Cilvēka nabas vēnas endotēlija šūnas (HUVEC)
HUVEC ir primārās endotēlija šūnas, kas ir būtisks instruments biomedicīniskajos pētījumos. Tās palīdz pētniekiem izpētīt angiogēnēzi, asinsvadu bioloģiju un tādas slimības kā ateroskleroze un vēzis. HUVEC tiek izmantotas, lai pētītu endotēlija šūnu uzvedību, šūnu signālu mehānismus un veiktu zāļu testēšanu, sniedzot vērtīgu informāciju par potenciālām terapijām vai ārstēšanas metodēm sirds un asinsvadu slimībām un vēzim. Tās kalpo arī kā modelis asinsvadu bioloģijas pētījumiem.
HUVEC šūnu izcelsme un vispārējās īpašības
Zināšanas par šūnu līnijas izcelsmi un vispārīgajām īpašībām ir būtiskas, lai izlemtu, vai tā ir piemērota jūsu pētījumam. Šī sadaļa palīdzēs jums uzzināt šo būtisko informāciju par HUVEC endotēlija šūnām: Kam tiek izmantotas HUVEC šūnas? Kāda ir HUVEC šūnu pilnā forma? Kādas ir HUVEC atšķirīgās īpašības? Kāda ir HUVEC morfoloģija? Kāds ir HUVEC diametrs? Kāds ir HUVEC šūnu izmērs?
- HUVEC šūnas tiek iegūtas no cilvēka nabassaites vēnas endotēlija.
- HUVEC morfoloģija ir endotēlija tipa. Tām parasti ir daudzstūra forma un apaļs kodols centrā.
- HUVEC šūnu izmērs ir 17 μm diametrā.
- Šīs endotēlija šūnas ir diploīdas. To hromosomu skaits ir 46.
HUVEC TERT2
HUVEC TERT2 ir nemirstīga šūnu līnija, kas iegūta no primārām cilvēka nabassaites vēnas endotēlija šūnām (HUVEC). Tā tika izstrādāta, ievadot cilvēka telomerāzes reversās transkriptāzes (TERT) gēnu HUVEC šūnu genomā. Šī modifikācija palīdzēja pagarināt to dzīves ilgumu kultūrā, ļaujot veikt ilgtermiņa eksperimentus bez ierobežojumiem, kas saistīti ar primārajām HUVEC.
Kāda ir atšķirība starp HUVEC un HMEC-1?
HUVEC un HMEC-1 endotēlija šūnu līniju struktūra un sarežģītība ir salīdzināma. Tomēr HMEC-1 šūnas, ņemot vērā šūnu izmēru un granulāritāti, veido vienveidīgāku populāciju nekā HUVEC. Tas var samazināt eksperimentālo datu variācijas.
Informācija par HUVEC šūnu līnijas kultivēšanu
Šī raksta sadaļa ir veltīta tam, lai sniegtu jums būtiskas zināšanas par HUVEC šūnu kultivēšanu. Tas ievērojami atvieglos jūsu darbu ar šīm šūnām. Šeit jūs atradīsiet atbildes uz šādiem bieži uzdotajiem jautājumiem: Kāds ir HUVEC šūnu dubultošanās laiks? Kāda ir HUVEC sēšanas blīvums? Cik daudz pasāžu ir HUVEC šūnās? Kas ir HUVEC šūnu barotne? Kā kultivēt HUVEC šūnas?
Galvenie punkti HUVEC šūnu kultivēšanā
Dubultošanās laiks:
HUVEC dubultošanās laiks ir aptuveni 23,5 stundas. Tomēr tas var atšķirties atkarībā no šūnu kultivēšanas apstākļiem un pasāžu skaita.
Adherenta vai suspensijā:
HUVEC ir adhezīva šūnu līnija. Šūnas aug un veido monoslāņus.
Dalīšanās attiecība:
HUVEC subkultivācijas attiecība ir no 1:2 līdz 1:4. Sēšanai šūnas mazgā ar 1x fosfāta buferšķīdumu un pievieno disociācijas šķīdumu (Accutase) uz 8–10 minūtēm istabas temperatūrā. Pēc tam pievieno kultūras barotni un atdalītās šūnas centrifugē. Supernatantu izlej, un šūnu nogulsnes uzmanīgi atkārtoti suspendē. Šūnas pārnes jaunā kultūras kolbā augšanai.
