NCI-H1299 šūnas: NCI-H1299 plaušu vēža šūnu pētījumi un klīniskā nozīme
NCI-H1299 ir imortizēta cilvēka nesmalto šūnu plaušu vēža šūnu līnija, ko plaši izmanto imūnās onkoloģijas, vēža un zāļu atklāšanas pētījumos. Turklāt pētnieki izmantoja šīs šūnas, lai pētītu jutību pret zālēm, pamatā esošos signalizācijas ceļus un molekulāros mehānismus, kas saistīti ar plaušu vēzi. Turklāt šīs šūnas izmanto arī vīrusu infekciju, piemēram, SARS-CoV-2, izpētei.
NCI-H1299 šūnu vispārīgās īpašības un izcelsme
Pirmā lieta, kas jāzina par šūnu līniju, ir tās izcelsme un vispārīgās īpašības, jo tās palīdz noteikt tās izmantošanu pētniecībā. Šī raksta sadaļa palīdzēs jums uzzināt svarīgu informāciju par NCI-H1299 izcelsmi un īpašībām. Piemēram, kas ir NCI-H1299 plaušu vēža šūnas? Kāda veida šūna ir NCI-H1299? Kāds ir NCI-H1299 šūnu izmērs? Kāda ir atšķirība starp A549 un NCI-H1299?
- NCI-H1299 šūnu līnija ir iegūta no 43 gadus veca ar vēzi slima vīrieša, kas ir baltādains, plaušu limfmezgla metastāzēm.
- Šīm šūnām ir homozigotiska daļēja p53 gēna delecija, tāpēc tās neekspresē p53 proteīnu. NCI-H1299 p53 proteīna ekspresijas trūkums veicina H1299 plaušu vēža šūnu proliferatīvo tendenci.
- Ir ziņots, ka šīm imortalizētajām šūnām ir ne tikai p53, bet arī NCI-H1299 KRAS mutācija, kas ir atbildīga par to augšanu, proliferāciju, migrāciju un invaziju.
- NCI-H1299 kariotips ir gandrīz diploīds.
- NCI-H1299 šūnām ir epitēlijšūnu morfoloģija.
- Šīs šūnas ir saplacinātas, un to biezums ir mazāks par 5 µm.
NCI-H1299 un A549
NCI-H1299 un A549 ir nesmalkas plaušu vēža šūnu līnijas. NCI-H1299 šūnas ir agresīvākas un jutīgākas nekā A549. Abām ir salīdzinoši līdzīgas mutācijas, piemēram, KRAS. Tomēr atšķirībā no NCI-H1299 šūnām A549 šūnas ekspresē P53 gēnu.
Kultivēšanas informācija
Šūnu līnijas kultūru uzturēšana nav vienkārša, kamēr nav zināma visa svarīgākā informācija par to, tostarp: Kas ir NCI-H1299 dubultošanās laiks? Kāds ir NCI-H1299 izsējas blīvums? Kas ir NCI-H1299 šūnu barotne? Kā kultivēt NCI-H1299 šūnu līnijas? Šī sadaļa palīdzēs jums uzzināt atbildes uz visiem šiem jautājumiem par NCI-H1299 šūnu kultivēšanu.
NCI-H1299 šūnu kultivēšanas galvenie punkti
|
Dubultošanās laiks: |
NCI-H1299 divkāršošanās laiks ir 22-30 stundas. |
|
Adhēzijas vai suspensijas veidā: |
NCI-H1299 ir adherentu šūnu līnija. |
|
Subkultivēšanas attiecība: |
NCI-H1299 šūnas subkultivē ieteicamajā proporcijā no 1:3 līdz 1:6. Sēšanai adherētās šūnas mazgā ar 1x PBS un inkubē ar Accutase pasāžas šķīdumu 8 līdz 10 minūtes istabas temperatūrā. Atdalītās šūnas pievieno ar svaigu barotni un centrifugē. Pēc tam šūnu granulas resuspendē, un šūnas ielej jaunās kolbās ar barotni. |
|
Augšanas barotne: |
RPM1 1640 ir ideāla NCI-H1299 šūnu barotne. Tā ir papildināta ar 10 % fetālā liellopu seruma, 4500 mg/l glikozes, 2,0 mM L-glutamīna, 1 mM nātrija piruvāta, 1500 mg/l NaHCO3 un 10 mM HEPES. Barotne jāatjauno ik pēc 2 līdz 3 reizēm nedēļā. |
|
Augšanas apstākļi: |
NCI-H1299 plaušu vēža šūnu kultūras tiek uzturētas mitrinātā inkubatorā 37 °C temperatūrā ar 5 % CO2 pieplūdi. |
|
Uzglabāšana: |
NCI-H1299 šūnu līniju var ilgstoši uzglabāt šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai ļoti zemas temperatūras saldētavās temperatūrā, kas zemāka par -150 °C. |
|
Saldēšanas process un vide: |
CM-1 vai CM-ACF ir NCI-H1299 šūnu sasaldēšanas vide. Šūnas sasaldē, izmantojot lēnu sasaldēšanas procesu, kas ļauj samazināt temperatūru tikai par 1 grādu minūtē, lai aizsargātu šūnu dzīvotspēju. |
