tế bào 4T1 - Những thông tin quan trọng về nghiên cứu và ứng dụng tế bào ung thư vú
4T1 là dòng tế bào ung thư vú có thể cấy ghép ở chuột. Nó được sử dụng rộng rãi như một mô hình khối u in vitro đồng nhất về mặt di truyền để nghiên cứu ung thư vú ở người. Tế bào 4T1 có tính xâm lấn và tạo khối u cao; chúng có xu hướng di căn từ vị trí khối u nguyên phát ở tuyến vú đến các vị trí khác, bao gồm gan, hạch bạch huyết, phổi, xương và não, do đó là mô hình lý tưởng để nghiên cứu di căn ung thư vú [1].
Đặc điểm chung và nguồn gốc của tế bào 4T1
Kiến thức về nguồn gốc và đặc điểm chung của một dòng tế bào là điều cần thiết trước khi làm việc với nó. Trong phần này, chúng tôi đã đề cập đến những thông tin cơ bản về tế bào ung thư vú 4T1. Ví dụ: Tế bào 4T1 là gì? Đặc điểm của dòng tế bào 4T1 là gì? Nguồn gốc của dòng tế bào 4T1 là gì? Hình thái của dòng tế bào 4T1 là gì?
- 4T1 là dòng tế bào ung thư vú có nguồn gốc từ khối u vú phát triển tự nhiên ở chuột BALB/c. Các tế bào này có khả năng xâm lấn và gây ung thư cao, mô phỏng chặt chẽ hành vi của ung thư vú ở người về mặt tăng trưởng và lan rộng di căn. Cụ thể, mô hình khối u 4T1 nghiên cứu ung thư vú ba âm tính (TNBC).
- tế bào 4T1 là tế bào bám dính và có hình thái tương tự tế bào biểu mô.
dòng tế bào 4T1 so với EMT-6
4T1 và EMT-6 là các mô hình tế bào chuột không gây miễn dịch cho nghiên cứu ung thư vú ba âm tính. Ở đây, 4T1 là các tế bào ung thư xâm lấn và hung hãn hơn so với EMT-6, có tính xâm lấn thấp hơn [2].
4T1 so với tế bào 4T07
4T07 cũng là một dòng tế bào ung thư chuột. Sự khác biệt chính giữa tế bào 4T1 và 4T07 là: tế bào 4T1 có thể rời khỏi vị trí khối u nguyên phát và lan rộng để hình thành các khối u di căn thứ phát có thể quan sát được, trong khi tế bào 4T07 không thể hình thành các khối u di căn có thể quan sát được mặc dù đã rời khỏi vị trí khối u nguyên phát [3].
Thông tin về nuôi cấy dòng tế bào 4T1
dòng tế bào ung thư vú 4T1 cung cấp nhiều ứng dụng nghiên cứu trong lĩnh vực y sinh học. Để nuôi cấy các tế bào này, bạn cần lưu ý các điểm chính sau: Thời gian nhân đôi của 4T1 là gì? Cách nuôi cấy tế bào 4T1 như thế nào? Mật độ gieo tế bào 4T1 là bao nhiêu?
