A431 šūnas - padziļināta epidermoīdās karcinomas šūnu analīze dermatoloģiskajos pētījumos

A431 ir cilvēka epidermoīdā vēža šūnu līnija. To plaši izmanto biomedicīniskajos pētījumos, galvenokārt vēža bioloģijā, imūnonkoloģijā un toksikoloģijas pētījumos. Turklāt A431 šūnas pārmērīgi ekspresē EGFR (epidermālā augšanas faktora receptoru), tāpēc tās izmanto kā vērtīgu in vitro modeli, lai pētītu šūnu ciklu un ar vēzi saistītos šūnu signalizācijas ceļus.

Šajā rakstā tiks izskaidroti A431 vēža šūnu līnijas pamati. Jūs uzzināsiet:

A431 šūnas: Vispārīgas īpašības un izcelsme
A431 šūnu līnija: Informācija par kultivēšanu
A431 šūnu līnijas priekšrocības un trūkumi
A431 šūnu izmantošana pētniecībā
Pētniecības publikācijas ar A431 šūnām
A431 šūnu līnijas resursi: Protokoli, videomateriāli un citi resursi

1. A431 šūnas: Vispārīgas īpašības un izcelsme

Šī raksta sadaļa palīdzēs jums uzzināt vispārīgu informāciju par A431 šūnu līniju, kas jums jāzina pirms darba ar to. Piemēram, kāda ir A431 šūnu līnijas izcelsme? Kādas ir A431 šūnu līnijas īpašības? Kāda ir A431 šūnu morfoloģija? No kurienes nāk A431 šūnas?

A431 ir cilvēka ādas vēža šūnu līnija, kas iegūta no 85 gadus vecas epidermoīdā karcinoma slimnieces epidermas [1]. To izveidoja D.J. Giard u.c., kas izstrādāja daudzas citas šūnu līnijas no cietiem audzējiem.
A-431 šūnām ir epitēlija morfoloģija. Tās apvienojas un veido šūnu kopas.
Ādas vēža šūnu līnija a431 ir hipertriploīda. Šīs šūnu līnijas modālais hromosomu skaits ir 74, kas sastopams aptuveni 36 % šūnu. Aptuveni 1 % šūnu populācijas ir arī augstākas ploīdijas.

Audzējs, kas aug zem ādas un infiltrē zemādas audus.

2.a431 šūnu līnija: Informācija par kultivēšanu

Zinot šūnu līnijas šūnu kultivēšanas prasības un procedūras, var atvieglot tās apstrādi. Šī raksta daļa palīdzēs jums uzzināt galvenos A431 šūnu līnijas kultivēšanas punktus. Piemēram, uzzināsiet, kāds ir A431 šūnu dubultošanās laiks? Vai A431 vēža šūnu līnija ir adherenta? Kādu barotni izmanto A431 augšanai?

A431 šūnu kultivēšanas galvenie punkti

Dubultošanās laiks:	A431 šūnu populācijas dubultošanās laiks ir no 80 līdz 100 stundām.
Adhēzijas vai suspensijas veidā:	A431 ir adherentu šūnu līnija.
Sēšanas blīvums:	a431 šūnu līnijai ideāli piemērots šūnu blīvums ir 1 x¹⁰⁴ ^šūnas/cm2. Šāda blīvuma šūnām ir nepieciešamas gandrīz 4 dienas, lai tās kļūtu saplūstošas. Adherētās šūnas mazgā ar PBS (1x) un inkubē ar Accutase pasāžas šķīdumu. Pēc tam šūnas resuspendē barotnē un centrifugē. Novāktās šūnas atkal resuspendēja un iepildīja jaunās kolbās audzēšanai.
Augšanas barotne:	A431 šūnu līnijas kultivēšanai izmanto DMEM barotni, kas papildināta ar 10 % fetālā liellopu seruma, 4,5 g/l glikozes, 1,0 mM nātrija piruvāta, 1,5 g/l NaHCO3 un 4 mM L-Glutamīna. Barotne jāmaina ik pēc 2 līdz 3 dienām nedēļā.
Augšanas apstākļi:	A431 vēža šūnas audzē mitrinātā inkubatorā, kas aprīkots ar 5% CO2 avotu, 37 °C temperatūrā.
Uzglabāšana:	Šūnu līniju var uzglabāt elektriskā saldētavā vai šķidrā slāpekļa tvaika fāzē temperatūrā, kas zemāka par -150 °C, jo tas palīdz aizsargāt šūnu dzīvotspēju.
Saldēšanas process un vide:	CM-1 vai CM-ACF ir divas ļoti ieteicamas sasaldēšanas barotnes, ko izmanto A431 šūnām. Šūnas sasaldē, izmantojot lēnas sasaldēšanas metodi, kas ļauj temperatūrai samazināties tikai par 1 grādu minūtē.
Atkausēšanas process:	A431 sasaldētās šūnas atkausē 37 °C ūdens vannā, kas satur antimikrobiālu līdzekli, 40 līdz 60 sekundes. Kad ir palicis tikai neliels ledus gabaliņš, šūnas pievieno barotnei un centrifugē. Novāktās šūnas resuspendē un ielej audzēšanas kolbās.
Bioloģiskās drošības līmenis:	A431 kultūru apstrādei un uzturēšanai ir ieteicams pirmais bioloģiskās drošības līmenis.

