Iet uz galveno lapu

Hep2 šūnas un to nozīme balsenes vēža pētniecībā

Hep 2 šūnas ir būtisks in vitro modelis, ko plaši izmanto dažādās biomedicīnas pētniecības jomās, piemēram, reimatoloģijā, vēža pētniecībā un imunoloģijā. Šīs cilvēka šūnas, kas cēlušās no balsenes karcinomas, ir bijušas neatņemama sastāvdaļa, noskaidrojot izcelsmes audu un balsenes audzēju specifiskās pazīmes. To nozīme ir labi atzīta translacionālajos vēža pētījumos, kur tās ir ievērojami veicinājušas mūsu izpratni par balsenes vēža būtību un izcelsmi, ieņemot nozīmīgu vietu publikācijās par balsenes vēža pētījumiem [1].

📋 Hep2 šūnu līnija — īsa informācija
Augšanas barotne
Hep 2 šūnu kultivēšanai izmanto EMEM jeb Eagle minimālo nepieciešamo barotni. Šī barotne ir papildināta ar 10 % FBS, 1,0 g/l glikozes, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamīna, 1 % NEAA un 1 mM nātrija piruvāta, lai nodrošinātu ideālu šūnu augšanu. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.
Dubultošanās laiks
Hep 2 šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 40 stundas.
Augšanas veids
Hep 2 šūnas ir adhezīvas un aug monoslāņos.
Bioloģiskās drošības līmenis
BSL-1
Piegādātājs
Cytion — Pasūtīt Hep2

Hep 2 šūnu izcelsme un vispārējās īpašības

Šūnu līnijas izcelsme un vispārējās īpašības nosaka tās piemērotību pētniecībā. Šī sadaļa palīdzēs jums uzzināt par Hep 2 šūnu izcelsmi un dažām būtiskām īpašībām. Piemēram, jūs uzzināsiet: Kas ir HEp-2 šūnu līnija? Kāda ir Hep 2 šūnu izcelsme? Un kāda ir Hep 2 morfoloģija?

  • Hep 2, nemirstīga cilvēka epitēlija šūnu līnija, pirmo reizi tika aprakstīta 1954. gadā kā balsenes karcinomas šūnas, ko aprakstīja H.W. Toolan. Tomēr pēdējā laikā ir ziņots, ka Hep 2 šūnu līnija sastāv no dzemdes kakla adenokarcinomas šūnām un cēlusies no Hela šūnu līnijas kontaminācijas [2].
  • Hep 2 šūnas satur Hela marķieru hromosomas un ir pozitīvas attiecībā uz keratīnu un cilvēka papilomas vīrusa DNS sekvencēm, kā apstiprināts attiecīgi ar imūnperoksidāzes krāsošanu un PCR.
  • Hela šūnu līnijas atvasinājums Hep 2 piemīt epitēlija tipa morfoloģija.
  • Hep 2 šūnu līnijai ir gan strukturālas, gan skaitliskas hromosomu novirzes ar gandrīz triploīdu kariotipu [3].

HeLa dzemdes kakla vēža šūnu dalīšanās zem mikroskopa.

HEp-2 šūnu līnija: informācija par kultivēšanu

Pirms sākt darbu ar šūnu līniju, ir jāzina šādi galvenie punkti par tās kultivēšanu. Šī informācija var būt noderīga, lai efektīvi kultivētu un uzturētu šūnu līniju. Jums jāzina: kāds ir HEp-2 šūnu dubultošanās laiks? Vai Hep 2 šūnas ir adhezīvas? Kāda ir Hep2 šūnu sēšanas blīvums?

 

Populācijas dubultošanās laiks:

Hep 2 šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 40 stundas.

Adhēzijas vai suspensijas šūnas:

Hep 2 šūnas ir adhezīvas un aug monoslāņos.

Sēšanas blīvums:

Ideāls Hep 2 šūnu kultūras sēšanas blīvums ir 1 x 104 šūnas/cm2. Lai veiktu sēšanu, adhezīvās Hep 2 šūnas noskalo ar 1 x PBS šķīdumu, pēc tam inkubē ar Accutase disociācijas šķīdumu. Pēc 8–10 minūšu inkubācijas istabas temperatūrā šūnas atkārtoti suspendē barotnē un centrifugē. Savāktās šūnas pēc tam izdalītas svaigā barotnē un ielejamas jaunās kolbās kultivēšanai.

Augšanas barotne:

Hep 2 šūnu kultivēšanai izmanto EMEM vai Eagle minimālo nepieciešamo barotni. Šim barotnei pievieno 10 % FBS, 1,0 g/l glikozes, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamīna, 1 % NEAA un 1 mM nātrija piruvāta, lai nodrošinātu ideālu šūnu augšanu. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.

