Tế bào U87MG - Nghiên cứu u nguyên bào thần kinh đệm (glioblastoma) sử dụng dòng tế bào U87MG và tác động của nó đối với các nghiên cứu về ung thư não

U-87 MG, dòng tế bào u não nguyên phát ở người, được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu sinh học. Đặc biệt, các tế bào này được ứng dụng trong các lĩnh vực thần kinh học và miễn dịch ung thư.

Đặc điểm chung và nguồn gốc của dòng tế bào U-87 MG

Phần này sẽ trình bày về nguồn gốc và các đặc điểm chung của dòng tế bào U87. Bạn sẽ tìm hiểu: Tế bào U-87 MG là gì? Tế bào U87 có nguồn gốc từ đâu? Viết tắt đầy đủ của U-87 MG là gì? Kích thước của tế bào U87 là bao nhiêu? Hình thái của dòng tế bào U87 như thế nào?

• Dòng tế bào U87 là một dòng tế bào u glioblastoma, u astrocytoma. Dòng tế bào này được thiết lập vào năm 1966 tại Đại học Uppsala. Các tế bào này được lấy từ một nam giới da trắng 44 tuổi mắc bệnh u nguyên bào thần kinh đệm. Dòng tế bào này có tên chính thức là U 87 MG, viết tắt của Uppsala 87 Malignant Glioma.
• Các tế bào U 87 MG có hình thái giống tế bào biểu mô.
• Kích thước của tế bào U 87 MG dao động từ 12 đến 14 µm đường kính.
• Dòng tế bào u não glioblastoma ở người này là dòng tế bào hypodiploid và có số nhiễm sắc thể trung bình là 44 ở khoảng 48% quần thể tế bào. Tuy nhiên, các mức độ ploid cao hơn cũng tồn tại ở 5,9% quần thể tế bào.

Thông tin về nuôi cấy tế bào U-87 MG

Trước khi làm việc với tế bào U87MG, bạn nên tìm hiểu các điểm chính sau đây về việc nuôi cấy các tế bào u não glioblastoma này. Đặc biệt, bạn cần biết: Thời gian nhân đôi dân số của tế bào U87MG là bao lâu? Loại môi trường nuôi cấy nào được sử dụng cho tế bào U87MG? Mật độ gieo tế bào của dòng tế bào U-87 MG là bao nhiêu?

Các điểm chính về nuôi cấy tế bào U-87 MG

Thời gian nhân đôi quần thể:

Tế bào U 87 MG có thời gian nhân đôi quần thể dao động từ 18 đến 38 giờ.

Dính hoặc lơ lửng:

U 87 MG là dòng tế bào bám dính. Các tế bào có hình dạng thuôn dài và phát triển thành lớp đơn.

Mật độ gieo tế bào:

Dòng tế bào u não đa hình U 87 MG được khuyến nghị gieo với mật độ 1 x 10^⁴ tế bào/cm². Các tế bào U87 bám dính được rửa bằng dung dịch PBS 1× và ủ với dung dịch Accutase. Sau đó, các tế bào đã tách rời được ly tâm và thu hồi. Các tế bào được tái huyền phù cẩn thận và thêm vào các bình mới chứa môi trường nuôi cấy.

Môi trường nuôi cấy:

Dòng tế bào U 87 MG được nuôi cấy trong môi trường EMEM (Eagle's minimal essential medium) được bổ sung 1,0 g/L L-glucose, 2,0 mM L-glutamine, 2,2 g/L NaHCO₃, 1% NEAA, 1 mM natri pyruvate và 10% dung dịch FBS. Môi trường nuôi cấy nên được thay mới mỗi 2 đến 3 ngày.

Điều kiện phát triển:

Tế bào U-87 MG cần được nuôi cấy trong tủ ấm có độ ẩm, cung cấp 5% CO₂ và nhiệt độ 37°C để đạt được sự phát triển tối ưu.

Bảo quản:

Các tế bào U87 được bảo quản trong pha hơi của nitơ lỏng hoặc ở nhiệt độ dưới -150°C để duy trì khả năng sống tối đa của các tế bào u nguyên bào thần kinh đệm.

Quy trình đông lạnh và môi trường:

Môi trường đông lạnh CM-1 hoặc CM-ACF thích hợp để đông lạnh tế bào U 87 MG. Nên thực hiện quy trình đông lạnh chậm để tránh gây sốc cho tế bào và bảo vệ khả năng sống của tế bào.

Quy trình rã đông:

Các lọ dòng tế bào U-87 MG đông lạnh được rã đông trong bể nước 37°C. Tế bào được thêm vào môi trường nuôi cấy, tái huyền phù và phân phối để nuôi cấy trong các bình mới. Ngược lại, các tế bào U87 có thể được ly tâm để loại bỏ môi trường đông lạnh và sau đó được nuôi cấy.