A-431 sferoīdi ar dažādu šūnu blīvumu.

3.a431 šūnu līnijas priekšrocības un trūkumi

A431 šūnu līnijai piemīt atšķirīgas īpašības, un tai ir vairākas priekšrocības un trūkumi. Turpmāk mēs esam apkopojuši dažas no tām.

Priekšrocības

A431 vēža šūnu līnijas galvenās priekšrocības ir šādas:

EGFR hiperekspresija	A431 šūnas pārmērīgi ekspresē epidermālā augšanas faktora receptoru (EGFR). Tās kalpo kā pozitīva kontrole, lai pētītu EGFR signalizāciju un tās ietekmi uz vēzi. Tās izmanto arī jaunu vēža terapiju novērtēšanai.
Tumorigenicitāte	A431 šūnas ir tumorogēnas un spēj veidot audzējus. Tās var izmantot, lai izstrādātu ksenogrāfta vēža modeļus, kas ir vērtīgi instrumenti audzēju augšanas dinamikas izpētei un jaunu vēža ārstēšanas metožu novērtēšanai.

Trūkumi

A431 šūnu trūkumi ir šādi:

Ģenētiskas anomālijas	A431 ir vēža šūnu līnija, kurā ir ģenētiskas mutācijas un izmaiņas, kas var atšķirties no sākotnējām audzēja īpašībām.
Mikrobioloģiskais piesārņojums	A431 ir pakļauta mikrobiālajam piesārņojumam, galvenokārt baktēriju piesārņojumam. Tomēr standarta aseptisku kultivēšanas apstākļu ievērošana var palīdzēt novērst šādu piesārņojumu A431 šūnu kultūrās.

430,00 €*

Saturs: 1.5 milliliter

Cenas bez nodokļiem un piegādes izmaksām

cryovial

Produkta numurs: 300112

4. A431 šūnu izmantošana pētniecībā

A431 šūnu līniju plaši izmanto vēža pētījumos. Šeit ir uzskaitīti daži daudzsološi šīs ādas vēža šūnu līnijas lietojumi. Vēža bioloģija: Ādas vēža šūnu līnija A431 ir lielisks pētniecības rīks, lai pētītu vēža augšanas, attīstības, metastāžu veidošanās un invāzijas šūnu un molekulāros mehānismus.

