BEWO-cellelinjen

BeWo er en cellelinje avledet fra humant koriokarsinom som er mye brukt i biomedisinsk forskning. Den fungerer som en verdifull in vitro-modell for å utforske den kompliserte prosessen med utvikling av placenta og syncytialisering av humane trofoblaster. Forskere bruker også disse cellene til å studere trofoblastcellenes atferd, hormonproduksjon og transport av stoffer gjennom morkaken. BeWo-celler kan også brukes i studier av toksikologi, infeksjoner og sykdomsoverføring.

Denne artikkelen inneholder grunnleggende kunnskap om BeWo-celler som kan hjelpe deg med å håndtere dem i forskningen din. Den vil inkludere:

Generelle egenskaper og opprinnelse til BeWo-celler
BeWo-cellelinjen: Informasjon om dyrking
Fordeler og ulemper med BeWo-cellelinjen
Forskningsmessige anvendelser av BeWo-celler
Forskningspublikasjoner med BeWo-celler
Ressurser for BeWo cellelinje: Protokoller, videoer og mer

1. Generelle egenskaper og opprinnelse til BeWo-celler

Forhåndskunnskap om en cellelinjes opprinnelse og generelle egenskaper er avgjørende for at den skal kunne brukes i forskningen din. Denne delen av artikkelen tar for seg BeWo-cellelinjens opprinnelse, karakteristiske trekk og mye mer. Her får du vite mer: Hva er BeWo choriocarcinoma-cellelinjen? Hva er BeWo syncytialisering? Hvor kommer BeWo-cellene fra? Hva er BeWo-cellenes morfologi? Hva er ploidien til BeWo?

BeWo-cellelinjen stammer fra et malignt svangerskapskoriokarsinom i en mannlig føtal placenta i 1968 [1]. Den er derfor en uvurderlig modell for forskning på placenta.
BeWo-celler har en epitel-lignende morfologi.
BeWo-cellene er relativt små, mellom 20 og 30 µM [2].
BeWo-celler har en stabil karyotype. Stamlinjetallet deres er hypotetraploid. Det normale kromosomantallet i BeWo-celler er 86. Det kan variere fra 71 til 178.
BeWo-celler produserer flere hormoner, f.eks. humant korion somatomammotropin, humant koriongonadotropin (hCG) og steroidhormoner.
BeWo-celler uttrykker molekylære markører, inkludert CK 7, E-kadherin og VE-kadherin.

B30-underlinje

B30 er en sublinje av BeWo-celler. Den brukes til å undersøke opptak og transport av næringsstoffer. Dette skyldes deres kraftige vekst på porøse membraner.

BeWo og JEG-3

BeWo JEG-3-cellelinjene er avledet fra koriokarsinomer og brukes i forskning på placenta. BeWo-celler produserer hormoner i lavere nivåer enn JEG-3, for eksempel humant koriongonadotropin (hCG) og østradiol.

Time-lapse-visualisering av menneskelig eggfruktbarhet, som illustrerer stadiene i blastocystdannelsen, observert under mikroskop.

2. BeWo cellelinje: Informasjon om dyrking

Det kan være vanskelig å vedlikeholde en cellekultur hvis du ikke kjenner til viktige detaljer. For eksempel Hva er fordoblingstiden for BeWo? Hva er BeWo-cellemedia? Hvordan dyrker du BeWo-cellelinjen, og hvordan fryser du BeWo-celler?