Các điểm chính trong việc nuôi cấy tế bào 4T1
|
Thời gian nhân đôi: |
Thời gian nhân đôi trung bình được báo cáo cho tế bào ung thư vú 4T1 là 14 giờ. |
|
Dính bám hay treo lơ lửng: |
4T1 là dòng tế bào bám dính. |
|
Tỷ lệ chia tách: |
Tỷ lệ chia tách 1:6 và 1:8 được khuyến nghị cho dòng tế bào ung thư vú 3 âm tính 4T1. Để chia tách, tế bào được rửa bằng PBS và ủ với enzyme Accutase trong 8 đến 10 phút. Tế bào tách rời được thu thập qua ly tâm và tái phân tán trong môi trường tươi. Tế bào tái phân tán được phân phối vào bình mới để phát triển. |
|
Dung dịch nuôi cấy: |
Dung dịch RPMI 1640 được sử dụng để nuôi cấy tế bào 4T1. 10% huyết thanh bò non (FBS), 2,0 g/L NaHCO₃ và 2,1 mM glutamine ổn định được thêm vào dung dịch nuôi cấy để đạt điều kiện phát triển tối ưu cho tế bào. |
|
Điều kiện nuôi cấy: |
tế bào ung thư 4T1 được bảo quản trong tủ ấm có độ ẩm 37°C với nồng độCO2 5%. |
|
Bảo quản: |
tế bào 4T1 nên được bảo quản ở nhiệt độ dưới -150°C, tức là trong tủ đông điện hoặc pha hơi của nitơ lỏng, để duy trì sự sống của tế bào. |
|
Quy trình đông lạnh và môi trường: |
CM-1 hoặc CM-ACF được khuyến nghị cho dòng tế bào 4T1. Phương pháp đông lạnh chậm được ưu tiên vì nó bảo vệ khả năng sống sót của tế bào bằng cách cho phép nhiệt độ giảm dần 1°C. |
|
Quá trình rã đông: |
Ống chứa tế bào đông lạnh được đặt trong bể nước 37°C trong vài giây cho đến khi tế bào tan đông và chỉ còn một khối băng nhỏ. Các tế bào này được tái phân tán trong môi trường tươi và đổ vào bình nuôi cấy. Sau 24 giờ ủ, môi trường được thay thế để loại bỏ các thành phần của môi trường đông lạnh. |
|
Mức độ an toàn sinh học: |
Phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1 được khuyến nghị cho việc nuôi cấy tế bào ung thư vú 4T1. |
dòng tế bào 4T1: Ưu điểm và nhược điểm
Phần này của bài viết sẽ trình bày các ưu điểm và nhược điểm liên quan đến mô hình di căn 4T1.
Ưu điểm
Các ưu điểm chính của dòng tế bào 4T1 là:
- Khả năng gây ung thư
4T1 là dòng tế bào có khả năng gây ung thư cao. Các tế bào này có khả năng hình thành mô hình chuột đồng loại 4T1 cho nghiên cứu ung thư vú khi được tiêm vào chuột. Do đó, mô hình 4T1 được sử dụng lý tưởng để nghiên cứu sự phát triển, tăng trưởng và di căn của khối u. Ngoài ra, nó còn hữu ích cho việc sàng lọc và đánh giá các thuốc điều trị.
- Mô hình di căn in vitro
mô hình 4T1 có xu hướng di căn tự nhiên, cho phép các nhà nghiên cứu hiệu quả điều tra các cơ chế và con đường liên quan đến quá trình di căn. Hơn nữa, tế bào 4T1 kháng 6-thioguanine. Điều này giúp phát hiện hiệu quả các tế bào di căn vi thể với độ chính xác cao hơn so với các mô hình khác, vì nó loại bỏ nhu cầu cân các cơ quan mục tiêu và đếm các khối u.
Nhược điểm
Nhược điểm liên quan đến dòng tế bào 4T1 là:
- Tính hung hãn/tốc độ tăng trưởng nhanh
dòng tế bào 4T1 là một dòng tế bào ung thư vú ba âm tính có tính hung hãn cao. Do tốc độ tăng trưởng nhanh, việc sử dụng dòng tế bào này trong các thí nghiệm dài hạn và kiểm soát các biến số thí nghiệm trở nên khó khăn.
