INS-1 šūnu līnija

INS-1 ir labi raksturota žurku insulinoma šūnu līnija, ko plaši izmanto diabēta pētījumos. INS-1 šūnas pēc glikozes stimulācijas izdala insulīnu, tāpēc tās izmanto glikozes metabolisma, beta šūnu fizioloģijas un insulīna sekrēcijas regulācijas pētījumiem. Turklāt šīs šūnas izmanto arī potenciālo diabēta terapijas līdzekļu skrīningā, testēšanā un izstrādē.

Šajā rakstā būs sniegta visa nepieciešamā informācija par INS-1 beta šūnām, kas jums jāzina pirms to izmantošanas pētniecībā. Galvenokārt jūs uzzināsiet:

INS-1 šūnu vispārīgās īpašības un izcelsme
INS-1 šūnu līnija: Informācija par kultivēšanu
INS-1 šūnu līnijas priekšrocības un trūkumi
INS-1 žurku insulinoma šūnu INS-1 izmantošana pētniecībā
Pētniecības publikācijas ar INS-1 beta šūnām
INS-1 šūnu līnijas resursi: INS INS INS profilakse, protokoli, videomateriāli un citi resursi

1. INS-1 šūnu vispārīgās īpašības un izcelsme

Zināšanas par šūnu līnijas vispārīgajām īpašībām un izcelsmi var ievērojami palīdzēt to efektīvi un lietderīgi izmantot savos pētījumos. Šajā rakstā sniegta informācija par INS-1 izcelsmi un vispārīgajām īpašībām. Jūs uzzināsiet: Kas ir INS-1 žurku insulinoma šūnu līnija? Kādas ir INS-1 vispārīgās īpašības? Kas ir INS-1 832/3 šūnu līnija? Kas ir INS-1E?

INS-1 šūnas sākotnēji tika izolētas no 666 dienas vecas žurkas ar rentgena staru izraisītu transplantējamu insulinomu.
INS-1 šūnas ir divhormonālas. Tās vienlaicīgi ekspresē insulīna un proglikagona olbaltumvielas. Šīs šūnas tiek uzskatītas par nenobriedušām, jo tām ir zems Nkx6.1 transkripcijas faktora ekspresijas līmenis, un tām nav alfa šūnu marķieru [1].
Ir divi INS-1 šūnu subkloni, t. i., INS-1E un INS-1 832/3.
INS-1E atšķiras no mātes šūnu līnijas INS-1 attiecībā uz sekretāra reakciju uz glikozi un insulīna saturu.
INS-1 832/3 jeb INS-1 832/13 arī ir INS-1 šūnu līnijas subklons. Tas ir nenovērtējams modelis aizkuņģa dziedzera saliņu beta šūnu funkcijas un insulīna sekrēcijas regulācijas izpētei. Tā atšķiras no INS-1 mātesšūnām arī ar glikozes stimulētu insulīna sekrēciju (GSIS).

ar insulīnu saistītās glikozes uzņemšanas 3D modelēšana.

2. INS-1 šūnu līnija: Informācija par kultivēšanu

Lai efektīvi apstrādātu un uzturētu šūnu līniju, jums jāzina šāda kultivēšanas informācija par to. Šajā raksta nodaļā tiks aplūkoti visi INS-1 šūnu kultivēšanas galvenie punkti. jūs uzzināsiet: Kā kultivēt INS-1 beta šūnas? Kāds ir INS-1 šūnu kultivēšanas protokols? Kāds ir INS-1 šūnu dubultošanās laiks? Kāda ir INS-1 žurku insulinoma šūnu barotne?

INS-1 šūnu kultivēšanas galvenie punkti

Dubultošanās laiks:	INS-1 šūnu populācijas dubultošanās laiks ir aptuveni 44 stundas.
Adhēzijas vai suspensijas veidā:	INS-1 šūnas aug gan suspensijas, gan adherentā formā.
Subkultivēšanas attiecība:	INS-1 šūnas subkultivē ar dalījuma attiecību 1:3. Īsumā, suspendētās šūnas savāc. Adherētās šūnas skalo ar PBS un inkubē ar Accutase šķīdumu. Pēc atdalīšanas šūnām pievieno svaigu barotni. Pēc tam gan suspendētās, gan adherētās šūnas centrifugē un savāc. Šūnas uzmanīgi resuspendē un iepilda jaunās kolbās audzēšanai.
Augšanas barotne:	INS-1rat insulinoma šūnu līnijas kultivēšanai izmanto RPM1 1640. Barotni papildina ar 10 % termiski inaktivēta liellopu augļa seruma, 2,1 mM stabila glutamīna, 10 mM HEPES, 2,0 g/l NaHCO3 un 1 mM nātrija piruvāta.
Augšanas apstākļi:	INS-1 šūnas tiek turētas mitrinātā inkubatorā 37 °C temperatūrā ar pastāvīgu 5 % CO2 pieplūdi.
Uzglabāšana:	INS-1 beta šūnas var ilgstoši uzglabāt šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai zem -150 °C temperatūrā elektriskā saldētavā.
Saldēšanas process un vide:	INS-1 šūnu sasaldēšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF barotni, izmantojot lēnu sasaldēšanas procesu. Lai aizsargātu šūnu dzīvotspēju, temperatūra minūtē pazeminās tikai par 1 °C.
Atkausēšanas process:	Sasaldētās INS-1 šūnas atkausē ūdens vannā, kas iepriekš iestatīta 37 °C temperatūrā, 40 līdz 60 sekundes. Pēc atkausēšanas šūnām pievieno svaigu barotni un tieši ielej jaunā kolbā augšanai. Pēc 24 stundām barotni nomaina, lai likvidētu sasalušās barotnes sastāvdaļas.
Bioloģiskās drošības līmenis:	INS-1 žurku insulinoma šūnu kultivēšanai nepieciešama 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorija.

