DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM:Ham’s F12 ir plaši atzīta un bieži izmantota pamata barotne šūnu kultūrās bioloģiskajos pētījumos. Tā kalpo kā galvenais barības vielu avots dažādu zīdītāju šūnu līniju augšanai, it īpaši, ja tai pievieno teļa embriju serumu (FBS).
Šī unikālā formula precīzā 1:1 attiecībā apvieno Dulbecco modificēto Eagle barotni (DMEM) un Hama F-12 (Hama barības vielu maisījumu F-12). L-glutamīna pievienošana vēl vairāk uzlabo tās sastāvu.
DMEM, kas izstrādāts, pamatojoties uz Eagle’s Minimal Essential Medium (EMEM), salīdzinājumā ar savu priekšteci piedāvā paaugstinātu aminoskābju un vitamīnu koncentrāciju. Savukārt Ham’s F-12 ir balstīts uz Ham’s F-10 barotni, nodrošinot papildu nepieciešamo sastāvdaļu kopumu.
Lai nodrošinātu optimālu šūnu augšanu, parasti DMEM:Ham’s F-12 papildina ar FBS, parasti 5–10 % koncentrācijā. Šis papildinājums ir nepieciešams, jo barotnē trūkst augšanas hormonu, lipīdu un proteīnu, kas ir būtiski šūnu attīstībai.
DMEM:Ham’s F12 satur pH buferu sistēmu un to bieži papildina ar fenolsarkano — pH indikatoru. Kultivētām šūnām DMEM:Ham’s F12 vidē vai jebkurā citā vidē, kurā izmanto bikarbonāta buferu sistēmu, ir nepieciešama kontrolēta CO₂ vide (5–10 %), lai uzturētu atbilstošu pH līmeni.
Kvalitātes kontrole
- Sterili filtrēts
Uzglabāšana un derīguma termiņš
- Uzglabāt +2 °C līdz +8 °C temperatūrā, pasargājot no gaismas.
- Pēc atvēršanas uzglabāt 4 °C temperatūrā un izlietot 6–8 nedēļu laikā.
Piegādes nosacījumi
- Vides temperatūra
Uzglabāšana
- Uzglabājiet ledusskapī +2°C līdz +8°C temperatūrā tumsā. Izvairieties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37°C, jo tas samazina produkta kvalitāti.
- Nesildiet barotni virs 37 °C un neizmantojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis.
- Ja jāizmanto tikai daļa no barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai.
Sastāvs
| Kategorija | Sastāvdaļas | Koncentrācija (mg/l) |
| Aminoskābes | Glicīns | 18,75 |
| L-alanīns | 4,45 | |
| L-arginīna HCl | 147,50 | |
| L-asparagīns H₂O | 7,50 | |
| L-asparagīnskābe | 6,65 | |
| L-cisteīns HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cistīns 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutamīnskābe | 7,35 | |
| L-glutamīns | 365,00 | |
| L-histidīna HCl H₂O | 31,48 | |
| L-izoleicīns | 54,47 | |
| L-leicīns | 59,05 | |
| L-lizīna HCl | 91,25 | |
| L-metionīns | 17,24 | |
| L-fenilalanīns | 35,48 | |
| L-prolīns | 17,25 | |
| L-serīns | 26,25 | |
| L-treonīns | 53,45 | |
| L-triptofāns | 9,02 | |
| L-tirozīns 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-valīns | 52,85 | |
| Vitamīni | D-biotīns | 0,0035 |
| Holīna hlorīds | 8,98 | |
| D-kalcija pantotenāts | 2,24 | |
| Folijskābe | 2,66 | |
| mio-inozitols | 12,60 | |
| Nikotinamīds | 2,02 | |
| Piridoksīna HCl | 0,031 | |
| Piridoksāls HCl | 2,00 | |
| Riboflavīns | 0,219 | |
| Tiamīna HCl | 2,17 | |
| B12 vitamīns | 0,68 | |
| Neorganiskie sāļi | CaCl₂ 2 H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄ 7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄ · 2 H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0,432 | |
| Citas sastāvdaļas | D-glikoze | 3151,00 |
| Hipoksantīns | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolskābe | 0,042 | |
| Lipoiskā skābe | 0,105 | |
| Fenola sarkanais nātrija sāls | 8,63 | |
| Putrescīns 2 HCl | 0,081 | |
| Nātrija piruvāts | 55,00 | |
| Timidīns | 0,365 |