BEWO-celler
430,00 €*
Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 6 celler for vedheftende linjer eller 5 × 106 celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).
Generell informasjon
| Beskrivelse | BeWo-celler, en cellelinje avledet fra malignt svangerskapskoriokarsinom i morkaken hos foster av hankjønn, har blitt en mye brukt in vitro-modell for å studere morkaken. Celle-celle-fusjonen under syncytialiseringsfasen i den humane trofoblasten under utviklingen av morkaken er en av de mest betydningsfulle, men likevel minst forståtte hendelsene. Fordi det er vanskelig å studere denne prosessen i en placenta in vivo, brukes BeWo-celler som en cellekulturmodell for å simulere syncytialisering av placentas villøse trofoblast in vivo. Disse cellene har en epitel-lignende fenotype og er adherente. Subklonen b30 av BeWo-celler er spesielt nyttig for studier av næringsopptak og -transport på grunn av den tette veksten på permeable membraner. CK 7 og E-cadherin er molekylære markører som uttrykkes av BeWo-celler. VE-cadherin finnes i BeWo-celler og forsterkes ved behandling med forskolin. Cellene uttrykker også keratin og er positive for G6PD, B-isoenzym. Karyotypen til BeWo-cellene er modaltall = 86, med et intervall på 71 til 178, og stamlinjetallet er hypotetraploid. Karyotypen er relativt stabil innenfor stamlinjetallet. BeWo-celler skiller ut ulike hormoner, blant annet humant koriongonadotropin (hCG), humant korion somatomammotropin (placentalaktogen) og steroidhormoner som østron, østriol og østradiol. Nivåene av β-hCG og østradiol som utskilles av BeWo-celler er imidlertid lavere enn de som utskilles av andre koriokarsinom-avledede cellelinjer, som JEG-3. Ved behandling med forskolin øker utskillelsen av β-hCG i BeWo-celler til et nivå som ligner det som er observert i de andre cellelinjene som stammer fra koriokarsinom. Videre øker behandling med forskolin også progesteronnivåene som skilles ut av BeWo-celler. Oppsummert er BeWo-celler en mye brukt in vitro-modell for å studere placentautvikling og syncytialiseringsprosessen hos humane trofoblaster. De har en epitel-lignende fenotype, uttrykker ulike molekylære markører og skiller ut flere hormoner, blant annet hCG, placentalaktogen og steroidhormoner. Samlet sett er BeWo-celler et verdifullt verktøy for å undersøke de komplekse prosessene som er involvert i utviklingen av morkaken. |
|---|---|
| Organisme | Menneskelig |
| Vev | Morkaken |
| Sykdom | Choriokarsinom |
| Metastatisk område | Hjerne |
| Synonymer | BeWo, Be Wo, Be-Wo |
Kjennetegn
| Alder | Foster |
|---|---|
| Kjønn | Mann |
| Morfologi | Epitel-lignende |
| Vekstegenskaper | Vedhengende |
Regulatoriske data
| Sitat | BEWO (Cytion-katalognummer 300123) |
|---|---|
| Biosikkerhetsnivå | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0044 |
Biomolekylære data
| Isoenzymer | G6PD, B |
|---|---|
| Mottakelighet for virus | Poliovirus 3, vesikulær stomatitt (Indiana) |
| Revers transkriptase | Negativ |
| Produkter | Progesteron, humant korionisk somatomammotropin (placentalaktogen), østrogen, østron, østriol, østradiol, keratin |
Håndtering
| Kulturmedium | Ham's F12K Medium, m: 2,0 mM L-Glutamin, m: 2,0 mM Natriumpyruvat, m: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820608a) |
|---|---|
| Kosttilskudd | Suppler mediet med 10 % FBS |
| Dissosiasjonsreagens | Accutase |
| Subkulturer | Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium. |
| Såtetthet | Det anbefales en såtetthet på 1 x 104 celler/cm2. |
| Fornyelse av væske | 2 til 3 ganger per uke |
| Gjenoppretting etter tining | Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer. |
| Frys medium | Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress. |
| Opptining og dyrking av celler |
|
| Inkubasjonsatmosfære | 37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære. |
| Flaskebelegg | For optimal feste og levedyktighet etter tining anbefaler vi å bruke kollagenbelagte kolber eller plater. |
| Fryseprosedyre | Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass. |
| Leveringsbetingelser | Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass. |
| Lagringsforhold | For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen. |
Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA
| Sterilitet | Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag. |
|---|---|
| STR-profil |
Amelogenin: x,y
CSF1PO: 11,12
D13S317: 9, 11
D16S539: 13, 14
D5S818: 10, 11
D7S820: 10, 12
TH01: 9, 9.3
TPOX: 8
vWA: 16
D3S1358: 15
D21S11: 30
D18S51: 14, 16
Penta E: 8, 12
Penta D: 9, 12
D8S1179: 12
FGA: 22, 23, 24
|
| HLA-alleler |
A*: '01:01:01, '11:01:01
B*: '08:13, '35:01:01
C*: '04:01:01, '07:01:01
DRB1*: '01:03:01, '03:01:01
DQA1*: '01:01:01, '05:01:01
DQB1*: '02:01:01, '05:01:01
DPB1*: '01:01:01, '04:01:01
E: '01:01:01
|
Analysesertifikat (CoA)
| Partienummer | Sertifikattype | Dato | Katalognummer |
|---|---|---|---|
| 300123-010425 | Analysesertifikat | 23. May. 2025 | 300123 |
| 300123-1022 | Analysesertifikat | 23. May. 2025 | 300123 |
Avtale om materialoverføring
Hvis du har tenkt å bruke Cytion-cellelinjer utelukkende til intern forskning på ett enkelt forskningssted, må du fylle ut og signere vår materialoverføringsavtale (MTA) og sende den sammen med bestillingen din.
For alle kommersielle anvendelser – inkludert, men ikke begrenset til, betaling for tjenester, kvalitetskontrolltesting, produktutgivelse, diagnostisk bruk eller regulatoriske studier – vennligst fyll ut skjemaet for tiltenkt bruk, slik at vi kan utarbeide en avtale som er tilpasset prosjektet ditt.
Merk: MTA gjelder kun for visse cellelinjer. Hvis denne merknaden og MTA-dokumentet vises på en produktside, gjelder avtalen. For cellelinjer som ikke dekkes av MTA, vil det ikke vises noen henvisning til avtalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vårt amerikanske selskap for å motta den aktuelle avtalen.