Augšanas barotne:
HUVEC šūnu kultivēšanai izmanto endotēlija šūnu augšanas vidi. Vidi nomaina ik pēc 2–3 dienām. HUVEC šūnas var izmantot līdz 8–10 pasāžām.
Augšanas apstākļi:
Cilvēka endotēlija šūnu līnija (HUVEC) tiek uzturēta mitrinātā inkubatorā ar 5 % CO2 pie 37 °C.
Uzglabāšana:
HUVEC šūnas parasti uzglabā temperatūrā zem -150 °C ultra-zemas temperatūras saldētavā vai šķidrā slāpekļa tvaika fāzē. Tas nodrošina šūnu dzīvotspēju ilgākā laika posmā.
Sasaldēšanas process un barotne:
HUVEC šūnu saglabāšanai ieteicams izmantot CM-1 vai CM-ACF sasaldēšanas vidi. Parasti ieteicams lēns sasaldēšanas process, jo tas ļauj temperatūru pazemināt tikai par 1 °C minūtē, novēršot šoku šūnām un saglabājot dzīvotspēju.
Atkausēšanas process:
Lai atkausētu sasaldētas šūnas, ievietojiet tās iepriekš uzsildītā ūdens vannā 37 °C temperatūrā uz 40–60 sekundēm, līdz paliek tikai neliels ledus gabaliņš. Pēc tam pievienojiet šūnām svaigu barotni un centrifugējiet. Šis solis ir nepieciešams, lai no šūnām noņemtu jebkādus sasaldēšanas barotnes paliekas. Atkārtoti suspendējiet šūnu nogulsnes un pārnesiet šūnas jaunā kolbā ar kultūras barotni.
Bioloģiskās drošības līmenis:
Lai pareizi rīkotos ar HUVEC šūnu kultūrām, ir nepieciešama 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorija.
Publicēts: 2023. gads | Pēdējā pārskatīšana: 2026. gada maijs
Priekšrocības un ierobežojumi
Tāpat kā citām cilvēka šūnu līnijām, arī HUVEC šūnām ir savas priekšrocības un ierobežojumi. Šajā sadaļā mēs izskatīsim dažas nozīmīgākās, kas būtiski ietekmē to izmantošanu pētniecībā.
Priekšrocības
HUVEC šūnu galvenās priekšrocības ir šādas:
-
Endotēlija šūnu modelis
Ļoti atbilstoši modeļi angiogēnēzes, asinsvadu bioloģijas un ar endotēlija funkciju saistītu slimību pētīšanai.
-
Viegli kultivējamas
Salīdzinoši viegli izdalāmas no cilvēka nabassaites. Tām nav sarežģītas šūnu kultivēšanas prasības, un tās ir viegli uzturamas pētniecības laboratorijās.
Ierobežojumi
Ar HUVEC endotēlija šūnu līniju saistītie ierobežojumi ir šādi:
-
Ierobežots dzīves ilgums
HUVEC šūnām ir ierobežots dzīves ilgums, parasti tās ir derīgas 8 līdz 10 pasāžām, kas ir ierobežojums ilgtermiņa eksperimentiem. Tās var novecot, palielinoties pasāžu skaitam.
HUVEC šūnu pielietojums pētniecībā
HUVEC šūnām ir ievērojams potenciāls dažādiem pielietojumiem biomedicīnas jomā. Šeit mēs izcelsim dažus svarīgus HUVEC šūnu izmantošanas veidus pētniecībā.
- Sirds un asinsvadu slimību pētījumi: HUVEC šūnu līnija ir vērtīgs endotēlija šūnu modelis, kas sniedz ieskatu mehānismos, kas ir pamatā sirds un asinsvadu slimībām, piemēram, aterosklerozei, trombozei un hipertensijai. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai pētītu mehānismus, kas ir pamatā endotēlija disfunkcijai, oksidatīvajam stresam un iekaisumam. Piemēram, 2020. gadā veiktajā pētījumā tika izmantotas HUVEC šūnas un noskaidrots, ka garā nekodējošā RNS TTTY15 spēlē izšķirošu lomu hipoksijas izraisītu asinsvadu endotēlija šūnu bojājumu mazināšanā, iedarbojoties uz miRNA-186-5p asi [1].
