Ngày xuất bản: 2023 | Ngày cập nhật lần cuối: Tháng 5 năm 2026
Hiểu về "số lần truyền"
Khái niệm "số lần cấy" là trọng tâm của nuôi cấy tế bào và đề cập đến số lần một dòng tế bào đã được cấy lại hoặc chuyển sang môi trường nuôi cấy mới sau khi được phục hồi ban đầu từ quá trình đông lạnh bảo quản hoặc nhận từ ngân hàng tế bào tham chiếu. Chỉ số này đóng vai trò quan trọng trong việc theo dõi nguồn gốc và lịch sử của một dòng tế bào.
Tổng quan về quy trình
- Trong thực hành nuôi cấy tế bào thông thường, khi tế bào đạt đến mật độ nhất định, chúng sẽ được chuyển sang môi trường mới để duy trì sự phát triển và ngăn ngừa sự phát triển quá mức. Mỗi lần chuyển như vậy được ghi lại là một lần nhân giống.
- Theo truyền thống, khi chúng ta nhận được một dòng tế bào, ví dụ như ở lần truyền thứ 60 từ người gửi, chúng ta sẽ tiếp tục từ số lần truyền này, tăng dần với mỗi lần nuôi cấy lại. Thực hành này, mặc dù duy trì được dòng lịch sử, thường dẫn đến số lần truyền cao ngay từ đầu. Do việc sử dụng rộng rãi và thường kéo dài hàng thập kỷ của một số dòng tế bào, chẳng hạn như dòng HeLa được thiết lập vào năm 1951, việc xác định tổng số lần nhân giống kể từ khi dòng tế bào được thiết lập là không khả thi.
- Để nâng cao tính rõ ràng và chất lượng trong quy trình nuôi cấy tế bào của chúng tôi, chúng tôi đã sửa đổi phương pháp này vào đầu năm 2023. Giờ đây, khi chúng tôi bắt đầu nuôi cấy từ một lọ mới, bất kể số lần nhân giống từ người gửi là bao nhiêu, chúng tôi sẽ đặt lại và bắt đầu đếm lại từ lần nhân giống thứ nhất cho mỗi lô sản xuất.
Lý do
Việc nhân giống là một quy trình quan trọng để đảm bảo sức khỏe và tính hữu dụng của các nuôi cấy tế bào cho nghiên cứu. Khi tế bào phát triển quá mức, chúng sẽ gặp phải hiện tượng ức chế tiếp xúc, làm giảm tốc độ sinh sôi, điều này có thể ảnh hưởng tiêu cực đến kết quả thí nghiệm. Để giảm thiểu những vấn đề này, Cytion thực hiện các biện pháp kiểm soát nghiêm ngặt đối với mật độ tế bào tại thời điểm tiến hành nuôi cấy lại, từ đó duy trì số lần truyền thấp trong quá trình sản xuất các dòng tế bào của họ. Biện pháp phòng ngừa này giúp ngăn chặn các tác động bất lợi của việc truyền tế bào quá mức, chẳng hạn như dị thường về hình thái, thay đổi tốc độ tăng trưởng và trôi dạt gen, có thể khiến các tế bào khác biệt đáng kể so với trạng thái ban đầu. Việc nuôi cấy lại trong thời gian dài cũng có thể làm tăng nguy cơ nhiễm vi sinh vật.
Lời hứa của chúng tôi
Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào được cung cấp cho các nhà nghiên cứu gần với cấu trúc di truyền và đặc điểm hình thái ban đầu nhất có thể, từ đó nâng cao độ tin cậy của dữ liệu thí nghiệm. Hơn nữa, bằng cách ghi chép cẩn thận từng lần nhân giống, Cytion góp phần vào tính truy xuất nguồn gốc và khả năng tái hiện của nghiên cứu, một cam kết phản ánh các tiêu chuẩn cao trong thực hành nuôi cấy tế bào. Các nhà nghiên cứu được khuyến khích lưu giữ hồ sơ chính xác về số lần nhân giống, cả trên các bình nuôi cấy và trong sổ ghi chép phòng thí nghiệm, để làm tài liệu tham khảo về tình trạng và lịch sử của các dòng tế bào nuôi cấy.
Mẹo và những sai lầm thường gặp
Việc tuân thủ đúng quy trình là điều cần thiết, nhưng hiểu rõ những sai lầm thường gặp cũng quan trọng không kém. Các quy trình nuôi cấy tế bào rất nhạy cảm với những sai lệch nhỏ về kỹ thuật, thời gian và chất lượng thuốc thử. Những lời khuyên sau đây phản ánh các phương pháp thực hành tốt nhất được đội ngũ khoa học của Cytion khuyến nghị dựa trên kinh nghiệm nuôi cấy tế bào phong phú.
- Luôn làm ấm thuốc thử đến 37°C trước khi sử dụng để giảm thiểu sốc nhiệt cho tế bào.
- Làm việc nhanh chóng nhưng cẩn thận — giảm thiểu thời gian tế bào ở ngoài tủ ấm.
- Sử dụng các chất phản ứng đã được chứng nhận và kiểm tra mycoplasma để tránh nhiễm bẩn có thể ảnh hưởng đến kết quả thí nghiệm.
- Ghi chép từng bước, bao gồm số lần nhân giống, ngày tháng và quan sát hình thái tế bào.
- Xác nhận quy trình của bạn bằng một thí nghiệm thử nghiệm nhỏ trước khi mở rộng quy mô để tránh lãng phí các chất phản ứng đắt tiền.
Các chất phản ứng Cytion được khuyến nghị
Cytion cung cấp một loạt các chất phản ứng nuôi cấy tế bào đã được xác nhận, được thiết kế đặc biệt để hỗ trợ quy trình này. Tất cả các chất phản ứng đều được kiểm tra hiệu suất với các dòng tế bào thường được sử dụng và có sẵn tài liệu đầy đủ. Truy cập cytion.com/Media-Reagents để xem danh mục sản phẩm đầy đủ.