Cấp độ an toàn sinh học:

Cần tuân thủ mức an toàn sinh học 1 khi xử lý các mẫu nuôi cấy tế bào U-87 MG.

Ưu điểm và nhược điểm của dòng tế bào U-87 MG

Khi nghĩ đến một dòng tế bào, điều đầu tiên xuất hiện trong đầu chúng ta là: Những ưu điểm của việc sử dụng tế bào U-87 MG là gì? Những nhược điểm của tế bào U-87 MG là gì?

Ưu điểm

Dòng tế bào U-87 MG được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu. Một số ưu điểm liên quan đến dòng tế bào này là:

Ưu điểm

• Dễ nuôi cấy: Tế bào U-87 MG dễ duy trì trong môi trường nuôi cấy. Chúng không đòi hỏi các yêu cầu nuôi cấy tế bào phức tạp hay khắt khe.
• Tính đồng nhất: U-87 MG là một dòng tế bào đồng nhất. Hầu hết các tế bào trong một quần thể đều có cấu trúc gen giống nhau và do đó có các đặc điểm tương tự nhau. Các tế bào này được sử dụng để nghiên cứu các quá trình tế bào, sàng lọc thuốc và thử nghiệm.
• Được đặc trưng rõ ràng: Dòng tế bào u não đa hình này được đặc trưng rõ ràng về đặc điểm sinh trưởng, hình thái và biểu hiện gen, khiến nó trở thành một công cụ nghiên cứu quý giá.

Nhược điểm

• Khả năng ứng dụng hạn chế: U 87 MG là dòng tế bào u não, do đó các ứng dụng của nó chủ yếu giới hạn trong việc nghiên cứu u não và các cơ chế phân tử cơ bản. Nó có thể không phù hợp để nghiên cứu các loại ung thư khác.

Các ứng dụng nghiên cứu sử dụng tế bào U-87 MG

Dòng tế bào u não đa hình U87MG được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu về ung thư, đặc biệt là nghiên cứu về u não đa hình. Một số ứng dụng nghiên cứu của tế bào U 87 MG là:

• Nghiên cứu sinh học ung thư: Dòng tế bào U87 được sử dụng để nghiên cứu sự phát triển và tiến triển của ung thư, các cơ chế phân tử cơ bản, các con đường tín hiệu và môi trường vi mô của khối u. Một nghiên cứu được công bố vào năm 2020 đã sử dụng mô hình u glioblastoma in vitro, dòng tế bào U-87 MG, để nghiên cứu gen BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) như một mục tiêu điều trị. Kết quả cho thấy gen BMAL1 ức chế sự tăng sinh, di chuyển và xâm lấn của tế bào u não đa hình (glioblastoma) bằng cách ức chế biểu hiện gen của cyclin B1, metalloproteinase-9 và phospho-AKT [1]. Một nghiên cứu khác được thực hiện vào năm 2019 cũng sử dụng dòng tế bào U87 và phát hiện ra rằng việc giảm biểu hiện yếu tố phiên mã LITAF (Lipopolysaccharide-induced tumour necrosis factor-alpha factor) có thể tăng cường độ nhạy cảm với bức xạ của các tế bào u thần kinh đệm thông qua việc tăng cường hoạt động của con đường FOXO-1. LITAF còn được gọi là gen 7 do p53 cảm ứng (PIG7) [2].
• Phát hiện và phát triển thuốc: Tế bào U-87 MG có thể được sử dụng cho mục đích sàng lọc và thử nghiệm thuốc, cho phép các nhà nghiên cứu xác định các loại thuốc chống ung thư tiềm năng mới và đánh giá hiệu quả cũng như độc tính của chúng. Một nghiên cứu đã sử dụng dòng tế bào u não đa hình U-87 MG để đánh giá tiềm năng chống ung thư và chống oxy hóa của chiết xuất từ cây Inula helenium (L.) [3]. Tương tự, một công bố khác đề cập đến việc sử dụng dòng tế bào U-87 MG để kiểm tra tác dụng gây độc tế bào và gây chết tế bào theo chương trình của các chiết xuất thực vật [4]. Hơn nữa, một nghiên cứu được công bố vào năm 2018 đã nghiên cứu tác dụng gây độc tế bào của các alkaloid sesquiterpene chiết xuất từ cây Nuphar trên các dòng tế bào U 87 MG nhạy cảm và kháng thuốc [5].

Đặt mua dòng tế bào u thần kinh đệm U87 MG ngay hôm nay