Pētnieki ir plaši izmantojuši šo šūnu līniju, lai intensīvi pētītu šūnu signalizācijas ceļus, kas saistīti ar dažādiem vēža šūnu procesiem. Piemēram, 2018. gadā veiktajā pētījumā tika izpētīts, ka PI3K/AKT/mTOR signalizācijas ceļš ir iesaistīts vēža šūnu proliferācijā un šī ceļa inhibīcija izraisa apoptozi ādas audzēja A431 šūnās [2]. Turklāt citā pētījumā arī ziņots par PI3K/AKT/mTOR ceļa ieguldījumu ādas vēža šūnu metastāzēšanā un epitēlija pārejā no epitēlija uz mezenhīmu (EMT), norādot uz tā būtisko lomu vēža attīstībā un progresēšanā [3]. Zāļu testēšana un novērtēšana: A431 šūnas izmanto, lai novērtētu potenciālo pretvēža zāļu kandidātvielu iedarbīgumu un efektivitāti. Pētnieki noteica zāļu ietekmi uz vēža šūnu proliferāciju, metastāzēm, invazi un apoptozi, veicot vairākus laboratorijas eksperimentus - pētījumus, ko veica Nurhidayah Ab. Rahims un kolēģi izmantoja A431 šūnas un novērtēja biogēniskā ceļā sintezēta Alstonia angustiloba auga sudraba nanodaļiņu terapeitisko potenciālu 2022. Rezultāti atklāja, ka angustiloba-AgNP iedarbojas antiproliferatīvi uz ādas plakanās karcinomas šūnām [4]. Audzēju ksenogrāfta modeļi: A431 šūnu līnija ir tumorogēna un var veidot audzējus, ja to inokulē peļu modelī. Tādējādi tā ir noderīgs rīks peļu ksenotaugu modeļu izstrādei, lai pētītu vēža bioloģiju in vivo. Vairākos pētījumos ir izmantota A431 vēža šūnu līnija, lai izstrādātu audzēju ksenogrāfta modeļus. Piemēram, Yu Jin Lim un viņa komanda, izmantojot A431 šūnas, izstrādāja ādas audzēja ksenografta peļu modeli, lai novērtētu eksogēnā epidermālā augšanas faktora (EGF) pretvēža un radiosensitizējošo iedarbību in vivo [5]. 5. Pētījumi, kas veikti ar A431 šūnām, ir balstīti uz pētījumiem, kas veikti ar A431 šūnām. Pētniecības publikācijas, kurās izmantotas A431 šūnas Šeit ir uzskaitītas dažas nozīmīgas pētniecības publikācijas, kurās izmantota A431 ādas karcinomas šūnu līnija. Ar biopolimēru PVA-AuNPs un PCL-kurkumīna uzlādētu elektrospūnu nanošķiedru efektivitāte un to pretvēža aktivitāte pret A431 ādas vēža šūnu līniju Šis raksts tika publicēts 2020. gadā Materials Today Communications. Pētījumā tika novērtēts poli-ε-kaprolaktona ar kurkumīnu piekrautu elektrospūnu nanošķiedru un polivinilspirta-AuNPs pretvēža potenciāls pret A431 vēža šūnām. miRNA-221 veicina ādas plakanšūnu karcinomas progresēšanu, vēršoties pret PTEN Šajā pētījumā, kas publicēts Cellular & Molecular Biology Letters (2019), ierosināts, ka mikroRNA-221 ir onkogēna loma ādas plakanšūnu karcinomā, vēršoties pret PTEN gēnu. Vinkristīns no sēnītes Eutypella spp-CrP14, kas izolēts no Catharanthus roseus, inducē apoptozi cilvēka plakanas karcinomas šūnu līnijā A431 Šis pētījums BMC Complementary Medicine and Therapies (2016) liecina, ka vinkristīns, sekundārais metabolīts, kas izolēts no sēnītes Eutypella spp - CrP14, inducē apoptozi A431 šūnās. CDC42SE1 pārmērīga ekspresija A431 šūnās samazināja šūnu proliferāciju, inhibējot Akt ceļu Šis pētījums tika publicēts 2019. gadā žurnālā Cells. Šajā pētījumā CDC42SE1 gēns tika ierosināts kā svarīgs ādas vēža progresēšanas biomarķieris, jo tā lejupregulācija veicina audzēju rašanos. Metformīns inhibē A431 šūnu proliferāciju, modulējot PI3K/Akt signalizācijas ceļu Šis pētījums tika publicēts 2015. gadā žurnālā Experimental and therapeutic medicine. Tajā tika ierosināts, ka metformīns nomāc ādas vēža šūnu līnijas a431 proliferāciju, regulējot PI3K/Akt signalizācijas ceļu. 6. Pētījumā tika konstatēts, ka metformīns nomāc ādas vēža šūnu līnijas a431 proliferāciju. A431 šūnu līnijas resursi: Šeit ir daži tiešsaistes resursi, kuros aprakstīta A431 ādas vēža šūnu līnija. A-431 šūnu transfekcija: Šajā saitē ir sniegta soli pa solim aprakstīta A431 vēža šūnu transfekcijas metode. Šajā saitē ir sniegta informācija par A431 šūnu šūnu kultūru. A431 vēža šūnu līnija: Šajā saitē ir sniegta nepieciešamā informācija par A431 šūnu līniju. Tā ietver barotnes, šūnu blīvumu, rīcību ar kriokonservētām un proliferatīvām kultūrām u. c. A431 šūnu kultivēšana: Šajā tīmekļa vietnē ir īss A431 šūnu līnijas kultivēšanas protokols.

Atsauces:

Quadri, M., et al., Pētījumi par ādas plakanšūnu karcinomu in vitro un in vivo: jauni 3D rīki un dzīvnieku modeļi. Front Med (Lozanna), 2022. 9: p. 875517.

Zeng, N., et al., Anticancer activity of caffeic acid n-butyl ester against A431 skin carcinoma cell line comes via induction of apoptosis and inhibition of the mTOR/PI3K/AKT signaling pathway Retraction in/10.3892/mmr. 2021.12011.

Molecular medicine reports, 2018. 17(4): p. 5652-5657.

Rahaman, A., et al., Eucalyptol target PI3K/Akt/mTOR pathway to inhibit skin cancer metastasis.

Carcinogenesis, 2022. 43(6): p. 571-583. Rahim, N.A., et al., Investigation of antiproliferative mechanisms of Alstonia angustiloba-silver nanoparticles in skin squamous cell carcinoma (A431 cell line).

Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: p. 131814. Lim, Y.J., et al., Tumor growth suppression and enhanced radioresponse by an exogenous epidermal growth factor in mouse xenograft models with A431 cells.

Cancer Research and Treatment: Official Journal of Korean Cancer Association, 2015. 47(4): p. 921-930.