NIH-3T3 šūnas: NIH-3T3 fibroblastu pētījumu un pielietojumu attīstība

NIH-3T3 šūnu līnija, ko 1962. gadā no 17 dienas veca Šveices Albino peles embrija audiem izveidoja Hovards Grīns un Džordžs Todaro Ņujorkas Universitātes Medicīnas skolā, ir kļuvusi par fundamentālu resursu biomedicīnas pētniecībā. NIH-3T3 šūnas, kas ir atzītas par ļoti uzņēmīgām pret leikēmijas vīrusu un sarkomas vīrusa fokusu veidošanos, kalpo kā ļoti svarīgs rīks neskaitāmiem zinātniskiem pētījumiem, tostarp vīrusu onkoloģijas pētījumiem, gēnu ekspresijas analīzei un šūnu augšanas dinamikas izpētei. "3T3" nomenklatūra atspoguļo šūnu kultivēšanas metodi, kas apzīmē "3 dienu pārneses" intervālu ar sākotnējo izsējas blīvumu 3 × 10^5 šūnas, uzsverot standartizētos apstākļus, kādos šīs šūnas pirmo reizi tika kultivētas un paplašinātas.

NIH-3T3 šūnu daudzveidīgā morfoloģija un pielietojums

Viena no NIH-3T3 šūnu raksturīgākajām īpašībām ir to morfoloģiskā pielāgojamība, kas ievērojami mainās atkarībā no kultūras konfluences. Pie zemāka blīvuma šiem fibroblastiem ir vārpstiņveida, vientuļu šūnu struktūra, kas, populācijai sasniedzot konfluenci, pārvēršas par blīvu, virpuļveidīgu struktūru. NIH-3T3 šūnas, kuru vidējais diametrs ir aptuveni 18 μm, ir universāls modelis padziļinātiem šūnu bioloģijas pētījumiem, sākot no audu atjaunošanas mehānismiem līdz pat sarežģītiem šūnu cikla regulēšanas ceļiem.

Kultivēšanas informācija

Šveices Albino peles laboratorijā.

NIH 3T3 šūnu izmantošanas plusi un mīnusi

Priekšrocības

• Transfekcijas efektivitāte: NIH 3T3 šūnas ir pazīstamas ar savu augsto transfekcijas ātrumu, tāpēc tās ir lieliski piemērotas gan pārejošiem, gan stabiliem gēnu ekspresijas pētījumiem, izmantojot dažādas transfekcijas metodes.

• Barojošā slāņa lietderība: Šīs šūnas bieži vien kalpo kā atbalsta barojošais slānis kopkultūrām ar tādām šūnām kā keratinocīti un cilmes šūnas, pateicoties to izdalītajiem augšanas faktoriem, kas veicina kopkultūru šūnu augšanu.

• Cilmes šūnu pētījumi: NIH-3T3 šūnas ir ieteicama izvēle cilmes šūnu pētniecībā, jo tās inducē pluripotenci bez ģenētiskām modifikācijām un nodrošina labvēlīgu vidi cilmes šūnu diferenciācijai.

• Kultūras stabilitāte: NIH-3T3 šūnas ir pazīstamas ar savu stabilitāti un zemo spontānu transformāciju biežumu. Tomēr noteiktos apstākļos vai pēc specifisku onkogēnu vai mutagēnu iedarbības NIH-3T3 šūnas var spontāni transformēties. Šī transformācija var izraisīt vēža īpašību iegūšanu, piemēram, nekontrolētu augšanu, kontakta inhibīcijas zudumu un spēju veidot audzējus, ja tās injicē uzņēmīgiem saimniekiem.

Trūkumi

• Nepastāvīgs šūnu izmērs: NIH-3T3 šūnu iegarenā, vārpstai līdzīgā morfoloģija var atšķirties, kas sarežģī attēlu analīzi testos.

• Uzņēmība pret infekciju: Šīm šūnām ir tendence inficēties ar baktērijām un mikoplazmām, ja tās netiek uzturētas stingros aseptiskos apstākļos, kas var ietekmēt eksperimenta integritāti.

NIH-3T3 šūnu izmantošana pētniecībā

• DNS transfekcijas pētījumi: NIH-3T3 šūnas ir izturīgas, tāpēc tās ir ideāli piemērotas dažādu gēnu ieviešanai un funkciju izpētei, kā to pierāda pētījumi, kuros tiek pētītas tādas olbaltumvielas kā NAB2-STAT6 un to loma šūnas procesos.

• Uz šūnām balstīti testi: To uzticamība ļauj veikt dažādus testus, tostarp dzīvotspējas, apoptozes un fokusa veidošanās testus, sniedzot ieskatu par šūnu reakciju dažādos eksperimentālos apstākļos.

• Šūnu cikla pētījumi: Šūnu līnijas vienkāršā šūnu cikla manipulācija, izmantojot seruma līmeni, padara to par spēcīgu modeli šūnu cikla regulācijas un tās noviržu izpētei slimību kontekstā.

