CAL27 šūnas - mērķtiecīgs ieskats galvas un kakla vēža izpētē, izmantojot CAL27 šūnas
CAL27 ir viena no biomedicīnas pētījumos visbiežāk izmantotajām mutes dobuma plakanšūnu karcinomas šūnu līnijām. Tā ir vērtīgs instruments plakanšūnu vēža īpatnību, tostarp audzēja augšanas, attīstības un pamatā esošo šūnu un molekulāro mehānismu, izpētei. Turklāt tā arī atvieglo zāļu skrīningu un testēšanu pretvēža zāļu izstrādē.
Šajā rakstā sniegts vērtīgs ieskats par CAL27 šūnu līniju un aplūkotas šādas tēmas:
- CAL27 šūnu izcelsme un vispārējās īpašības
- Informācija par CAL27 šūnu līnijas kultivēšanu
- CAL27 šūnu līnija: Priekšrocības un trūkumi
- CAL27 šūnu izmantošana pētniecībā
- Publikācijas ar CAL27 šūnu līniju
- Resursi par CAL27 šūnu līniju: Protokoli, videoklipi un citi materiāli
1. CAL27 šūnu izcelsme un vispārīgas īpašības
Pirmais, kas jāzina par šūnu līniju, ir tās izcelsme un vispārīgās īpašības, kas to atšķir no citām šūnu līnijām. Šajā raksta sadaļā ir ietverta primārā informācija par CAL27 šūnām. Jūs uzzināsiet: Kas ir CAL27 šūnu modelis? Kas ir CAL27 HPV? Kāds ir CAL27 HER2 statuss? Kāda ir CAL27 šūnu līnijas izcelsme? Kāda ir CAL27 šūnu morfoloģija? Kāds ir CAL27 šūnu izmērs?
- Mutes dobuma plakanšūnu vēža šūnu līnija CAL27 tika iegūta no 56 gadus veca baltādaina vīrieša mēles audiem, kuram konstatēta mēles plakanšūnu karcinomas slimība. Šūnu līniju 1982. gadā izveidoja Džonni (Gioanni) un viņa kolēģi [1].
- CAL27 vēža šūnām ir epitēlijam līdzīga morfoloģija.
- Šīm šūnām ir aneuploīds kariotips. To modālais hromosomu skaits ir 43.
2.informācija par CAL27 šūnu līnijas kultivēšanu
Lai šūnu līnijas uzturēšana būtu vienkārša un iespējama, jums jāzina tās galvenās šūnu kultūras prasības. Šajā iedaļā aprakstīti svarīgi šūnu kultivēšanas jēdzieni par CAL27 šūnu līniju. Jums jāzina: Kāds ir šūnu līnijas CAL27 dubultošanās laiks? Kas ir CAL27 šūnu barotne? Kāda ir CAL27 šūnu līnijas subkultivācijas attiecība? Kādi ir CAL27 kultivēšanas apstākļi? Kā kultivēt CAL27 šūnas?
Galvenie punkti CAL27 šūnu kultivēšanai
|
Dubultošanās laiks: |
CAL27 šūnu augšanas ātrums ir mērens, un populācijas dubultošanās laiks ir aptuveni 45 stundas. |
|
Adhēzijas vai suspensijas veidā: |
Šīs daudzstūrainās CAL27 šūnas pielīp pie kultivēšanas trauka virsmas un aug monoslānī. |
|
Sadalījuma attiecība: |
CAL27 šūnas subkultivē ar dalījuma attiecību 1:2 līdz 1:4. Subkultivēšanai adhēzētās šūnas mazgā ar bezmagnija un kalcija fosfātu buferšķīduma fizioloģisko šķīdumu (1x). Pēc tam šūnas inkubē ar Accutase (pasāžas šķīdumu) istabas temperatūrā 8 līdz 10 minūtes. Atdalītajām šūnām pievieno svaigu barotni un centrifugē. Pēc tam savākto granulātu rūpīgi resuspendē un ielej jaunās kolbās ar augšanas barotni. |
|
Augšanas barotne: |
CAL27 šūnu līnijas kultivēšanai izmanto DMEM barotni, kas papildināta ar 10 % FBS, 4,5 g/l glikozes, 4 mM L-glutamīna, 1,5 g/l NaHCO3 un 1,0 mM nātrija piruvāta. Barotne jāmaina 2 līdz 3 reizes nedēļā. |
|
Augšanas apstākļi: |
CAL27 šūnu kultūras tiek turētas 37 °C temperatūrā mitrinātā inkubatorā ar 5 % CO2 pieplūdi. |