|
Atkausēšanas process: |
Sasaldētās NCI-H1299 šūnas strauji sakrata iepriekš uzsildītā ūdens vannā 37 °C temperatūrā 40 līdz 60 sekundes, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Atkausētās šūnas pievieno ar svaigu barotni, un tās var tieši kultivēt jaunās kolbās vai centrifugēt. Pirmajā gadījumā barotne jānomaina pēc 24 inkubācijas stundām. Centrifugēšana palīdz noņemt sasalstošās barotnes elementus. Pēc tam savāktās šūnas resuspendē svaigā barotnē un iepilda jaunā kolbā kultivēšanai. |
|
Bioloģiskās drošības līmenis: |
NCI-H1299 šūnu kultūras apstrādei nepieciešama 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorija. |
Iegādāties NCI-H1299 šūnu līniju: augstas kvalitātes pētniecības rīki plaušu vēža bioloģijas izpētei
NCI-H1299 šūnu priekšrocības un trūkumi
Tāpat kā citām cilvēka vēža šūnu līnijām, arī NCI-H1299 piemīt dažas atšķirīgas īpašības, kas saistītas ar konkrētiem plusiem un mīnusiem. Šeit mēs esam apkopojuši dažas būtiskas no tām.
Priekšrocības
Galvenās NCI-H1299 nemalikocelulārā plaušu vēža šūnu līnijas priekšrocības ir šādas:
-
In vitro plaušu vēža modelis
NCI-H1299 šūnu līnijas ir izveidotas no plaušu karcinomas limfmezglu metastāzēm, tāpēc tām piemīt salīdzinoši līdzīgas īpašības. Tāpēc šīs šūnas var kalpot kā in vitro modelis plaušu vēža bioloģijas, šūnu un molekulāro mehānismu izpētei, kā arī potenciālo terapeitisko līdzekļu skrīningam un testēšanai.
-
Viegli kultivējamas
NCI-H1299 šūnas ir viegli kultivēt un uzturēt pētniecības laboratorijā. Nav sarežģītu šūnu kultivēšanas prasību un procedūru.
-
NCI-H1299 P53 un NCI-H1299 KRAS mutācijas
NCI-H1299 šūnās nav p53 gēna ekspresijas, kas ļauj šūnām strauji vairoties. Turklāt tām ir KRAS mutācija, kas veicina šūnu augšanu, proliferāciju, invaziju un migrāciju. Ņemot to vērā, pētnieki izmanto H1299 šūnas, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas saistīti ar KRAS un P53 mutācijām.
Trūkumi
NCI-H1299 šūnu trūkumi ir šādi:
-
Audu specifiskums
NCI-H1299 ir iegūtas no plaušu audiem. Tāpēc tās pielietojamība lielākoties aprobežojas ar plaušu karcinomas pētījumiem. Tā var pilnībā neatspoguļot citu vēža veidu heterogenitāti un vispārējās īpašības.
NCI-H1299 šūnu izmantošana pētniecībā
NCI-H1299 šūnu līniju plaši izmanto plaušu vēža pētījumos. Šeit ir minēti daži daudzsološi šīs šūnu līnijas lietojumi.
- Vēža bioloģija: NCI-H1299 šūnas kalpo kā lielisks pētniecības instruments, lai pētītu vēža attīstību, progresēšanu un ar to saistītos šūnu un molekulāros mehānismus. Šīm šūnām ir noteiktas mutācijas, kas ļauj pētniekiem izpētīt vēža šūnu uzvedību, signalizācijas ceļus un gēnu ekspresijas profilus. Vairākos pētījumos plaušu vēža bioloģijas izpētei izmantota NCI-H1299 šūnu līnija, kas nav sīkšūnu plaušu karcinoma. Piemēram, 2018. gadā veiktajā pētījumā, izmantojot NCI-H1299 šūnas, tika pētīts plaušu vēža šūnu apoptozē iesaistītais signalizācijas ceļš. Pētnieki atklāja, ka PI3K/AKT ceļš veicina šūnu proliferāciju, un tā inhibīcija var izraisīt vēža šūnu nāvi [1]. Tāpat citā pētījumā tika pētīti mehānismi, kas saistīti ar NCI-H1299 epitēlija-mezenhīma pāreju (EMT). Šajā pētījumā tika ierosināts, ka ekstracelulārais proteīns SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) veicina NCI-H1299 EMT un migrāciju, tādējādi veicinot šūnu audzēju veidošanos - SPARC proteīns darbojas kā TGF-β1 signalizācijas mediators [2].