Uzlabojiet savu pētījumu ar NIH-3T3 šūnām

Izcelt galvenos pētījumus, kuros izmantota fibroblastu šūnu līnija NIH 3T3

NIH 3T3 šūnu līnija ir bijusi ļoti svarīga daudzos pētniecības projektos, kas aptver dažādus šūnu bioloģijas aspektus. Turpmāk minēti daži nozīmīgi pētījumi, kuros izmantotas šīs šūnas:

• NAB2-STAT6 fusion proteīna izpēte: Šajā pētījumā, kas publicēts Biochemical and Biophysical Research Communications, aplūkots, kā NAB2-STAT6 fusion proteīns ietekmē NIH-3T3 šūnas, jo īpaši tā loma šūnu augšanas un migrācijas veicināšanā, izmantojot EGR-1 regulāciju
• APOBEC3 un Murine Leukemia Virus izpēte: Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā "Virology", aplūkota AKV peļu leikēmijas vīrusa hipermutācija NIH-3T3 šūnās, kas ekspresē peles APOBEC3 gēnu
• Epigenētisko zāļu antimetastiskā potenciāla novērtēšana: Šajā pētījumā, kas publicēts Oncotargets and Therapy, novērtēta hidralazīna un valproīnskābes antimetastatiskā iedarbība uz RAS transformētām NIH-3T3 šūnām
• Baicaleīna ietekme uz NIH-3T3 proliferāciju un kolagēna sintēzi: Šajā pētījumā izmanto NIH-3T3 šūnas, lai izpētītu, kā baicaleīns ietekmē šūnu proliferāciju un kolagēna ražošanu, izmantojot miR-9/insulīnam līdzīgā augšanas faktora-1 ass modulāciju
• Pētījumi par riboflavīna noplicināšanu un audzēju veidošanos: Šajā pētījumā sniegti secinājumi par to, kā riboflavīna trūkums NIH-3T3 šūnās veicina audzēju veidošanos, veicinot šūnu proliferāciju un disregulējot šūnu cikla gēnus

NIH-3T3 šūnu pētniecībai būtiski resursi

Pētniekiem, kas vēlas strādāt ar NIH-3T3 šūnām, ir pieejami dažādi resursi, lai palīdzētu izstrādāt kultivēšanas un eksperimentu protokolus:

• Sferoīdu veidošanās NIH-3T3 šūnās: Šajā videomateriālā sniegts detalizēts ieskats sferoīdu veidošanā, kas ir 3D šūnu kultivēšanas metode, ar kuras palīdzību NIH-3T3 šūnas apvieno klasteros, piedāvājot pētījumiem fizioloģiski atbilstošāku modeli
• NIH-3T3 šūnu augšanas uzraudzība: Šajā videoklipā, izmantojot JuLI Br dzīvu šūnu attēlveidošanas sistēmu, ir iemūžināta NIH-3T3 šūnu augšanas dinamika 65 stundu laikā, demonstrējot šūnu proliferāciju reāllaikā

Šo resursu mērķis ir atbalstīt jūsu pētniecības centienus ar NIH-3T3 šūnām, nodrošinot pamatu veiksmīgiem eksperimentiem un atklājumiem.

Atsauces

1. Rahimi, A.M., M. Cai un S. Hoyer-Fender, NIH3T3 fibroblastu šūnu līnijas heterogenitāte. Cells, 2022. 11(17): p. 2677.
2. Leibiger, C., et al, First molecular cytogenetic high resolution characterization of the NIH 3T3 cell line by murine multicolor banding (Pirmā NIH 3T3 šūnu līnijas molekulārā citogenētiskā augstas izšķirtspējas raksturošana, izmantojot daudzkrāsu joslu veidošanu). Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 2013. 61(4): p. 306-312.
3. Wang, H.-X., et al., Comparative analysis of different feeder layers with 3T3 fibroblasts for culturing rabbits limbal stem cells. International Journal of Ophthalmology, 2017. 10(7): p. 1021.
4. Wang, Z., et al., Neuronālo šūnu diferenciācija no NIH/3T3 fibroblastiem noteiktos apstākļos. Development, growth & differentiation, 2011. 53(3): p. 357-365.
5. Park, Y.-S., et al., NAB2-STAT6 fusion protein mediates cell proliferation and oncogenic progression via EGR-1 regulation. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020. 526(2): p. 287-292.
6. Mattsson, M., Expression of the Sloppymerase™ in NIH/3T3 Cells: M.: Kļūdainas polimerāzes daudzpusības izpēte: pētījums par kļūdas riskam pakļautās saplūšanas polimerāzes daudzpusību. 2021.
7. Sahinturk, V., et al., Acrylamide exerts its cytotoxicity in NIH/3T3 fibroblast cells by apoptosis. Toxicology and Industrial Health, 2018. 34(7): p. 481-489.
8. Lusi, E.A. un F. Caicci, Discovery of the First Human Retro-Giant Virus: BioRxiv , 2019: 851063. lpp., 2019. gads: 851063.
9. Endo, M., et al, E2F1-Ror2signaling mediates coordinated trancriptional regulation to promote G1/S phase transition inbFGF-stimulatedNIH/3T3 fibroblasts. The FASEB Journal, 2020. 34(2): p. 3413-3428.
10. Long, L., et al., Riboflavin Depletion Promotes Tumorigenesis in HEK293T and NIH3T3 Cells by Sustaining Cell Proliferation and Regulating Cell Cycle-Related Gene Transcription. The Journal of Nutrition, 2018. 148(6): p. 834-843.