Augšanas apstākļi:

Tāpat kā citas zīdītāju šūnu līnijas, arī Hep 2 tiek kultivētas mitrinātā inkubatorā, kas iestatīts uz 37 °C temperatūru un ar nepārtrauktu 5 % CO2 pievadi.

Uzglabāšana:

Hep 2 šūnas var uzglabāt ultra-zemas temperatūras elektriskajos saldētavās (zem -150 °C) vai šķidrā slāpekļa tvaika fāzē ilgtermiņa uzglabāšanai.

Sasaldēšanas process un barotne:

Hep 2 šūnām ieteicamās sasaldēšanas vides ir CM-1 vai CM-ACF. Šūnas jāiesaldē, izmantojot lēnu sasaldēšanas procesu, kas ļauj temperatūrai pakāpeniski pazemināties par 1 °C un aizsargā šūnu dzīvotspēju.

Atkausēšanas process:

Sasaldēto šūnu flakonu ātri atkausē, kratot ūdens vannā 37 °C temperatūrā, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Pēc tam šūnas pievieno svaigai barotnei un centrifugē, lai atdalītu sasaldēšanas barotnes sastāvdaļas. Vēlāk šūnu nogulsnes atkārtoti suspendē barotnē, un šūnas izpilda kultūras kolbās. Lai šūnas pieķertos, tām ir nepieciešams atpūsties gandrīz 24 stundas.

Bioloģiskās drošības līmenis

Hep 2 šūnu kultūru apstrādei un uzturēšanai ieteicams izmantot 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratoriju.

Hep2 cells

Hep 2 šūnas pirms un pēc pilnīgas izaugšanas.

Hep 2 šūnu priekšrocības un ierobežojumi

Gandrīz visām šūnu līnijām piemīt unikāla priekšrocību un ierobežojumu kombinācija, kas veicina to izmantošanu pētniecības jomā. Šajā sadaļā tiks aprakstīti daži galvenie plusi un mīnusi, kas saistīti ar Hep 2 šūnu līniju.

Priekšrocības

Hep 2 šūnu līnijas galvenās priekšrocības ir šādas:

  • Cilvēka izcelsme: Hep 2 ir iegūta no cilvēka epitēlija šūnām, tādējādi padarot to par vērtīgu in vitro modeli cilvēka slimību un vīrusu infekciju pētīšanai.
  • ANA noteikšana: Hep 2 šūnu līnijai piemīt dabiskais proteīnu klāsts, kas satur daudzus antigēnus, padarot to par lielisku substrātu antinukleāro antivielu (ANA) noteikšanai. Šī īpašība ļauj veikt specifisku un ļoti jutīgu ANA skrīningu serumā, padarot to par būtisku diagnostikas rīku saistaudu slimību identificēšanai.

Ierobežojumi

  • Hromosomu anomālijas: Hep 2 šūnas uzrāda vairākas hromosomu skaitliskas un strukturālas anomālijas. Šīs anomālijas var ietekmēt šūnu uzvedību un ierobežot to piemērojamību noteiktos laboratorijas eksperimentos.
  • Tumorigenitāte: Hep 2, no audzēja iegūta cilvēka epitēlija šūnu līnija, var piemīt ģenētiskas anomālijas, kas parasti nav sastopamas epitēlija šūnās. Tāpēc Hep 2 šūnu izmantošana var būt ierobežota konkrētos pētījumos, kas vērsti uz normālu šūnu fizioloģiju.

Hep 2 šūnu līnijas pielietojuma paplašināšana biomedicīniskajā pētniecībā

Hep 2 šūnu līnija izceļas kā paraugmodelis daudzām lietojumiem biomedicīniskajos pētījumos. Šīs šūnas, kas ir pazīstamas ar savu daudzpusību, pilda svarīgu lomu in vitro eksperimentos, sākot no receptoru analīzes līdz sarežģītu slimību pētījumiem.

Tumorogēno mehānismu un terapeitisko mērķu izpēte ar Hep 2 šūnām

Hep 2 šūnas, būdamas tumorogēnas, ir izšķirošas, lai iedziļinātos vēža bioloģijas sarežģījumos. Tās sniedz ieskatu vēža signālu ceļos, mehānisma pētījumos un ir galvenais atbalsts pretvēža zāļu skrīningā un novērtēšanā. Piemēram, izsmeļošā pētījumā tika izmantotas Hep 2 šūnas, lai aprakstītu miRNA-33a ietekmi uz vēža šūnu proliferāciju. Rezultāti atklāja miRNA-33a antiproliferatīvo iedarbību, mijiedarbojoties ar PIM1, kas ir pazīstams onkogēns, norādot uz jaunu terapeitisko mērķi [4]. Citā gadījumā Hep 2 tika izmantots, lai novērtētu Marsdenia tenacissima cinka oksīda nanodaļiņu terapeitisko potenciālu, uzsverot to antiproliferatīvo un apoptozes efektivitāti [5].