INS-1 šūnu augšana saliņās 10x un 20x palielinājumā.

3. iNS-1 šūnu līnijas priekšrocības un trūkumi

Tāpat kā citām šūnu līnijām, arī INS-1 piemīt dažas atšķirīgas iezīmes, kas saistītas ar zināmiem plusiem un mīnusiem. Šeit mēs esam minējuši dažas būtiskas no tām.

Priekšrocības

INS-1 šūnu līnijas galvenās priekšrocības ir šādas:

Labi raksturota
INS-1 ir labi izveidota un labi raksturota šūnu līnija. Tā ir izmantota daudzos pētījumos. Tā saglabā savas fenotipiskās īpašības un insulīna sekrēcijas spējas ilgāku laiku, tādējādi nodrošinot uzticamus un konsekventus eksperimentu rezultātus.
Beta šūnu modelis
INS-1 šūnas izmanto, lai pētītu aizkuņģa dziedzera saliņu beta šūnu darbību, jo tās izdala insulīnu un reaģē uz glikozes līmeņa svārstībām.

trūkumi

INS-1 šūnu trūkumi ir šādi:

Nav cilvēka izcelsmes
INS-1 beta šūnas nav cilvēka izcelsmes. Tās ir iegūtas no žurku insulinoma. Tas var radīt sugai raksturīgas atšķirības un ierobežot eksperimentu rezultātu tiešu pārnesi uz cilvēka fizioloģiju.

4. INS-1 žurku insulinoma šūnu izmantošana pētniecībā

INS-1 beta šūnas tiek plaši izmantotas diabēta pētījumos. Šeit ir minēti daži daudzsološi šīs šūnu līnijas lietojumi.

Insulīna sekrēcijas pētījumi: INS-1 šūnām piemīt insulīna sekrēcijas spēja, tāpēc tās plaši izmanto, lai pētītu insulīna sekrēcijas pamatšūnu mehānismus. Pētnieki pēta būtiskus faktorus, kas saistīti ar insulīna izdalīšanos, tostarp glikozes metabolismu, signalizācijas ceļus, hormonus un farmakoloģiskos līdzekļus. Pētījumā konstatēts, ka INS-1 beta šūnās insulīna sekrēciju regulē no K + ATP jonu kanāla atkarīgs ceļš [2]. Turklāt pētījumos atklāts, ka insulīna sekrēcijā INS-1 žurku insulinoma šūnās INS-1 ir iesaistīti arī GLP-1R un AKT/PDX1 ceļi [3].
Beta šūnu funkcijas pētījumi: INS-1 šūnām piemīt aizkuņģa dziedzera saliņu beta šūnām līdzīgas īpašības, piemēram, reakcija uz glikozes metabolismu un insulīna sekrēcija. Tāpēc tās izmanto beta šūnu fizioloģisko procesu un funkciju izpētei. Pētījumā, kas veikts 2022. gadā, tika izmantotas INS-1 šūnas un izstrādāts beta šūnu disfunkcijas modelis, izmantojot _H2O2. Tika pētīta šūnu dzīvotspēja, insulīna sekrēcija un ar oksidatīvo stresu saistītie marķieri šajās šūnās, reaģējot uz dabīgo savienojumu iedarbību [4].
Zāļu atklāšana un izstrāde: INS-1 žurku insulinoma šūnas tiek plaši izmantotas pretdiabēta savienojumu vai zāļu skrīningam un testēšanai. Tās var izmantot, lai pētītu terapeitisko līdzekļu potenciālo ietekmi uz insulīna sekrēciju un citiem būtiskiem parametriem. Pētījumā konstatēts, ka loganīns, Ķīnas augu formulas sastāvdaļa, aizsargā INS-1 šūnu insulīna sekrēcijas funkciju un rada potenciālu pretdiabēta iedarbību. Šī sastāvdaļa šo labvēlīgo ietekmi izraisīja, kavējot FOXO1 gēna kodola translokāciju pa PI3K/AKT ceļu [5].