Mua dòng tế bào 4T1: Mô hình ung thư vú chất lượng cao
dòng tế bào 4T1: Ứng dụng trong nghiên cứu ung thư
Dòng tế bào 4T1 từ mô hình chuột là công cụ nghiên cứu quý giá để nghiên cứu sinh học ung thư và đánh giá các phương pháp điều trị mới. Các ứng dụng chính của tế bào 4T1 được liệt kê dưới đây:
Sinh học ung thư
Dòng tế bào 4T1 được sử dụng rộng rãi để nghiên cứu sự phát triển và tăng trưởng của ung thư. Đây là mô hình in vitro lý tưởng để điều tra và khám phá các cơ chế tế bào và phân tử liên quan đến tiến triển khối u và di căn. Ngoài ra, nó có thể làm sáng tỏ vai trò của các con đường tín hiệu tế bào, môi trường vi mô và biểu hiện gen trong các quá trình này. Nghiên cứu được thực hiện vào năm 2019 đã sử dụng tế bào 4T1 để khám phá các cơ chế chính thúc đẩy sự xâm lấn và di chuyển của tế bào ung thư. Kết quả cho thấy các gen STAT3, MMP2 và MMP9 có liên quan, và ức chế các gen này có thể làm giảm đáng kể sự di chuyển và xâm lấn của tế bào ung thư [4]. Các nghiên cứu tương tự cũng chỉ ra nhiều con đường tín hiệu khác liên quan đến sự phát triển và di căn của khối u.
Hơn nữa, mô hình 4T1 đóng vai trò quan trọng trong việc hiểu rõ môi trường vi mô của ung thư vú, bao gồm sự xâm nhập của tế bào miễn dịch và sự phát triển của khối u nguyên phát. Các nghiên cứu tập trung vào môi trường vi mô của khối u 4T1 đã cung cấp những hiểu biết sâu sắc về vai trò của các tế bào miễn dịch và cytokine, chẳng hạn như biểu hiện của CXCL13, trong quá trình tiến triển của khối u. Mô hình này cũng hỗ trợ trong việc nghiên cứu các ngách di căn và di căn khối u, đặc biệt là trong ung thư vú giai đoạn cuối, nơi sự xâm lấn của ung thư vú là phổ biến.
Nghiên cứu điều trị ung thư
Dòng tế bào 4T1 được ứng dụng rộng rãi trong nghiên cứu điều trị ung thư để sàng lọc và đánh giá các phương pháp điều trị mới. Một nghiên cứu đã khám phá tiềm năng độc tế bào của các hạt nano sắt được tổng hợp từ chiết xuất hương thảo (Rosemary-FeNPs) và chiết xuất hương thảo tinh khiết trên dòng tế bào 4T1. Kết quả nghiên cứu đề xuất Rosemary-FeNPs có tiềm năng hứa hẹn hơn so với chiết xuất tinh khiết [5]. Tương tự, một nghiên cứu năm 2021 đã đánh giá tiềm năng chống ung thư của chiết xuất gừng trên tế bào ung thư vú 4T1 và mô hình chuột 4T1 [6].
Ngoài các chiết xuất tự nhiên, dòng tế bào 4T1 được sử dụng để đánh giá hiệu quả của các tác nhân hóa trị truyền thống. Ví dụ, nghiên cứu kết hợp cisplatin với các liệu pháp khác đã cho thấy tăng cường sự chết của tế bào ung thư và giảm tiến triển khối u trong mô hình 4T1. Việc đưa luciferase đom đóm vào tế bào 4T1 đã cho phép quan sát hình ảnh thời gian thực về sự phát triển khối u và biểu hiện di căn, giúp đánh giá tác động của các phương pháp điều trị dễ dàng hơn.
Hơn nữa, khả năng kháng 6-thioguanine của dòng tế bào 4T1 đã hỗ trợ các nghiên cứu về tế bào di căn vi thể, cải thiện việc phát hiện và phân tích di căn. Dòng tế bào này cũng đóng vai trò quan trọng trong nghiên cứu miễn dịch chống ung thư và tác động của liệu pháp miễn dịch, đặc biệt trong bối cảnh mô hình chuột orthotopic, nơi các nhà nghiên cứu có thể mô phỏng chính xác các khối u ở người.
Tổng thể, dòng tế bào 4T1 vẫn là công cụ không thể thiếu trong nghiên cứu ung thư, từ việc hiểu các cơ chế cơ bản của sinh học ung thư đến phát triển và thử nghiệm các chiến lược điều trị mới.
tế bào 4T1: Các công bố nghiên cứu
Phần này của bài viết sẽ giới thiệu một số công bố nghiên cứu thú vị và được trích dẫn nhiều nhất về tế bào 4T1.