Viroloģijas pētījumu attīstība, izmantojot Hep 2 šūnu atziņas

Hep 2 šūnu uzņēmība pret dažādiem cilvēka vīrusiem padara tās par nenovērtējamu resursu viroloģiskajos pētījumos. Tās ir efektīvi izmantotas SARS-CoV-2 vīrusu gēnu ekspresijā, lai atklātu sarežģīto mijiedarbību starp vīrusu un saimniekšūnu mehānismiem [6]. Šī pielietojuma nozīme ir īpaši liela šajā laikmetā, kad COVID-19 un citu vīrusu infekciju izpratne un apkarošana ir globāla prioritāte.

Šūnu funkciju atšifrēšana: gēnu manipulācija Hep 2 šūnās

Hep 2 šūnu līnijas pielāgojamība ģenētiskajai manipulācijai uzsver tās lietderību mehānisma pētījumos. Pētnieki izmanto šo īpašību, lai modulētu gēnu ekspresiju un noskaidrotu konkrētu gēnu lomu šūnu funkcijās. Vienā no ievērojamākajiem pētījumiem tika izmantota RBM6 RNS saistošā proteīna pārmērīga ekspresija Hep 2 šūnās, kas atviegloja tā audzēja supresora potenciāla izpēti, sniedzot vērtīgu ieskatu vēža molekulārajā pamatā [7].

Slimību diagnostikas uzlabošana, izmantojot Hep 2 šūnu līnijas

Papildus šīm pētniecības jomām Hep 2 šūnas ir atzītas par to diagnostiskajām spējām, jo īpaši ANA noteikšanā, kas ir būtiska autoimūno slimību, piemēram, sistēmiskā sarkanā vilkēde, diagnostikā. Precizitāte, ar kādu Hep 2 šūnas var parādīt ANA, atbalsta diagnozi un mērķtiecīgu ārstēšanas metožu izstrādi, uzlabojot mūsu izpratni par autoimūnajām patoloģijām un uzlabojot pacientu aprūpi.

Pateicoties šiem daudzveidīgajiem pielietojumiem, Hep 2 šūnas ir ievērojami veicinājušas progresu vēža translacionālajā pētniecībā, vīrusu infekciju izpētē un šūnu mehānismu izpētē. To ieguldījums klīniski nozīmīgu datu iegūšanā ir nenovērtējams, apstiprinot to neaizstājamo lomu gan laboratorijā, gan klīnikā. Pētniecībai turpinot attīstīties, Hep 2 šūnu līnija noteikti paliks priekšplānā, palīdzot atklāt jaunus ārstēšanas veidus un paplašinot mūsu zināšanas par cilvēka veselību un slimībām.

Nopirkt HEp-2 šūnu līniju jau šodien

Hep 2 šūnas: pētniecības publikācijas

Tālāk ir uzskaitītas dažas interesantas un visbiežāk citētas pētījumu publikācijas par Hep 2 šūnām.

Resursi par Hep2 šūnu līniju: protokoli, video un citi materiāli

Hep 2 ir labi pazīstama šūnu līnija. Ir pieejami vairāki resursi, kas veltīti Hep 2 šūnu līnijai.

