EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS

Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) ir viena no visplašāk izmantotajām pamatbarotnēm dažādu zīdītāju šūnu, jo īpaši adhezīvo šūnu līniju, kultivēšanai. Šo klasisko preparātu, ko sākotnēji izstrādāja Harijs Īgls (Harry Eagle), veido neaizvietojamās aminoskābes, vitamīni un neorganiskie sāļi, kas nepieciešami gan primāro šūnu, gan izveidoto šūnu līniju augšanai standarta kultivēšanas apstākļos.

Šis lietošanai gatavs, sterili filtrēts šķidrais preparāts ir papildināts ar Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS), 2 mM L-glutamīnu, D-glikozi (1,0 g/l) un 2,2 g/l nātrija bikarbonātu (NaHCO₃), tādējādi padarot to piemērotu lietošanai CO₂ kontrolētā inkubatora vidē (parasti 5 % CO₂). Iekļautais fenolsarkans darbojas kā pH indikators, ļaujot ērti vizuāli uzraudzīt barotnes stāvokli šūnu kultivēšanas laikā.

Galvenās īpašības

• Klasiskais Eagle MEM sastāvs ar Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS)
• Iekļauts 2 mM L-glutamīns – gatavs tūlītējai lietošanai
• 2,2 g/l nātrija bikarbonāta – buferēts 5 % CO₂ inkubācijai
• Ar D-glikozi (1,0 g/l) kā galveno oglekļa avotu
• Ar fenolsarkano kā pH indikatoru
• Bez HEPES un bez nātrija piruvāta
• Sterili filtrēta šķidrā barotne, gatava lietošanai
• pH 7,0 – 7,6

Tipiski pielietojumi

EMEM atbalsta dažādu zīdītāju šūnu līniju kultivēšanu, tostarp HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 un daudzas primārās šūnas. Tipiski pielietojumi ietver:

• Adhezīvo šūnu līniju ikdienas uzturēšana un pavairošana
• Vīrusu pavairošana un vakcīnu ražošanas procesi
• Citotoksicitātes un bioanalīžu lietojumi
• Transfekcijas un proteīnu ekspresijas pētījumi
• Pamatpētījumi šūnu bioloģijā un molekulārajā bioloģijā

Optimālai šūnu augšanai EMEM parasti papildina ar 5–10 % teļa seruma (FBS) un, atkarībā no šūnu līnijas, ar neesamajām aminoskābēm (NEAA) un antibiotikām, piemēram, penicilīnu/streptomicīnu.

Rīkošanās un uzglabāšana

Neatvērtu pudeli uzglabājiet +2 °C līdz +8 °C temperatūrā, aizsargājot no gaismas. Pēc atvēršanas lietojiet aseptiskos apstākļos. L-glutamīns šķīdumā pakāpeniski sadalās – lai nodrošinātu labāko rezultātu, ieteicams izmantot barotni 4 nedēļu laikā pēc atvēršanas vai, ja tā tiek uzglabāta ilgāku laiku, pirms lietošanas papildināt ar svaigu L-glutamīnu. Pirms pievienošanas šūnām ļaujiet barotnei iesilt līdz 37 °C.

Kvalitāte

Ražots saskaņā ar stingriem kvalitātes standartiem. Katra partija tiek pārbaudīta uz sterilitāti, pH, osmolalitāti un endotoksīnu līmeni, lai nodrošinātu stabilu darbību šūnu kultūru lietojumos.

Produkta specifikācijas

Sastāvs (sastāvs uz litru)