Nøkkelpunkter for dyrking av BeWo-celler

Fordoblingstid:	Populasjonsdoblingstiden for BeWo-celler er ca. 30 timer.
Adherent eller i suspensjon:	BeWo er en adherent cellelinje.
Tetthet ved såing av celler:	Den anbefalte såingstettheten for BeWo-celler er 1 x¹⁰⁴ ^celler/cm2. Ved såing fjernes gammelt medium fra cellene, og cellene skylles med 1 x PBS. Deretter tilsettes Accutase (passeringsløsning), og cellene inkuberes i 8 til 10 minutter ved omgivelsestemperatur. Deretter tilsettes de løsrevne cellene med dyrkingsmedium og sentrifugeres. De høstede cellene resuspenderes deretter og helles over i en ny kolbe.
Vekstmedium:	Ham's F12K-medium som inneholder 10 % FBS, 2,0 mM L-glutamin, 2,0 mM natriumpyruvat og 2,5 g/L NaHCO3, brukes til å dyrke BeWo-celler. BeWo-cellemediet bør skiftes ut to til tre ganger i uken.
Vekstbetingelser:	BeWo-celler holdes i en befuktet inkubator med en temperatur på 37 grader Celcius og 5 % CO2-tilførsel.
Oppbevaring:	Frosne BeWo-celler oppbevares ved under -150 °C i en elektrisk fryser med ultralave temperaturer eller i dampfasen av flytende nitrogen.
Fryseprosess og medium:	BeWo-celler anbefales å fryses i CM-1- eller CM-ACF-frysemedium. Cellene fryses ved hjelp av en langsom frysemetode. Denne metoden tillater bare en temperaturstigning på 1 grad i minuttet, noe som forhindrer at cellene utsettes for sjokk og beskytter cellenes levedyktighet.
Tineprosess:	Frosne celler tines ved å senke dem ned i et forhåndsinnstilt vannbad på 37 °C i 40 til 60 sekunder til det er igjen en liten isklump. Deretter tilsettes nytt vekstmedium, og cellene sentrifugeres for å fjerne komponentene i frysemediet. Den oppsamlede cellepelleten resuspenderes og fordeles i en dyrkningskolbe for vekst.
Biosikkerhetsnivå:	Et laboratorium på biosikkerhetsnivå 1 er nødvendig for å håndtere og vedlikeholde BeWo-cellekulturer.

Epitelial, polygonal morfologi og holmlignende vekst hos den humane choriokarsinomcellelinjen BEWO, med 10 og 20 gangers forstørrelse under mikroskopet.

3. Fordeler og ulemper med BeWo-cellelinjen

BeWo-celler har unike egenskaper og kommer med spesifikke fordeler og ulemper. I dette avsnittet skal vi se nærmere på noen av de mest bemerkelsesverdige.

Fordeler og ulemper

De viktigste fordelene med BeWo choriocarcinom-cellelinjen er

In vitro placentacellemodell
BeWo-celler er en in vitro-modell for å studere trofoblastcellers atferd og syncytialisering av morkaken, prosesser som er vanskelige å observere in vivo.
Hormonproduksjon
BeWo-celler utskiller hormoner, som hCG og placentalt laktogen, noe som gjør dem verdifulle for studier av hormonell regulering og forskning innen reproduksjonsbiologi.

Ulemper

Ulempene med BeWo trofoblastceller er

Kreftcellelinje
BeWo-celler ble avledet fra koriokarsinom, som er en svulst i morkaken. Dette opphavet representerer kanskje ikke fullt ut den normale funksjonen til placentaceller.

4. Forskningsmessige anvendelser av BeWo-celler

BeWo-cellelinjen brukes i stor utstrekning i placentaforskning. Her nevnes noen spesifikke bruksområder for denne cellelinjen:

Morkake- og svangerskapsrelatert forskning: BeWo-celler er sentrale i forskning på placenta og svangerskapsrelatert forskning. Forskere bruker for eksempel disse cellene til å studere transport av stoffer, inkludert legemidler, næringsstoffer og giftstoffer, over placentabarrieren. Dessuten undersøker de også produksjonen og reguleringen av hormoner, blant annet humant koriongonadotropin (hCG), placentalaktogen og steroidhormoner. Dette er viktig for å forstå hormonelle endringer under svangerskapet. Forskningen som ble gjennomført i 2018, undersøkte effekten av bromerte flammehemmere (BFR) på aktiviteten til sulfotransferase i den humane trofoblastiske cellelinjen (BeWo). Dette enzymet er involvert i reguleringen av de intracellulære nivåene av skjoldbruskkjertelhormoner [3].
Forskning på infeksjoner og sykdommer: BeWo-celler brukes også til å undersøke samspillet mellom patogener og placentaceller. Denne forskningen er verdifull for å forstå sykdommer som kan overføres fra mor til foster, og for å utvikle strategier for å beskytte fosterets helse. Dessuten hjelper denne cellelinjen forskere med å undersøke komplikasjoner som oppstår under svangerskapet, som for eksempel svangerskapsforgiftning. En studie utført av Michalina Bralewska i 2023 brukte for eksempel BeWo-trofoblastcellemodellen og fant at både kromogranin A (CgA) og peptidet avledet av det, catestatin (CST), kan spille en rolle i den intrikate patogenesen ved svangerskapsforgiftning (PE) [4]. I en annen studie ble trikosanthinets potensial mot kreft undersøkt ved hjelp av BeWo-koriokarsinomcellelinjen. Forskerne gjorde også en ekstra innsats for å finne biomarkører ved å utføre komparative proteomanalyser før og etter forsøket [5].