550,00 €*

Saturs: 1.5 milliliter

Cenas bez nodokļiem un piegādes izmaksām

cryovial

Produkta numurs: 300471

5. Pētniecības publikācijas ar INS-1 beta šūnām

Šeit ir dažas nozīmīgas pētniecības publikācijas, kurās izmantota INS-1 žurku insulinoma šūnu līnija.

Alfa-mangostīns uzlabo insulīna sekrēciju un aizsargā INS-1 šūnas no streptozotocīna izraisītiem bojājumiem

Šis pētījums tika publicēts 2018. gadā žurnālā Internation Journal of Molecular Sciences. Pētījumā tika ierosināts, ka dzeltens kristālisks dabas savienojums alfa-mangostīns veicina insulīna sekrēciju INS-1 beta šūnās un aizsargā tās pret beta šūnu toksīna streptozotocīna izraisītiem bojājumiem.

Epikatehīna glikozes stimulētas insulīna sekrēcijas potencēšana INS-1 šūnās nav atkarīga no tā antioksidanta aktivitātes

Šis pētījums publicēts 2018. gadā žurnālā acta pharmacologica sinica. Pētījuma rezultāti atklāja, ka epikatehīna savienojums veicina glikozes stimulētu insulīna sekrēciju piesātināto taukskābju nomāktās INS-1 beta šūnās, aktivizējot CaMKII ceļu.

No Stevia rebaudiana Bertoni iegūts feniletanoīda glikozīds ietekmē insulīna sekrēciju žurku INS-1 saliņu β šūnās

Šajā rakstā žurnālā Molecules (2019) ierosināts, ka jauns dabīgs savienojums feniletanoīda glikozīds ietekmē insulīna sekrēciju INS-1 žurku insulinoma šūnās, tādējādi tam ir pretdiabēta potenciāls.

Loureirīns B veicina insulīna sekrēciju, izmantojot GLP-1R un AKT/PDX1 ceļus

Šis pētījums publicēts žurnālā European Journal of Pharmacology (2022). Pētījumā tika ierosināts, ka dabiskais produkts lureirīns B uzlabo insulīna sekrēciju INS-1 aizkuņģa dziedzera saliņu beta šūnās, modulējot AKT/PDX1 un GLP-1R ceļus.

Withania coagulans pretvēža aktivitāte in vitro pret HeLa, MCF-7, RD, RG2 un INS-1 vēža šūnām un fitoķīmiskā analīze

Šajā Integrative Medicine Research (2018) rakstā novērtēts Withania coagulans ekstrakta pretvēža potenciāls, izmantojot INS-1 vēža šūnas.

6. INS-1 šūnu līnijas resursi: INS INS INS-1 resursi: protokoli, videoklipi un citi resursi

Šeit ir daži tiešsaistes resursi, kuros aprakstītas INS-1 šūnas:

Suspensijas šūnu subkultivēšana: Šis video ir visaptverošs ceļvedis par šūnu subkultūru audzēšanu suspensijas kultūrās.
Adhēzijas šūnu subkultivēšana: Šis videoklips palīdzēs apgūt vispārīgu protokolu adherentu šūnu pasāžas veikšanai.

Šajā saitē ir INS-1 šūnu kultivēšanas protokols:

INS-1 šūnu līnija: Šajā tīmekļa vietnē ir visa informācija par INS-1 šūnu kultūru. Tajā ir informācija par INS-1 šūnu kultūru un sasaldēšanas barotnēm, subkultivēšanas protokoli, kā arī informācija par rīcību ar kriokonservētām un proliferējošām INS-1 kultūrām.

Atsauces

Acosta-Montalvo, A., et al., Proglucagon-Derived Peptides Expression and Secretion in Rat Insulinoma INS-1 Cells. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
Park, J.E. and J.S. Han, A Portulaca oleracea L. extract promotes insulin secretion via a K+ ATP channel dependent pathway in INS-1 pancreatic β-cells. Nutrition Research and Practice, 2018. 12(3): p. 183.
Fang, H., et al., Loureirin B promotes insulin sekretion through GLP-1R and AKT/PDX1 pathways. European Journal of Pharmacology, 2022. 936: p. 175377.
Duan, J., et al., Swietenine and swietenolide from Swietenia macrophylla king improve insulin secretion and atenuate apoptosis in H2O2 induced INS-1 cells. Environmental Toxicology, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
Mo, F.-F., et al., Loganīna pretdiabēta iedarbība, inhibējot FOXO1 kodola translokāciju caur PI3K/Akt signalizācijas ceļu INS-1 šūnās. Iranian Journal of Basic Medical Sciences, 2019. 22(3): p. 262.