Accutase-Lösung zur Zellablösung – 100 ml
Accutase-Zellablösungslösung mit EDTA und Phenolrot – 100 ml
Accutase ist eine gebrauchsfertige, steril gefilterte Zellablösungslösung, die als schonende Alternative zu Trypsin/EDTA entwickelt wurde, um adhärente Säugetierzellen von Standard-Gewebekultur-Kunststoffgefäßen und adhäsionsbeschichteten Oberflächen zu lösen. Sie kombiniert proteolytische und kollagenolytische Enzymaktivität in einer ausgewogenen Salzlösung, um eine effektive und dennoch kontrollierte Dissoziation zu ermöglichen, wobei die Zelloberflächenproteine erhalten bleiben und eine hohe Lebensfähigkeit nach der Passagierung sowie eine schnelle Wiederanhaftung unterstützt werden.
Die Accutase-Formulierung basiert auf Dulbecco’s phosphatgepufferter Kochsalzlösung (DPBS) mit EDTA und Phenolrot als visuellem pH-Indikator. Die Enzyme sind nicht-säugetierischen und nicht-bakteriellen Ursprungs, wodurch sich Accutase besonders gut für die Stammzellenforschung, Impfstoff-Workflows und alle Anwendungen eignet, bei denen Kontaminationen tierischen oder mikrobiellen Ursprungs minimiert werden müssen. Die Lösung hemmt sich bei 37 °C selbst, sodass nach der Ablösung kein Neutralisationsreagenz oder serumhaltiges Medium erforderlich ist – die Zellen können direkt in frisches Medium überführt werden.
Hauptmerkmale
- Gebrauchsfertige 1x steril gefilterte Flüssigkeit – keine Verdünnung oder Rekonstitution erforderlich
- Kombinierte proteolytische und kollagenolytische Enzymaktivität für eine schonende Dissoziation
- Jede Charge ist auf eine definierte Dissoziationsaktivität standardisiert, um eine Chargenkonsistenz zu gewährleisten
- Enzyme nicht-mammalierischer und nicht-bakterieller Herkunft
- Autoinhibiert bei 37 °C – keine Neutralisationslösung erforderlich
- Formuliert in Dulbecco’s PBS mit EDTA
- Phenolrot als visueller pH-Indikator enthalten
- pH 6,8 – 7,8
Typische Anwendungen
Accutase löst eine Vielzahl von adhärenten und empfindlichen Zelltypen schonend auf, darunter humane embryonale Stammzellen (hESCs), humane induzierte pluripotente Stammzellen (iPSCs), neurale Stammzellen, primäre Neuronen sowie routinemäßig kultivierte adhärente Zelllinien wie HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 und A549. Typische Anwendungsfälle sind:
- Routinemäßige Subkultur und Passagierung von adhärenten Säugetierzellen
- Schonende Einzelzell-Dissoziation von hESCs, iPSCs und anderen empfindlichen Zelllinien
- Probenvorbereitung für Durchflusszytometrie und FACS-Analyse
- Analyse von Zelloberflächenmarkern, bei denen die Epitopintegrität entscheidend ist
- Assays zur Zellmigration, Proliferation und Apoptose
- Quieszenztests durch Serumentzug und Onkogen-Transfektionsstudien
- Migrationsassays für Tumorzellen und Neuralleistenzellen
- Produktionsskalierung in Bioreaktor-Workflows
Für Routinearbeiten etwa 10 ml Accutase pro 75 cm² Kulturfläche auftragen und 5–10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren. Die optimale Inkubationszeit sollte für jede Zelllinie bestimmt werden und eine Stunde nicht überschreiten. Vor der Zugabe die Zellschicht mit einer Ca²⁺/Mg²⁺-freien Salzlösung wie DPBS ohne Calcium und Magnesium spülen, um Serumrückstände und zweiwertige Kationen zu entfernen.
Handhabung und Lagerung
Lagern Sie die ungeöffnete Flasche tiefgefroren bei -15 °C oder darunter. Tauen Sie das Produkt entweder bei Raumtemperatur oder über Nacht bei +2 °C bis +8 °C auf. Tauen Sie Accutase nicht in einem 37 °C warmen Wasserbad auf, da erhöhte Temperaturen die Enzymaktivität verringern. Nach dem Auftauen kann die Lösung bis zu 2 Monate bei +2 °C bis +8 °C gelagert werden; lagern Sie sie nicht bei Raumtemperatur. Das Reagenz vor der Anwendung nicht auf 37 °C vorwärmen – es direkt bei Raumtemperatur zu den gewaschenen Zellen geben. Für eine lange Haltbarkeit wird die Aufteilung in Einmalaliquots empfohlen, um wiederholte Auftauzyklen zu vermeiden. Arbeiten Sie stets unter aseptischen Bedingungen.
Qualität
Hergestellt unter strengen Qualitätsstandards. Jede Charge von Accutase wird steril gefiltert und auf Sterilität, pH-Wert, Aussehen und Dissoziationsaktivität geprüft, um eine konsistente, reproduzierbare Leistung von Charge zu Charge zu gewährleisten.
Produktspezifikationen
| Spezifikation | Detail |
|---|---|
| Produkttyp | Reagenz zur Zellablösung/Dissoziation |
| Format | Steril gefilterte Flüssigkeit, gebrauchsfertig |
| Volumen | 100 ml |
| Arbeitskonzentration | 1x (gebrauchsfertig) |
| Enzymaktivität | Kombiniert proteolytisch und kollagenolytisch |
| Enzymherkunft | Nicht-säugetierisch und nicht-bakteriell |
| Puffersystem | Dulbecco’s PBS mit EDTA |
| pH-Indikator | Phenolrot |
| pH-Bereich | 6,8 – 7,8 |
| Aussehen | Klare, hellrote bis orangefarbene Lösung |
| Lagertemperatur | -15 °C oder darunter |
| Haltbarkeit nach dem Auftauen | Bis zu 2 Monate bei +2 °C bis +8 °C |
| Empfohlenes Verwendungsvolumen | ~10 ml pro 75 cm² Kulturfläche |
| Typische Inkubationszeit | 5 – 10 Minuten bei Raumtemperatur |
| Versandbedingungen | Gefroren auf Trockeneis |
| Verwendungszweck | Nur für Forschungszwecke und zur Weiterverarbeitung |
Formulierung (Zusammensetzung pro Liter)
| Komponente | Konzentration (mg/l) |
|---|---|
| Anorganische Salze | |
| Natriumchlorid (NaCl) | 8000,00 |
| Dinatriumhydrogenphosphat (Na₂HPO₄) | 1150,00 |
| Kaliumchlorid (KCl) | 200,00 |
| Kaliumdihydrogenphosphat (KH₂PO₄) | 200,00 |
| Sonstige Bestandteile | |
| EDTA · 4Na (Tetranatrium-EDTA) | 220,00 |
| Phenolrot | 3,00 |
| Proprietäre Enzymmischung (proteolytische und kollagenolytische Aktivität) | 1x |
Accutase ist eine eingetragene Marke von Innovative Cell Technologies, Inc.