HEK293T/17-Zellen
Allgemeine Informationen
Beschreibung | Die Zelllinie 293T/17 ist eine immortalisierte Variante der HEK293-Linie, die von menschlichen embryonalen Nierenzellen abstammt und in der Forschung, insbesondere bei der Untersuchung und Herstellung von retroviralen und lentiviralen Vektoren, intensiv genutzt wird. Diese Zelllinie wurde so modifiziert, dass sie das SV40 large T-Antigen exprimiert, was ihre Nützlichkeit bei der Herstellung viraler Vektoren erhöht. Die Expression des großen SV40-T-Antigens ist eine Schlüsseleigenschaft, die es diesen Zellen ermöglicht, Plasmide zu replizieren, die den SV40-Replikationsursprung enthalten, wodurch die Ausbeute an Plasmid-DNA bei transienten Transfektionsverfahren erheblich gesteigert wird. Diese Eigenschaft ist besonders vorteilhaft für die Herstellung von viralen Vektoren. 293T/17-Zellen sind für die Produktion von viralen Vektoren wie Retroviren und Lentiviren unerlässlich. Aufgrund ihrer Fähigkeit, transfizierte Plasmide zu amplifizieren und die virale Assemblierung und Freisetzung zu unterstützen, produzieren sie effizient virale Partikel. Dies macht sie zu einem wichtigen Instrument in der Gentherapieforschung, wo diese Vektoren verwendet werden, um genetisches Material in Wirtszellen einzubringen. Die Zellen weisen eine hohe Transfektionseffizienz auf, die für die erfolgreiche Einführung und Expression von Fremd-DNA bei der Konstruktion von Vektoren entscheidend ist. Diese hohe Effizienz ermöglicht die Untersuchung der Genfunktion und die effektive Herstellung rekombinanter Proteine. Die robusten Eigenschaften der Zelllinie 293T/17 machen sie sowohl für die wissenschaftliche Grundlagenforschung als auch für therapeutische Anwendungen unersetzlich. Sie wird in der Molekularbiologie und Gentechnik häufig für die Proteinexpression, die Analyse von Genfunktionen und die Entwicklung neuer Gentherapien eingesetzt. Die Effizienz der Zelllinie bei der Herstellung viraler Vektoren erleichtert Experimente, bei denen genetisches Material zugeführt werden muss, und macht sie zu einem Eckpfeiler auf dem Gebiet der Virologie. Die Zelllinie 293T/17 spielt weiterhin eine zentrale Rolle bei der Erforschung der Genfunktion und der Entwicklung von therapeutischen Maßnahmen. |
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Organismus | Menschen |
Gewebe | Embryonale Niere |
Anwendungen | Diese Zelllinie ist eine optimale Wahl für Transfektion, Hochdurchsatz-Screening, Toxikologie und Impfstoffentwicklung. |
Synonyme | HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17 |
Merkmale
Alter | Fötus |
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Geschlecht | Weiblich |
Morphologie | Epithelial |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | HEK293T/17 (Cytion Katalognummer 305117) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Expression / Mutation
Antigenexpression | SV40 T-Antigen |
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Viren | SV40 (exprimiert das SV40 T-Antigen) |
Handhabung
Nährboden | DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a) |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1:2 bis 1:4 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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STR profile |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 11,12
D13S317: 12,14
D16S539: 9,13
D5S818: 8,9
D7S820: 11
TH01: 7,9.3
TPOX: 11
vWA: 16,19
D3S1358: 15,16,17
D21S11: 28,30.2
D18S51: 17,18
Penta E: 7,15
Penta D: 9,1
D8S1179: 11,12,14
FGA: 23
D6S1043: 11
D2S1338: 19
D12S391: 19,21
D19S433: 18
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