MG-63 šūnu līnija: Detalizēta rokasgrāmata par MG-63 šūnām osteosarkomas pētījumos
MG-63 šūnas ir fibroblastiem līdzīgas cilvēka osteosarkomas šūnas, kas biomedicīnas jomā piedāvā plašu pētniecības pielietojumu klāstu. Tas var ietvert ar kauliem saistītu procesu, piemēram, kaulu attīstības, diferenciācijas u. c., izpēti. Turklāt MG-63 šūnu līnija kalpo kā piemērots in vitro modelis kaulu šūnu dzīvotspējas, proliferācijas un adhēzijas pētījumiem.
MG-63 šūnu līnijas vispārīgās īpašības un izcelsme
Šajā raksta sadaļā tiks aplūkota MG-63 šūnu līnijas izcelsme un vispārīgās īpašības. Jūs uzzināsiet: Kas ir MG-63 šūnu līnija? Kāda ir MG63 šūnu līnijas izcelsme? Kāda ir MG-63 šūnu morfoloģija? Kāds ir MG-63 šūnu izmērs?
- MG-63 ir osteoblastu šūnu līnija, kas iegūta no 14 gadus veca vīrieša osteosarkomas pacienta (kaukāzietis) kauliem. A. Billiau un kolēģi šo šūnu līniju deponēja 1977. gadā.
- MG-63 šūnu līnijai piemīt fibroblastu šūnām līdzīga morfoloģija.
- Cilvēka osteosarkomas šūnām (MG-63) piemīt hipotriploīdija. Modālais hromosomu skaits šajās šūnās ir 66, kas sastopams aptuveni 44 % šūnu populācijas. Gandrīz 2 % šūnu populācijas ir konstatēta arī augstāka ploidija. Turklāt visās šūnās ir daudz 18-19 marķieru hromosomu.
Informācija par MG-63 šūnu līnijas kultivēšanu
Svarīga informācija par šūnu līnijas kultivēšanas prasībām var atvieglot jūsu darbu. Šajā raksta sadaļā ir uzskaitīti visi galvenie punkti, kas ir būtiski MG-63 šūnu kultivēšanai un uzturēšanai. Šeit jūs uzzināsiet: Kāds ir MG-63 šūnu dubultošanās laiks? Kādu barotni izmanto MG-63 šūnu audzēšanai? Kāds ir MG-63 šūnu izsējas blīvums?
MG-63 šūnu kultivēšanas galvenie punkti
|
Dubultošanās laiks |
MG-63 šūnu populācijas dubultošanās laiks ir 28-38 stundas atkarībā no kultivēšanas apstākļiem. |
|
Augšanas īpašības |
MG-63 ir adherentu šūnu līnija. |
|
Sēšanas blīvums |
mG-63 šūnām ieteicams 1 x104 šūnu/cm2šūnu blīvums. Adherējošās šūnas mazgā ar 1 x fosfātu buferšķīdumu (PBS) bez magnija un kalcija. Pēc tam šīs šūnas inkubē ar disociācijas šķīdumu (Accutase), pievieno svaigu barotni un centrifugē. Savākto šūnu granulas resuspendē svaigā barotnē un iepilda jaunā kolbā augšanai. |
|
Augšanas barotne |
MG-63 šūnu kultivēšanai izmanto DMEM vai Hama F12 barotni. Lai nodrošinātu optimālu šūnu augšanu, šīm barotnēm var pievienot 5 % fetālā liellopu seruma (FBS), 3,0 g/l glikozes, 2,5 mM L-glutamīna un 1,2 g/l NaHCO3. Barotne jāmaina 2-3 reizes nedēļā. |
|
Augšanas apstākļi |
MG-63 šūnu kultivēšanai nepieciešams mitrināts inkubators 37 °C temperatūrā un 5 % CO2 pieplūde. |
|
Uzglabāšana |
Šīs osteoblastiem līdzīgās šūnas var uzglabāt šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai temperatūrā zem -150 °C, lai saglabātu šūnu dzīvotspēju. |
|
Sasaldēšanas process un barotne |
MG-63 šūnu sasaldēšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF barotni. Lai novērstu šūnu šoku un aizsargātu to dzīvotspēju, parasti ieteicams lēns sasaldēšanas process. |
|
Atkausēšanas process |
Sasaldētās šūnas 40 līdz 60 sekundes inkubē iepriekš uzsildītā ūdens vannā (37 grādi pēc Celsija). Šūnas resuspendē svaigā barotnē un ielej jaunā kolbā. Pēc 24 inkubācijas stundām barotni nomaina, lai noņemtu sasalšanas barotnes sastāvdaļas. |
|
Bioloģiskās drošības līmenis |
MG-63 kultūru apstrādei un uzturēšanai ir nepieciešami pirmā bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijas apstākļi. |
MG-63 šūnu līnija: Priekšrocības un trūkumi
MG-63 ir plaši izmantota osteoblastu šūnu līnija. Tai ir vairākas priekšrocības un trūkumi. Šeit mēs minēsim dažus galvenos MG-63 šūnu līnijas plusus un mīnusus.
