DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM:Ham's F12 ir plaši atzīta un bieži izmantota pamata barotne šūnu kultūrās bioloģiskajos pētījumos. Tā kalpo kā galvenais barības vielu avots dažādu zīdītāju šūnu līniju augšanai, jo īpaši, ja tai pievieno teļa augļa serumu (FBS).
Šī unikālā formula apvieno Dulbecco modificēto Eagle barotni (DMEM) un Ham's F-12 (Ham's barības vielu maisījumu F-12) precīzā 1:1 attiecībā. L-glutamīna pievienošana vēl vairāk uzlabo tās sastāvu.
DMEM, kas ir atvasināts no Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), salīdzinājumā ar savu priekšteci piedāvā paaugstinātu aminoskābju un vitamīnu koncentrāciju. Savukārt Ham's F-12 ir balstīts uz Ham's F-10 barotni, nodrošinot papildu nepieciešamo komponentu kopumu.
Lai atbalstītu optimālu šūnu augšanu, parasti DMEM:Ham's F12 papildina ar FBS tipiskā koncentrācijā 5–10 %. Šī piedeva ir nepieciešama, jo barotnē trūkst augšanas hormonu, lipīdu un proteīnu, kas ir būtiski šūnu attīstībai.
DMEM:Ham's F12 satur pH buferu sistēmu un bieži tiek papildināts ar fenola sarkano, kas ir pH indikators. Kultivētām šūnām DMEM:Ham's F12 vai jebkurā vidē, kurā izmanto bikarbonāta buferu sistēmu, ir nepieciešama kontrolēta CO2 vide 5–10 % līmenī, lai uzturētu atbilstošu pH līmeni.
Kvalitātes kontrole
- Sterili filtrēts
Uzglabāšana un derīguma termiņš
- Uzglabāt +2 °C līdz +8 °C temperatūrā, aizsargājot no gaismas.
- Pēc atvēršanas uzglabāt 4 °C temperatūrā un izlietot 6–8 nedēļu laikā.
Piegādes nosacījumi
- Vides temperatūra
Uzglabāšana
- Uzglabāt ledusskapī +2 °C līdz +8 °C temperatūrā, aizsargājot no gaismas. Izvairieties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37 °C, jo tas samazina produkta kvalitāti.
- Nesildiet barotni virs 37 °C un nelietojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis.
- Ja jāizmanto tikai daļa no barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai.
Sastāvs
| Kategorija | Sastāvdaļas | Koncentrācija (mg/l) |
| Aminoskābes | Glicīns | 18,75 |
| L-alanīns | 4,45 | |
| L-arginīna HCl | 147,50 | |
| L-asparagīns H₂O | 7,50 | |
| L-asparagīnskābe | 6,65 | |
| L-cisteīns HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cistīns 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutamīnskābe | 7,35 | |
| L-glutamīns | 365,00 | |
| L-histidīna HCl H₂O | 31,48 | |
| L-izoleicīns | 54,47 | |
| L-leicīns | 59,05 | |
| L-lizīna HCl | 91,25 | |
| L-metionīns | 17,24 | |
| L-fenilalanīns | 35,48 | |
| L-prolīns | 17,25 | |
| L-serīns | 26,25 | |
| L-treonīns | 53,45 | |
| L-triptofāns | 9,02 | |
| L-tirozīns 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valīns | 52,85 | |
| Vitamīni | D-biotīns | 0,0035 |
| Holīna hlorīds | 8,98 | |
| D-kalcija pantotenāts | 2,24 | |
| Folijskābe | 2,66 | |
| mio-inozitols | 12,60 | |
| Nikotinamīds | 2,02 | |
| Piridoksīna HCl | 0,031 | |
| Piridoksāls HCl | 2,00 | |
| Riboflavīns | 0,219 | |
| Tiamīna HCl | 2,17 | |
| Vitamīns B12 | 0,68 | |
| Neorganiskie sāļi | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na2HPO4 | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Citi komponenti | D-glikoze | 3151,00 |
| Hipoksantīns | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolskābe | 0,042 | |
| Lipoiskā skābe | 0,105 | |
| Fenola sarkanais nātrija sāls | 8,63 | |
| Putrescīns 2 HCl | 0,081 | |
| Nātrija piruvāts | 55,00 | |
| Timidīns | 0,365 |