Biežāk uzdotie jautājumi par HEp-2 šūnām biomedicīnas pētniecībā

HEp-2 šūnas ir nemirstīga šūnu līnija, par kuru sākotnēji uzskatīja, ka tā ir iegūta no balsenes karcinomas, bet vēlāk tika identificēta kā dzemdes kakla adenokarcinomas šūnas, kas piesārņotas ar HeLa šūnām. To cilvēka epitēlija izcelsme padara tās par galveno instrumentu dažādu slimību pētniecībā, jo īpaši vēža pētniecībā, imunoloģijā un virusoloģijā, sniedzot ieskatu slimību mehānismos un iespējamos ārstēšanas veidos
HEp-2 šūnu krāsojuma modeļi, veicot pretkodolu antivielu (ANA) testus, ir ļoti svarīgi autoimūno slimību diagnosticēšanai. Šie modeļi palīdz identificēt specifiskas autoantivielas, palīdzot diagnosticēt tādas slimības kā sistēmiskā sarkanā vilkēde, un ir stūrakmens klīniskajā imunoloģijā, jo tie palīdz izprast autoimūno patoloģiju
HEp-2 šūnas tiek plaši izmantotas ANA noteikšanai, jo tās spēj uzrādīt plašu antigēnu klāstu, kas ļauj veikt jutīgu un specifisku ANA skrīningu seruma paraugos. Tas padara tās nenovērtējamas autoimūno slimību diagnostikā, uzsverot to būtisko lomu diagnostikas metožu attīstībā imunoloģijā
ANA titri HEp-2 šūnās norāda lielāko seruma atšķaidījumu, pie kura autoantivielas joprojām ir nosakāmas, un tas ir būtisks rādītājs autoimūnās slimības smaguma pakāpes un progresēšanas novērtēšanai. Augsti titri bieži vien liecina par aktīvāku slimību, kas palīdz klīnicistiem pieņemt ārstēšanas lēmumus un uzraudzīt slimību
HEp-2 šūnas, kas iegūtas no balsenes karcinomas, ir ļoti svarīgas, pētot balsenes vēža izcelsmi un iezīmes. To izmantošana vēža pētījumos ir ļāvusi būtiski uzlabot izpratni par balsenes vēzi, palīdzot izstrādāt mērķterapiju un bagātinot literatūru par balsenes vēzi
Sākotnēji tika uzskatīts, ka tās ir no balsenes karcinomas, bet vēlāk HEp-2 šūnas tika identificētas kā dzemdes kakla adenokarcinomas šūnas, kas atklāja šūnu līniju izcelsmes sarežģītību, bet nemazināja to vērtību pētniecībā, pateicoties to unikālajām īpašībām un pielietojumam epitēlija šūnu uzvedības un patoloģiju pētniecībā
Lai gan HeLa un HEp-2 šūnām ir kopīga izcelsme no cilvēka dzemdes kakla vēža šūnām, tām piemīt atšķirīgas īpašības. HeLa straujā proliferācija padara tās piemērotas plašam pētījumu klāstam, savukārt HEp-2 unikālās īpašības, īpaši epitēlija šūnu pētījumos, sniedz īpašas priekšrocības epitēlija šūnu patoloģiju un mehānismu izpētē
HEp-2 šūnu veiksmīgai kultivēšanai nepieciešami īpaši apstākļi, piemēram, EMEM, kas papildināts ar FBS, un kontrolēta vide 37 °C temperatūrā ar 5 % CO2. Zināšanas par to kultivēšanas prasībām, tostarp par izsējas blīvumu un barotnes sastāvu, ir būtiskas, lai tās efektīvi izmantotu pētniecībā
HEp-2 šūnām ir daudz priekšrocību, tostarp to nozīme cilvēka slimību izpētē un lietderība ANA noteikšanā. Tomēr to hromosomālās anomālijas un audzēja daba var ierobežot to pielietojamību dažās pētniecības jomās, tāpēc to izmantošana ir rūpīgi jāapsver
HEp-2 šūnas ir paplašinājušas pētniecības iespējas dažādās biomedicīnas jomās, sākot no zāļu skrīninga līdz slimību mehānismu pētījumiem. To daudzpusība un ieguldījums slimību izpratnē un ārstēšanā uzsver to nenovērtējamo lomu gan fundamentālajos, gan translatoloģiskajos pētījumos, un tas sola pastāvīgu nozīmi turpmākajos zinātniskajos centienos

Atsauces

  1. Fusi, M. un S. Dotti, HEp-2 šūnu līnijas pielāgošana pilnīgi bezdzīvnieku kultivēšanas sistēmām un šūnu augšanas analīze reālajā laikā. Biotechniques, 2021. 70(6): 319.–326. lpp.
  2. Gorphe, P., Hep-2 šūnu līnijas visaptverošs pārskats translacionālajos pētījumos par balsenes vēzi. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): 644.–649. lpp.
  3. Wang, M., et al., Ar vēzi saistītie fibroblasti cilvēka HEp-2 izveidotā balsenes ksenotransplantētā audzējā nav iegūti no vēža šūnām caur epitēlija-mezenhīma pāreju, tie ir fenotipiski aktivizēti, bet kariotipiski normāli. PLoS One, 2015. 10(2): e0117405.
  4. Karatas, O.F., miR-33a antiproliferatīvais potenciāls balsenes vēža Hep-2 šūnās, mērķējot PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): 2455.–2461. lpp.
  5. Wang, Y., et al., Cinka oksīda nanodaļiņu sintēze no Marsdenia tenacissima inhibē šūnu proliferāciju un inducē apoptozi balsenes vēža šūnās (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: 111624. lpp.
  6. Zhang, J., et al., SARS-CoV-2 proteīnu subcelulārās lokalizācijas sistēmisks un molekulārs pētījums. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): 269. lpp.
  7. Wang, Q., et al., RNS saistošais proteīns RBM6 kā audzēja supresoru gēns nomāc augšanu un progresēšanu laringokarcinomā. Gene, 2019. 697: 26–34. lpp.

Esam konstatējuši, ka atrodaties citā valstī vai izmantojat citu pārlūkprogrammas valodu, kas nav pašlaik izvēlētā. Vai vēlaties pieņemt ieteiktos iestatījumus?

Aizvērt