Priekšrocības
MG-63 šūnu priekšrocības ir šādas:
-
Osteoblastiem līdzīgas īpašības
MG-63 šūnu līnijai piemīt osteoblastiem līdzīgas īpašības, tāpēc tā ir piemērota ar kauliem saistītu procesu un slimību izpētei. To var izmantot arī šūnu adhēzijas, proliferācijas un dzīvotspējas izpētei uz titāna virsmām [1].
-
Transfekcijas ērtums
MG-63 šūnas plaši izmanto transfekcijas pētījumos, kas ļauj pētīt gēnu ekspresiju, funkcijas un šūnu procesus.
-
Augsta līmeņa interferona ražošana
MG-63 šūnas spēj ražot augsta līmeņa interferonu. Tās var dot 3,7 reizes lielāku interferona daudzumu uz cm² nekā diploīdie fibroblasti, kad tās inducē ar cikloheksimīdu, polinozīnskābi, policidīnskābi un aktinomicīnu [2].
Trūkumi
Ar MG-63 B šūnām saistītie trūkumi ir šādi:
-
Heterogenitāte
MG-63 šūnas šūnu populācijā ir neviendabīgas, kas var ietekmēt reproducējamību.
-
Audzēja šūnu līnija
MG-63 ir vēža šūnu līnija, un tā var pilnībā neatspoguļot normālu šūnu uzvedību un fizioloģiju, kas ierobežo tās izmantošanu noteiktos laboratorijas eksperimentos.
Pasūtiet MG-63 šūnas jau šodien
MG-63 šūnu lietojumi
MG-63 šūnas ir lielisks pētniecības instruments. Tās piedāvā daudzus daudzsološus pielietojumus pētniecības jomā. Šeit ir uzskaitīti daži galvenie MG-63 šūnu izmantošanas veidi pētniecībā.
- Ar kauliem saistītu procesu/limību izpēte: MG-63 šūnas ir osteoblastiem līdzīgas (kaulu veidojošas) šūnas. Tāpēc šīs šūnas plaši izmanto, lai pētītu kaulu slimības un šūnu procesus, tostarp attīstību, diferenciāciju un mineralizāciju. Turklāt šūnas plaši izmanto, lai veiktu terapeitisko zāļu skrīningu, kas veicina kaulu dzīšanu. Pētījumos izmantoja MG-63 šūnas, lai pētītu no Scutellaria baicalensis zaļi sintezētu cinka oksīda nanodaļiņu terapeitisko potenciālu attiecībā uz kaulu šūnu proliferāciju, mineralizāciju un diferenciāciju [3].
- Vēža izpēte: MG-63 šūnas plaši izmanto vēža pētījumos. Vairākos pētījumos šīs osteosarkomas šūnas ir izmantotas, lai izprastu vēža signalizācijas ceļus un novērtētu zāļu citotoksisko un terapeitisko potenciālu. Pētījumā, kas veikts 2019. gadā, tika pētītas dabiskā savienojuma tomentosīna pretvēža īpašības, izmantojot MG-63 šūnas. Iegūtie rezultāti parādīja, ka Tomentosīnam piemīt pretvēža iedarbība, izraisot intracelulāro reaktīvo skābekļa sugu (ROS) veidošanos [4].
