BxPC-3 šūnu līnija
BxPC-3 ir no cilvēka iegūta aizkuņģa dziedzera vēža šūnu līnija. To plaši izmanto vēža pētījumos. Pētnieki galvenokārt izmanto šīs šūnas, lai pētītu aizkuņģa dziedzera vēža bioloģiju, noteiktu terapeitiskos mērķus un izstrādātu pretvēža zāles.
Šajā rakstā ir sniegta būtiska informācija par BxPC-3 šūnu līniju, kas var būtiski palīdzēt darbā ar to. Galvenokārt tajā tiks aplūkoti šādi jautājumi:
- BxPC-3 šūnu līnijas vispārīga informācija un izcelsme
- BxPC-3 šūnu kultivēšana
- BxPC-3 šūnu līnija: Priekšrocības un ierobežojumi
- BxPC-3 šūnu lietojumi pētniecībā
- Pētniecības publikācijas par BxPC-3 šūnām
- BxPC-3 šūnu līnijas resursi: Bxxx-3xx-2 resursu resursi: protokoli, videoklipi un citi resursi
1. vispārīga informācija par BxPC-3 šūnu līniju un tās izcelsmi
Zināšanas par šūnu līnijas izcelsmi ir ļoti svarīgas, lai to varētu izmantot pētniecībā. Zināšanas par tās īpašībām, tostarp morfoloģiju, šūnu izmēru un ploidiju, padara tās izmantošanu vienkāršāku un ērtāku. Šeit jūs uzzināsiet par BxPC-3 šūnu izcelsmi un vispārējām īpašībām: Kas ir BxPC-3 šūnas? Kas ir BxPC-3 šūnu līnija? Kāda ir BxPC-3 šūnu līnijas izcelsme? Kāda ir BxPC-3 morfoloģija?
- BxPC-3, cilvēka aizkuņģa dziedzera karcinomas šūnas tika iegūtas no 61 gadu vecas eiropietes ar aizkuņģa dziedzera adenokarcinomu 1986. gadā. Šīm šūnām tika apstiprināta audzēja klātbūtne pat pēc tam, kad pacientei tika veiktas vairākas radio- un ķīmijterapijas procedūras. Tādējādi izveidotā šūnu līnija ir nenovērtējams modelis vēža attīstības un progresēšanas izpētei.
- BxPC-3 šūnām piemīt epitēlijšūnu morfoloģija.
- Modālais hromosomu skaits BxPC-3 ir 59. Šīm šūnām ir homozigotiska 18q hromosomas delecija, kas kodē SMAD4/DPC4 proteīnu. Turklāt šūnu līnijā nav BxPC-3 kras mutācijas, kas ir izplatīta starp aizkuņģa dziedzera audzējiem. Šajās aizkuņģa dziedzera vēža šūnās konstatēta arī BxPC-3 braf delecija.
Kāda ir atšķirība starp BxPC3 un PANC-1?
BxPC-3 PADC (aizkuņģa dziedzera duktālās adenokarcinomas) un PANC-1 šūnas ir primārās aizkuņģa dziedzera vēža šūnu līnijas ar epitēlija morfoloģiju. Pirmajām šūnām piemīt vairāk epitēlijam līdzīgas īpašības, bet vēlākām - vairāk mezenhīma īpašības [1].
2. bxPC-3 šūnu kultivēšana
BxPC-3 šūnu līniju plaši izmanto vēža pētniecības laboratorijās. Lai efektīvi kultivētu šo aizkuņģa dziedzera vēža šūnu līniju, jums jāzina šādi galvenie punkti. Jūs uzzināsiet: Kāds ir bxpc3 dubultošanās laiks? Kā kultivēt BxPC-3 šūnu līniju?