430,00 €*

Innhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300123

5. Forskningspublikasjoner med BeWo-celler

Her er noen viktige forskningspublikasjoner som omhandler BeWo trofoblastceller.

AMPK-signalering regulerer mitofagi og mitokondriell ATP-produksjon i den humane trofoblastcellelinjen BeWo

Denne studien i Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) foreslår at AMPK-signalering aktiverer mitofagi i BeWo-trofoblastceller via FUNDC1- og PRKN-faciliterte mitofagi-veier. Som et resultat bidrar mitofagi til å opprettholde ATP-produksjonen og mitokondrienes membranpotensial.

Etylparaben induserer apoptotisk celledød i BeWo-celler fra human placenta via Caspase-3-veien

Denne artikkelen ble publisert i Animal Cells and Systems (2020). Studien foreslår at etylparaben medierer apoptose i BeWo-celler via regulering av caspase 3-veien.

Karakterisering av xenobiotisk og steroid deponeringspotensial i vev og cellelinjer fra human placenta (BeWo, JEG-3, JAR og HTR-8/SVneo) ved hjelp av kvantitativ proteomikk

Denne studien i Drug Metabolism and Disposition (2023) benyttet placentacellelinjer, inkludert BeWo, JAR, JEG-3 og HTR-8/SVneo, for å undersøke xenobiotika og steroiddeponering i celler.

Apelin og apelinreseptor i human placenta: Uttrykk, signalvei og regulering av trofoblast JEG-3- og BeWo-cellers proliferasjon og cellesyklus

Denne forskningsartikkelen i International Journal of Molecular Medicine (2020) foreslår at apelin, liganden til APJ-reseptoren, fremmer proliferasjon av BeWo-celler gjennom APJ- og ERK1/2-, stat3- og AMPK-signalering. Dermed kan det være et viktig adipokin som regulerer utviklingen av morkaken.

Antiepileptika og næringsstoffer til fosteret: effekter på kolintransportører i en human placentacellelinje

Denne studien i Epilepsia (2021) undersøkte effekten av næringsstoffer til fosteret og antiepileptika på kolintransportører i den humant avledede trofoblastiske cellelinjen BeWo.

6. Ressurser for BeWo-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer

Her er noen tilgjengelige nettressurser om BeWo-cellene:

In vitro-transfeksjon: Denne videoen vil hjelpe deg med å lære in vitro plasmid-DNA-transfeksjonsprotokollen for adherente celler.

Følgende lenke inneholder informasjon om cellekultur for BeWo-celler:

BeWo-celler: Dette nettstedet inneholder viktig informasjon om celledyrking av BeWo-cellelinjen. Dette inkluderer informasjon om cellemedier og dyrkingsforhold. Den inneholder også protokoller for subkulturering og håndtering av kryopreserverte og proliferative kulturer.

Referanser

Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
Kolokol'tsova, T., et al., Characteristics of trophoblasts in long-term culture. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
Leonetti, C.P., C.M. Butt og H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
Bralewska, M., T. Pietrucha og A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
Hu, Y., et al., Sammenlignende proteomanalyse av medikamenttrichosanthin-tilsetning til BeWo-cellelinjen. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.