- Zāļu atklāšana un skrīnings: NCI-H1299 - cilvēka plaušu vēža šūnu līniju - plaši izmanto, lai novērtētu potenciālo zāļu toksicitāti un efektivitāti. Turklāt pētnieki to izmanto, lai izpētītu pretvēža zāļu darbības mehānismu. Pētījumos šīs šūnas izmantotas arī, lai noteiktu iespējamos zāļu mērķus un rezistences mehānismus. Piemēram, Xiao-Yun Shen un kolēģu veiktajā pētījumā tika pētīts dabiskā savienojuma bruceīna D (BD) pretvēža potenciāls. Rezultāti atklāja, ka BD būtiski kavē NCI-H1299 šūnu proliferāciju, invaziju un migrāciju. Tāpēc to var uzskatīt par potenciālu palīgterapiju, lai ārstētu nesmalto šūnu plaušu karcinomu [3]. Līdzīgā pētījumā tika novērtēta ksantohumola citotoksiskā iedarbība atsevišķi un kombinācijā ar cisplatīna ķīmijterapeitisko līdzekli uz NCI-H1299 plaušu vēža šūnām [4].
Pētniecības publikācijas ar NCI-H1299 šūnām
Dažas nozīmīgākās un visvairāk citētās pētniecības publikācijas par plaušu karcinomas šūnu līniju NCI-H1299 ir šeit.
Apoptozes indukcija ar indol-3-karbinolu apstrādātās H1299 plaušu vēža šūnās, paaugstinot ROS līmeni
Šis raksts ir publicēts žurnālā Human and Experimental Toxicology (2021). Pētījumā ierosināts, ka indol-3-karbinols inducē apoptozi H1299 šūnās, paaugstinot reaktīvo skābekļa sugu (ROS) līmeni.
Šis pētījums publicēts 2018. gadā žurnālā Cellular Physiology and Biochemistry. Pētījuma rezultāti atklāja, ka kofeīnskābes un paklitaksela kombinācijai ir sinerģiska pretvēža iedarbība uz nesmalto šūnu plaušu vēža šūnu līniju NCI-H1299.
Šis pētnieciskais raksts publicēts žurnālā Molecular Medicine Reports (2018). Pētījumā tika novērtēta triterpenoīda saponīna tubeimozīda-1 pretvēža iedarbība un tās pamatā esošie mehānismi NCI-H1299 šūnu līnijā.
Pristimerīns inducē apoptozi un kavē proliferāciju un migrāciju H1299 plaušu vēža šūnās
Šajā rakstā, kas publicēts žurnālā Journal of Cancer (2020), ierosināts, ka dabīgs savienojums pristimerīns nomāc NCI-H1299 šūnu proliferāciju un migrāciju.
Cilvēka plaušu adenokarcinomas H1299 šūnu VIPR1 gēna regulēšanas mehānisms
Šajā pētījumā Medical Oncology (2019) tika pētīta VIPR1 gēna hiperekspresijas potenciālā ietekme uz NCI-H1299 adenokarcinomas šūnu līniju.
NCI-H1299 šūnu līnijas resursi: HH12HI resursu resursi: protokoli, videoklipi un citi materiāli
Šeit ir sniegti daži tiešsaistes resursi, kuros aprakstītas NCI-H1299 šūnas.
- NCI-H1299 transfekcija: Šajā videoklipā ir izskaidrots NCI-H1299 šūnu līnijas transientās transfekcijas protokols.
- Adherējošas šūnu līnijas subkultivēšana: Šis video palīdzēs apgūt vispārīgu adherentas šūnu līnijas subkultivēšanas procedūru.
Šajā saitē ir sniegta informācija par NCI-H1299 šūnu kultūrām.
- NCI-H1299 šūnu līnija: Šī saite palīdzēs jums uzzināt par NCI-H1299 šūnu pasāžas un transfekcijas protokolu.
Biežāk uzdotie jautājumi par NCI-H1299 šūnu līniju
Atsauces
- Gu, J. un citi, EGCG izraisītas apoptozes izpēte plaušu vēža šūnās, inhibējot PI3K/Akt signalizācijas ceļu. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al., SPARC darbojas kā TGF-β1 starpnieks, veicinot epitēlija-mezenhimālo pāreju A549 un H1299 plaušu vēža šūnās. Biofactors, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al., Pētījums par bruceīna D mehānismu ārstējot nemalikocelulārā plaušu vēža H1299 šūnas. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al., Xanthohumol un tā kombinācijas ar cisplatīnu citotoksiskā iedarbība uz cilvēka metastātiska plaušu vēža H1299 šūnām. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.