Galvenie punkti BxPC-3 šūnu kultivēšanai
|
Populācijas dubultošanās laiks: |
BxPC-3 šūnu dubultošanās laiks ir no 48 līdz 60 stundām. |
|
Adhēzijas vai suspensijas veidā: |
BxPC-3 ir adherentu šūnu līnija. |
|
Sadalījuma attiecība: |
BxPC-3 šūnas tiek subkultivētas proporcijā no 1:2 līdz 1:4. Šūnas mazgā ar 1 x PBS un inkubē ar pasāžas šķīdumu, ko sauc par akutāzi. Pēc 8-10 minūtēm šūnām pievieno svaigu barotni un šūnas centrifugē. Granulas atkal resuspendē barotnē, un šūnas ielej jaunā kultivēšanas traukā audzēšanai. |
|
Augšanas barotne: |
BxPC-3 šūnu līnijas kultivēšanai izmanto RPMI 1640 barotni. To papildina ar 10 % fetālā liellopu seruma, 2,1 mM stabilā glutamīna un 2,0 g/l NaHCO3, lai nodrošinātu ideālu šūnu augšanu. Barotne jāmaina 2 līdz 3 reizes nedēļā. |
|
Augšanas apstākļi: |
BxPC-3 šūnu kultūras tiek uzturētas 37 °C mitrinātā inkubatorā, kas pieslēgts 5 % CO2 padevei. |
|
Uzglabāšana: |
Lai aizsargātu šūnu dzīvotspēju, sasaldētas šūnas parasti uzglabā temperatūrā zem -150 °C vai šķidrā slāpekļa tvaika fāzē. |
|
Sasaldēšanas process un barotne: |
BxPC-3 šūnu kultūru sasaldēšanai var izmantot CM-1 vai CM-ACF. Lai šūnas netiktu pakļautas nekādam šokam, izmanto lēnu sasaldēšanas procesu, kas pieļauj tikai 1 °C temperatūras pazemināšanos. |
|
Atkausēšanas process: |
Sasaldētās BxPC-3 šūnas atkausē iepriekš iestatītā 37 °C ūdens vannā 40 līdz 60 sekundes. Pēc tam, kad ir palicis neliels ledus gabaliņš, šūnām pievieno svaigu barotni un centrifugē, lai atdalītu sasalstošās barotnes elementus. Pēc tam šūnu granulas resuspendē, un šūnas iepilda kolbā augšanai. |
|
Bioloģiskās drošības līmenis: |
BxPC-3 šūnu kultūras tiek uzturētas 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijās. |
3. bxPC-3 šūnu līnija: Priekšrocības un ierobežojumi
BxPC-3 ir labi pazīstama aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas šūnu līnija, kurai ir vairākas priekšrocības un ierobežojumi. Šeit ir uzskaitītas galvenās šūnu līnijas priekšrocības un trūkumi.
Priekšrocības
Galvenās BxPC-3 šūnu priekšrocības ir šādas:
-
Aizkuņģa dziedzera vēža in vitro modelis
BxPC-3 šūnām, kas iegūtas no aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas pacientiem, piemīt atbilstošas īpašības, tāpēc tās ir piemērots modelis aizkuņģa dziedzera vēža uzvedības izpētei in vitro.
-
Audzēju šūnu līnija
BxPC-3 šūnām piemīt tumorogēnas īpašības, un tās var veidot audzējus, injicējot nude vai imūnkompromitētām pelēm. Šie audzēji ļoti līdzinās primārajiem aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas audzējiem, tāpēc BxPC-3 ksenogrāfta modelis ir ideāli piemērots vēža augšanas un progresēšanas pētījumiem.
Ierobežojumi
Ar BxPC-3 šūnu līniju saistītie ierobežojumi ir šādi:
-
Savstarpēja piesārņošana
BxPC-3 šūnu līnija, tāpat kā jebkura cita šūnu līnija, ir saistīta ar krusteniskās kontaminācijas risku. Pētniekiem, strādājot ar šīm šūnām, jāievēro piesardzība un stingri jāievēro piesārņojuma novēršanas protokoli.
-
Lēns augšanas ātrums
BxPC-3 šūnām ir salīdzinoši lēna proliferācija, un to dubultošanās laiks ir no 48 līdz 60 stundām. Šī īpašība var prasīt ilgāku inkubācijas periodu konkrētiem eksperimentiem, kas var kavēt pētniecības progresu.
4. bxPC-3 šūnu pielietojums pētniecībā
BxPC-3 šūnas var plaši izmantot vēža pētījumos. Visizplatītākie lietojumi ir šādi:
- Aizkuņģa dziedzera vēža pētījumi: BxPC-3 šūnas imitē aizkuņģa dziedzera adenokarcinomu, tāpēc tās izmanto, lai izpētītu audzēja attīstības un augšanas ģenētiskos un molekulāros mehānismus. Turklāt, izmantojot šīs šūnas, pētnieki atklāj jaunus biomarķierus un terapeitiskos mērķus. Turklāt BxPC-3 šūnas ievērojami ekspresē angiogēnos faktorus, t. i., interleikīnu-8 (IL-8), prostaglandīnu E2 (PGE2) un asinsvadu endotēlija augšanas faktoru (VEGF), kas padara tās piemērotas angiogēzes izpētei. Angioģenēze ir būtisks process, kas saistīts ar vēža augšanu un metastāžu veidošanos. Pētījumā, kas publicēts 2022. gadā, tika pētīts, ka laminīna-5 gamma-2 (LAMC2) pārmērīga ekspresija BxPC3 PDAC (aizkuņģa dziedzera duktālā adenokarcinoma) pastiprina tās audzēju veidošanos, regulējot BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR signalizācijas ceļu [2].
