermitin thúc đẩy sự tiến triển của u ác tính bằng cách tăng cường sự liên kết của p-α-Pix với Rac1 để kích hoạt con đường MAPK

Nghiên cứu này trên tạp chí Oncogene (2021) đề xuất rằng thành viên thứ 2 của gia đình Fermitin (FERMT2 hoặc kindlin-2) thúc đẩy sự tiến triển của ung thư hắc tố thông qua việc kích hoạt MAPK bằng cách liên kết với p-α-Pix và Rac1.

FARP1 thúc đẩy sự tăng sinh tế bào thông qua việc điều chỉnh con đường tín hiệu MAPK trong ung thư hắc tố da

Nghiên cứu này trên tạp chí The American Journal of Dermatopathology (2019) đề xuất rằng FARP1 có thể thúc đẩy sự phát triển và tiến triển của ung thư hắc tố da. Do đó, nó có thể là một mục tiêu điều trị hữu ích.

Tiềm năng gây độc tế bào và gây chết tế bào của chiết xuất Phyllodium elegans trên các dòng tế bào ung thư ở người

Bài báo nghiên cứu này được công bố trên tạp chí Bioengineered (2019). Nghiên cứu này đã khám phá hoạt tính gây độc tế bào và gây chết tế bào của chiết xuất từ cây Phyllodium elegans trên các dòng tế bào ung thư ở người, bao gồm A375.

Tài nguyên về dòng tế bào A375: Quy trình, video và hơn thế nữa

Dưới đây là một số tài nguyên trực tuyến về tế bào A375.

• Truyền gen vào tế bào A375: Video hướng dẫn này sẽ giúp bạn học cách truyền gen vào tế bào A375 từng bước một.
• Nuôi cấy tế bào: Video này cung cấp thông tin rất hữu ích về việc nuôi cấy dòng tế bào.

Các quy trình nuôi cấy tế bào cho dòng tế bào A375 được liệt kê tại đây.

• Dòng tế bào A375: Liên kết này chứa thông tin hữu ích về nuôi cấy và duy trì dòng tế bào A375, bao gồm môi trường nuôi cấy A375 và cách xử lý các mẫu tế bào A375 đông lạnh và đang phân chia.

Tài liệu tham khảo

1. Avram, S., et al., Tiêu chuẩn hóa các mô hình u ác tính ở người A375 trên màng chorioallantoic phôi gà và chuột Balb/c nude. Oncol Rep, 2017. 38(1): tr. 89-99.
2. Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 nhắm vào ZEB1 và làm suy yếu sự xâm lấn của dòng tế bào u ác tính A375 có tính xâm lấn cao. Cancer Manag Res, 2019. 11: tr. 5845-5856.
3. Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C ức chế sự tăng sinh và di căn của tế bào u hắc tố A375 thông qua việc ức chế các con đường PI3K/Akt và MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206: tr. 35-44.
4. Stanly, C., et al., Các vi và nano túi nhỏ chiết xuất từ bưởi cho thấy các đặc điểm chuyển hóa và hoạt tính chống ung thư khác biệt trong dòng tế bào ung thư hắc tố A375 ở người. Cells, 2020. 9(12): tr. 2722.