|
Uzglabāšana: |
Sasaldētas CAL27 šūnas ilgāk glabā vai nu šķidrā slāpekļa tvaika fāzē, vai arī temperatūrā, kas zemāka par -150 °C, īpaši zemā saldētavā. |
|
Sasaldēšanas process un barotne: |
CAL27 šūnu sasaldēšanai ieteicams izmantot CM-1 vai CM-ACF sasaldēšanas vidi. Lai aizsargātu šūnu dzīvotspēju, ieteicams lēns sasaldēšanas process, kas pieļauj tikai 1 °C temperatūras pazemināšanos minūtē. |
|
Atkausēšanas process: |
Atkausēšanas metode: sasaldēto šūnu flakonus ievieto ūdens vannā, kas iepriekš iestatīta 37 °C temperatūrā, uz 40-60 sekundēm, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Šūnām pievieno svaigu barotni un centrifugē. Pēc tam saldēšanas barotni izņem, un šūnu granulām pievieno svaigu barotni, un tās rūpīgi resuspendē. Pēc tam šūnas iepilda jaunās kolbās augšanai. |
|
Bioloģiskās drošības līmenis: |
CAL27 šūnu kultūru apstrādei un uzturēšanai ir nepieciešami 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijas apstākļi. |
3.cAL27 šūnu līnija: Priekšrocības un trūkumi
CAL27 ir plaši izmantota mutes dobuma plakanšūnu karcinomas šūnu līnija. Šajā sadaļā tiks izceltas dažas būtiskas priekšrocības un trūkumi, kas saistīti ar šīm vēža šūnām.
Priekšrocības
CAL27 šūnu līnijas galvenās priekšrocības ir šādas:
|
Tumorigenitāte |
CAL27 šūnu līnijai piemīt tumorogēns potenciāls. Šīm šūnām var attīstīties audzēji, ja tās injicē nude vai imūnkompromitētām pelēm. Tas var palīdzēt pētniekiem padziļināti izprast audzēju bioloģiju un mikrovidi. |
|
Ģenētiskās mutācijas |
CAL27 šūnās ir specifiskas genoma izmaiņas, piemēram, CAL27 P53, kas bieži sastopamas mutes dobuma plakanšūnu karcinomā. Tādējādi CAL27 izmantošana var būt izdevīga pētniekiem, kas pēta šo mutāciju ietekmi uz vēža augšanu, attīstību un progresēšanu. |
|
Viegli kultivējamas |
Mutes dobuma plakanšūnu šūnu līnijai CAL27 nav sarežģītu šūnu kultivēšanas prasību. Tādējādi to ir viegli kultivēt un uzturēt pētniecības laboratorijās. |
Trūkumi
Ar CAL27 šūnu līniju saistītie trūkumi ir šādi:
|
In vitro modelis |
CAL27 šūnas kalpo kā mutes dobuma plakanšūnu karcinomas in vitro modelis. Tomēr ir svarīgi atzīmēt, ka tās var precīzi neatspoguļot oriģinālo plakanšūnu audzēju īpašības un sarežģītību. |
4.cAL27 šūnu pielietojums pētniecībā
CAL27 šūnu līnijai ir plašs pielietojums biomedicīnas pētījumos. Daži no svarīgākajiem izmantošanas veidiem pētniecībā ir uzskaitīti šeit.
- Vēža bioloģija: CAL27 šūnas ir plaši izmantotas, lai pētītu mutes dobuma plakanšūnu karcinomas (OSCC) attīstības un progresēšanas molekulāros un šūnu mehānismus. Pētnieki pēta arī ģenētiskās mutācijas, signalizācijas ceļus un svarīgus biomarķierus, kas saistīti ar plakanšūnu audzējiem. Pētījumā, kas tika veikts 2021. gadā, tika izmantotas CAL27 šūnas un pētīta CD147 loma mutes dobuma plakanšūnu vēža attīstībā. Pētījuma rezultāti parādīja, ka CD147 nomākšana izraisīja CAL27 šūnu proliferācijas, migrācijas un invazijas inhibīciju. Turklāt tās samazināšana kavē arī vēža šūnu rezistences pret zālēm attīstību [2].