- Zāļu atklāšana un izstrāde: BxPC-3 šūnu līnija kalpo kā nenovērtējams pretvēža zāļu testēšanas modelis. Pētnieki pēta potenciālo zāļu citotoksisko, pretmetastatisko un apoptozes iedarbību uz BxPC3 PDAC. Aleksandrijas Tērneres (Alexandria Turner) un kolēģu 2020. gadā veiktajā pētījumā tika pētītas Elaeocarpus reticulatus augļu ekstraktu apoptozes īpašības BxPC-3 aizkuņģa dziedzera vēža šūnās [3]. Līdzīgi 2020. gadā tika veikts pētījums, kurā tika noteikts auga Oxialis obtriangulata metanola ekstrakta pretvēža potenciāls BxPC-3 šūnās. Turklāt pētnieki pētīja arī šūnu mehānistisko ceļu, pa kuru augu ekstrakts iedarbojas terapeitiski [4].
5.pētniecības publikācijas par BxPC-3 šūnām
Šajā sadaļā ir uzskaitītas dažas no visvairāk citētajām un interesantākajām publikācijām, kurās izmantota BxPC-3 šūnu līnija.
Licokumarons izraisa BxPC-3 aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas šūnu nāvi, inhibējot DYRK1A
Šajā publikācijā izdevumā Chemico-Biological Interactions (2020) tika pētīta dabiskā produkta likokumrona apoptozes iedarbība uz BxPC-3 aizkuņģa dziedzera vēža šūnām.
Šis pētnieciskais raksts publicēts žurnālā Anticancer Research (2022). Pētījumā ierosināts, ka hidroksihlorhikvīns izraisa BxPC3 šūnu nāvi, inhibējot BCL-XL gēnu.
Šis pētījums tika publicēts 2020. gadā žurnālā Journal of Cellular Biochemistry. Pētījumā norādīts, ka dabiskais savienojums salidrozīds izrāda pretvēža iedarbību BxPC-3 šūnās, regulējot HIF-1α (hipoksiju inducējošo faktoru) un LOXL2 signalizācijas kaskādi.
Šis raksts žurnālā Biomedicine & Pharmacotherapy liecina, ka ibrutinibu var izmantot kā lielisku radiosensibilizatoru aizkuņģa dziedzera vēža pacientiem. In vitro pētījums ar BxPC-3 šūnām liecina, ka tas samazina BxPC3 EGFR fosforilēšanu un pAKT un pakārtoto gēnu ekspresiju, ko regulē radioterapija.
Chelidonīns inducē apoptozi, izmantojot GADD45a-p53 regulāciju cilvēka aizkuņģa dziedzera vēža šūnās
Šajā pētījumā, kas publicēts Integrative Cancer Therapies, ierosināts, ka dabiskais produkts - chelidonīns - iedarbojas apoptotiski uz cilvēka aizkuņģa dziedzera šūnām BxPC-3, regulējot BxPC3 p53 un GADD45a signalizāciju.
6. bxPC-3 šūnu līnijas resursi: Bxxxxxxxx-2 resursu avoti: protokoli, videoklipi un citi resursi
BxPC-3 šūnu līnijai ir daudz aizraujošu priekšrocību, kas padara to piemērotu izmantošanai pētniecībā. Daudzos tiešsaistes resursos par BxPC-3 šūnu līniju minēta tās apstrāde, uzturēšana un transfekcijas protokolss.
- BxPC3 transfekcija: Šajā videomateriālā soli pa solim aprakstīts BxPC-3 šūnu transfekcijas protokols.
Šajā raksta sadaļā ir dažas saites, kurās izskaidroti BxPC3 šūnu kultūras protokoli.
- BxPC3 šūnu kultūras: Šī tīmekļa vietne palīdzēs apgūt protokolus par kriokonservētu un proliferatīvu BxPC-3 kultūru subkulturēšanu un apstrādi.
Atsauces
- Kim, Y., et al., Pankreātiskā dziedzera duktālās adenokarcinomas šūnu līniju salīdzinošā proteomiskā profilēšana. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overexpression of laminin-5 gamma-2 promotes tumorigenesis of pancreatic ductal adenocarcinoma through EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR cascade. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus augļu ekstrakti samazina dzīvotspēju un inducē apoptozi aizkuņģa dziedzera vēža šūnās in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Oxialis obtriangulata pretvēža potenciāls aizkuņģa dziedzera vēža šūnās, regulējot ERK/Src/STAT3 mediēto ceļu. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.