- Vēža pētījumi: HUVEC ir ideāli piemērotas asinsvadu bioloģijas pētīšanai. Tāpēc tās izmanto, lai pētītu audzēju angiogēnēzi un endotēlija šūnu mijiedarbību. Tas palīdz pētniekiem izprast, kā audzēji iegūst papildu asins pieplūdi un vairojas. Piemēram, Hui Wang un kolēģi atklāja, ka eksosomas, ko izdala mutvārdu plakanšūnu karcinomas (OSCC) šūnas, paaugstina miRNA-210-3p līmeni un samazina efrīna A3 ekspresiju HUVEC šūnās, kā arī veicina cauruļveida struktūru veidošanos, regulējot PI3K/AKT kaskādi, kā apstiprināts HUVEC cauruļveida struktūru veidošanās testā [2].
- Zāļu testēšana: HUVEC endotēlija šūnas plaši izmanto zāļu testēšanai. Pētnieki, izmantojot HUVEC šūnas, var in vitro novērtēt zāļu efektivitāti, toksicitāti un iespējamās blakusparādības, kas saistītas ar dabīgiem savienojumiem, nanodaļiņām un citiem terapeitiskajiem līdzekļiem. Piemēram, vienā pētījumā, izmantojot HUVEC šūnas, tika novērtēta Rheum ribes ekstrakta sintēzēto sudraba nanodaļiņu toksicitāte [3].
Publikācijas par HUVEC šūnām
Šajā raksta sadaļā tiks uzskaitītas dažas bieži citētas un interesantas pētniecības publikācijas, kurās aprakstītas HUVEC šūnas.
Šis pētījums tika publicēts žurnālā Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology (2019). Tajā tika norādīts, ka neirotransmiters gamma-aminosviestskābe (GABA) inhibē H2O2 izraisīto oksidatīvo stresu HUVEC šūnās; tādējādi tā varētu būt efektīvs farmakoloģisks līdzeklis pret oksidatīvo bojājumu izraisītām sirds un asinsvadu slimībām.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā Biochemical and Biophysical Research Communications (2020), tika pētīts, kā estrogēns regulē signāla pārvadītāju, glikoproteīnu 130 (gp130), HUVEC šūnās.
Substrāta stingrība regulēja A549 šūnu un HUVEC migrāciju un angiogēnēzes potenciālu
Šajā pētniecības rakstā, kas publicēts žurnālā „Journal of Cellular Physiology” (2017), tika pētīta dažāda substrāta cietības ietekme uz endotēlija šūnu (A549 un HUVEC) migrāciju un angiogēnēzi. Lai novērtētu šo ietekmi, tika veikti HUVEC migrācijas un HUVEC angiogēnēzes testi.
Vara oksīda nanodaļiņu nogulsnēšanās lizosomās izraisa HUVEC šūnu nāvi
Šis pētījums, kas publicēts žurnālā „Biomaterials” (2018), pēta potenciālos mehānismus, kas ir atbildīgi par vara oksīda nanodaļiņu toksicitāti asinsvadu endotēlija šūnās.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā Medicine (2020), tika izvirzīts pieņēmums, ka dabiskais savienojums kvercetīns nomāc TNF-alfa izraisītu HUVEC apoptozi un iekaisumu, regulējot AP-1 un NF-kB signālceļus.
6. Resursi par HUVEC šūnu līniju: protokoli, video un cits
Tālāk ir uzskaitīti daži tiešsaistes resursi par HUVEC šūnām.
- HUVEC transfekcija: Šī tīmekļa vietne sniedz vispusīgu informāciju par HUVEC transfekciju. Tajā, piemēram, ir iekļauta informācija par transfekcijas reaģentiem un protokols HUVEC transfekcijai in vitro.
Šajā saitē ir HUVEC šūnu kultūras protokols.
- HUVEC šūnu kultūra: Šis dokuments palīdzēs jums apgūt HUVEC šūnu kultūras protokolus subkultivēšanai un kriokonservētu kultūru apstrādei.
Atsauces
- Zheng, J., et al., LncRNA TTTY15 regulē hipoksijas izraisītu asinsvadu endotēlija šūnu bojājumu, mērķtiecīgi iedarbojoties uz miR-186-5p sirds un asinsvadu slimībās. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
- Wang, H., et al., OSCC eksosomas regulē miR-210-3p, mērķējot uz EFNA3, lai veicinātu mutvārdu vēža angiogēnēzi caur PI3K/AKT ceļu. BioMed research international, 2020. 2020.
- Unal, İ. un S. Egri, Sudraba nanodaļiņu biosintēze, izmantojot Rheum ribes ūdens ekstraktu, raksturojums un toksicitātes novērtējums uz HUVEC un Artemia salina. Inorganic and Nano-Metal Chemistry, 2022: 1.–14. lpp.