Pētniecības publikācijas ar MG-63 šūnām
Turpmāk uzskaitītas dažas pētnieciskas publikācijas, kurās izmantota osteoblastiem līdzīgo šūnu līnija MG-63.
miR-192 palielina metotreksāta zāļu jutību pret MG-63 osteosarkomas vēža šūnām
Šis raksts tika publicēts žurnālā Pathology - Research and Practice 2020. gadā. Šajā pētījumā tika izmantotas MG-63 šūnas, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas saistīti ar osteosarkomas vēža šūnu (MG-63) rezistenci pret zālēm. Rezultāti atklāja, ka miRNA-192 varētu būt noderīgs mērķis osteosarkomas rezistences pret metotreksāta zālēm pārvarēšanai.
Šis pētījums publicēts žurnālā Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2020). Pētījumā tika ziņots par zaļi sintezētu cinka oksīda nanodaļiņu (ZnONPs) no Rehmanniae Radix pretvēža potenciālu pret kaulu vēža šūnām (MG-63).
Šis pētnieciskais raksts publicēts 2021. gadā žurnālā Materials Science and Engineering. Šajā pētījumā tika ierosinātas no auga Scutellaria baicalensis biosintētisku cinka oksīda nanodaļiņu kaulu dziednieciskās īpašības, izmantojot MG-63 šūnu līniju.
Kurkumīns inhibē MG-63 šūnu proliferāciju un invaziju, inaktivējot p-JAK2/p-STAT3 ceļu
Šis pētījums publicēts žurnālā Onco Targets and Therapy 2021. gadā. Pētījumā tika ierosinātas kurkumīna savienojuma pretvēža īpašības pret osteosarkomas šūnām. Savienojums šo terapeitisko iedarbību izraisīja, inaktivējot p-JAK2/p-STAT3 vēža signalizācijas ceļu.
Šis pētījums tika publicēts 2018. gadā žurnālā International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science. Pētījumā konstatēts, ka ar bioplauka enerģiju apstrādāts D3 vitamīns pozitīvi ietekmē kaulu šūnu proliferāciju, nobriešanu un diferenciāciju un uzlabo kaulu veselības parametrus.
MG-63 šūnu līnijas resursi: Rīknes: protokoli, videoklipi un citi resursi
Par MG-63 šūnu līniju ir pieejami vairāki resursi, kas izskaidro tās šūnu kultivēšanas un transfekcijas protokolus.
- MG-63 šūnu transfekcija: Šajā videoklipā ir izsmeļoši izskaidrots MG-63 šūnu transfekcijas protokols.
- Adherentu šūnu pasāža: Šajā videoklipā sniegti norādījumi par adherento šūnu līniju subkulturēšanu vai pasāžu. Tas palīdzēs apgūt šūnu kultūru pamatprotokolus.
Šajā saitē atradīsiet MG-63 šūnu kultivēšanas protokolu.
- MG-63 šūnu kultivēšana: Šajā tīmekļa vietnē sniegts vienkāršs un detalizēts protokols MG-63 šūnu līnijas subkulturēšanai vai sadalīšanai.
Bieži uzdotie jautājumi par MG-63 šūnām
Atsauces
- Wandiyanto, J.V., et al., Osteoblast-Like MG-63 šūnu liktenis uz iepriekš inficētām baktericīdām nanostrukturētām titāna virsmām. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A., et al., Human interferon: mass production in a new established cell line, MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): p. 11-5.
- Tang, Y., et al., Osteogenic differentiation and mineralization potential of cinc oxide nanoparticles from Scutellaria baicalensis on human osteoblast-like MG-63 cells. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: p. 111656.
- Lee, C.M., et al., Tomentosīns izrāda antikancerogēnu iedarbību cilvēka osteosarkomas MG-63 šūnās, inducējot intracelulārās reaktīvās skābekļa sugas. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): p. 1508.