Bài báo này được công bố vào năm 2018 trên Tạp chí Photochemistry and Photobiology. Nghiên cứu đề xuất rằng các hạt nano bạc được tổng hợp từ Madhuca longifolia có tác dụng chống tăng sinh trong các tế bào ung thư 4T1 thông qua quá trình phân hủy màng tế bào và sinh ROS.
Tác dụng độc tế bào và gây apoptosis của verbascoside trên dòng tế bào ung thư vú 4T1
Nghiên cứu này trên Tạp chí BMC Pharmacology and Toxicology (2021) đề xuất rằng verbascoside, một hợp chất tự nhiên, gây ra tác dụng apoptosis trong các tế bào ung thư vú 4T1 thông qua tín hiệu TLR4.
Nghiên cứu này được công bố trên tạp chí Integrative Cancer Therapies vào năm 2020. Nghiên cứu sử dụng tế bào 4T1 để phát triển mô hình chuột đồng loại 4T1 và khám phá tiềm năng chống ung thư của Eupatorin thông qua mô hình này. Eupatorin làm chậm sự phát triển khối u trong mô hình chuột 4T1.
Nghiên cứu này được công bố trên Tạp chí Nghiên cứu Dược phẩm Iran (2018) đề xuất rằng cây thuốc Viola odorata có tiềm năng tác dụng độc tế bào đối với tế bào 4T1.
Nghiên cứu này đề xuất rằng các hạt nano lipid rắn chứa docetaxel (DTX-loaded SLNs) có thể là một tác nhân hứa hẹn trong điều trị ung thư vú và ngăn chặn di căn, vì chúng ức chế sự phát triển của khối u và di căn phổi của các tế bào 4T1.
Nguồn tài liệu về dòng tế bào 4T1: Quy trình, Video và Hơn thế nữa
Dưới đây là một số tài nguyên về tế bào 4T1:
- hướng dẫn chuyển gen cho dòng tế bào 4T1: Video này là hướng dẫn từng bước để thực hiện quá trình chuyển gen cho dòng tế bào 4T1.
- Thu hoạch tế bào: Video này giải thích quy trình thu hoạch tế bào cho các dòng tế bào bám dính.
Liên kết sau đây chứa quy trình nuôi cấy tế bào cho dòng tế bào 4T1:
- dòng tế bào 4T1: Liên kết trang webnày chứa tất cả thông tin hữu ích về việc xử lý các văn hóa 4T1. Nó bao gồm thông tin về môi trường nuôi cấy, quy trình xử lý cho các văn hóa đông lạnh và các văn hóa đang phát triển.
Câu hỏi thường gặp về dòng tế bào 4T1
Tài liệu tham khảo
- Pulaski, B.A. và S. Ostrand-Rosenberg, Mô hình u vú 4T1 ở chuột. Curr Protoc Immunol, 2001. Chương 20: Trang 20.2.
- Maxwell, K.G., Điều hòa miễn dịch của tế bào ung thư vú cho tiêm chủng toàn khối u. 2016.
- Walker, I., et al., Uống vú gây ra biểu hiện cytokine pro-viêm trung ương, nhưng không gây ra rối loạn hành vi ở chuột Balb/C. Scientific Reports, 2017. 7(1): tr. 1-13.
- Li, Y., et al., Ức chế con đường tín hiệu Stat3 bằng sản phẩm tự nhiên pectolinarigenin làm giảm di căn ung thư vú. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: tr. 1195.
- Farshchi, H.K., et al., Tổng hợp xanh các hạt nano sắt bằng chiết xuất hương thảo và đánh giá tác dụng độc tế bào trên các dòng tế bào ung thư. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 2018. 16: tr. 54-62.
- Gholizadeh, A.P., et al., Tác động của chiết xuất gừng đối với dòng tế bào ung thư vú 4T1 trên chuột Balb/c. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): tr. 43-49.