- Zāļu izstrāde: CAL27 šūnu līnija kalpo kā vērtīgs instruments pretvēža zāļu skrīningam un testēšanai. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai pārbaudītu dažādu ķīmijterapeitisko līdzekļu, mērķterapijas un eksperimentālo zāļu efektivitāti mutes vēža šūnu proliferācijas, augšanas un dzīvotspējas kavēšanā. Turklāt ir novērtēta arī potenciālo pretvēža līdzekļu modulējošā ietekme uz disregulētajiem vēža šūnu signalizācijas ceļiem. Tas var palīdzēt izstrādāt efektīvus un personalizētus ārstēšanas veidus slimības apkarošanai. Pētījumā tika pētīts cinka oksīda nanodaļiņu pretvēža potenciāls, izmantojot CAL27 šūnas. Pētījuma rezultāti atklāja, ka cinka oksīda nanodaļiņas rada citotoksisku iedarbību un arī inducē PINK1/Parkina ceļa mediētu mitofāģiju CAL27 mēles vēža šūnās [3]. Līdzīgi pētnieki novēroja doksorubicīna un tā nanoformas (Doxil) pretvēža potenciālu attiecībā uz CAL27 mutes dobuma plakanšūnu vēzi [4].
5.publikācijas ar CAL27 šūnu līniju
Šajā raksta sadaļā tiks aplūkotas dažas interesantas un visvairāk citētas publikācijas par CAL27 vēža šūnām:
Šis pētījums publicēts žurnālā Frontiers in Oncology (2020). Pētījumā tika pētīta vismodegiba vai itrakonazola iedarbība pret mutes dobumšūnu vēzi, izmantojot CAL27 šūnas.
PLAU veicina šūnu proliferāciju un epitēlija-mezenhimālo pāreju galvas un kakla plakanšūnu karcinomā
Šajā rakstā žurnālā Frontiers in Genetics (2021) ierosināts, ka plazminogēna aktivatora, urokināzes (PLAU) proteīns veicina CAL27 šūnu proliferāciju, migrāciju un pāreju no epitēlija uz mezenhīmu (EMT).
MikroRNA-145-5p pastiprina šūnu apoptozi un oksidatīvo stresu mēles plakanšūnu karcinomas gadījumā
Šajā rakstā Experimental and Therapeutic Medicine (2021) konstatēts, ka miRNA-145-5p pastiprina CAL27 šūnu oksidatīvo stresu un nāvi un nomāc PI3K/AKT signalizācijas ceļu.
Augu ekstrakta morīna pretvēža aktivitāte mēles plakanšūnu karcinomas šūnās
Šajā pētījumā Oncology Reports (2018) tika pētīta bioflavonoīda morīna pretvēža aktivitāte, izmantojot CAL27 šūnas.
Šajā rakstā žurnālā Journal of Ethnopharmacology (2023) tika pētīts Rosmarinus officinalis L. un Taraxacum officinale ekstraktu terapeitiskais potenciāls attiecībā uz CAL27 šūnām.
6.cAL27 šūnu līnijas resursi: Protokoli, videomateriāli un citi resursi
Pieejamie resursi par CAL27 šūnu līniju ir ierobežoti. Šajā sadaļā ir uzskaitīti daži vispārīgi protokoli, kas var palīdzēt arī darbā ar CAL27 šūnām:
- CAL27 šūnu transfekcija: Šis videoklips palīdzēs apgūt vispārīgu plazmīdu DNS transfekcijas protokolu.
- Adherentu šūnu subkultivēšana: Šis video sniegs izsmeļošu informāciju par adherento šūnu līniju subkulturēšanu.
Šajā saitē ir CAL27 šūnu kultivēšanas protokols.
- CAL27 šūnu līnija: Šajā tīmekļa vietnē ir informācija par CAL27 barotni, izsējas blīvumu, dubultošanās laiku utt. Turklāt tajā ir ietverts protokols subkulturēšanai un darbam ar proliferējošām un kriokonservētu kultūru kultūrām.
Atsauces
- Liu, X., et al., LINC00472 suppresses oral squamous cell carcinoma growth by targeting miR-455-3p/ELF3 axis. Bioengineered, 2022. 13(1): p. 1162-1173.
- Pan, S., et al., Knockout of CD147 inhibits proliferation, invasion, and drug resistance of human oral cancer CAL27 cells in Vitro and in Vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: p. 378-389.
- Wang, J., et al., Zinc oxide nanoparticles induce toxicity in CAL 27 oral cancer cell lines by activating PINK1/Parkin-mediated mitophagy. International Journal of Nanomedicine, 2018: p. 3441-3450.
- Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen, and A.M.S. Eldeen, Liposome-coated nano doxorubicin induces apoptosis on oral squamous cell carcinoma CAL-27 cells. Archives of oral biology, 2019. 103: p. 47-54.