Tế bào NIH-3T3: Thúc đẩy các nghiên cứu về tế bào sợi và ứng dụng của NIH-3T3
Dòng tế bào NIH-3T3, được Howard Green và George Todaro tại Trường Y khoa Đại học New York thiết lập từ mô phôi chuột Swiss Albino 17 ngày tuổi vào năm 1962, đã trở thành một nguồn tài nguyên cơ bản trong nghiên cứu y sinh. Được công nhận nhờ khả năng tiếp nhận cao đối với sự hình thành ổ virus bạch cầu và virus sarcoma, tế bào NIH-3T3 đóng vai trò là công cụ quan trọng cho vô số nghiên cứu khoa học, bao gồm nghiên cứu ung thư do virus, phân tích biểu hiện gen và khám phá động lực tăng trưởng tế bào. Tên gọi “3T3” phản ánh phương pháp nuôi cấy tế bào, chỉ khoảng thời gian “chuyển cấy sau 3 ngày” với mật độ gieo ban đầu là 3 × 10^5 tế bào, nhấn mạnh các điều kiện tiêu chuẩn mà theo đó các tế bào này lần đầu tiên được nuôi cấy và nhân lên.
- Môi trường nuôi cấy
- Xem trang sản phẩm
- Thời gian nhân đôi
- Xem trang sản phẩm
- Loại tế bào
- Bám dính
- Cấp độ an toàn sinh học
- BSL-1
- Có sẵn tại
- Cytion — Đặt hàng NIH-3T3
Các hình thái và ứng dụng đa dạng của tế bào NIH-3T3
Một trong những đặc điểm nổi bật của tế bào NIH-3T3 là khả năng thích ứng về hình thái, thay đổi đáng kể tùy theo mật độ nuôi cấy. Ở mật độ thấp, các tế bào sợi này có cấu trúc hình thoi, đơn lẻ, và dần chuyển sang các mô hình dày đặc, xoáy tròn khi quần thể đạt đến mật độ tối đa. Với đường kính trung bình khoảng 18 μm, tế bào NIH-3T3 cung cấp một mô hình linh hoạt cho các nghiên cứu sâu về sinh học tế bào, từ cơ chế sửa chữa mô đến các con đường phức tạp trong điều hòa chu kỳ tế bào.
Thông tin về nuôi cấy
Thông tin chính về nuôi cấy:
Thời gian nhân đôi quần thể: Khoảng 20 giờ.
Loại nuôi cấy: Nuôi cấy bám dính.
Mật độ gieo tế bào: Khuyến nghị: 3 đến 4 × 10⁴ tế bào/cm².
Môi trường nuôi cấy: DMEM hoặc Ham's F12, bổ sung 5% FBS và 2,5 mM L-glutamine.
Điều kiện nuôi cấy: Duy trì ở 37 °C trong tủ ấm có độ ẩm với 5% CO₂.
Bảo quản: Giữ ở nhiệt độ dưới -195 °C trong pha hơi của nitơ lỏng.
Phương pháp đông lạnh: Sử dụng môi trường CM-1 hoặc CM-ACF; áp dụng phương pháp đông lạnh chậm (giảm nhiệt độ 1°C).
Quy trình rã đông: làm ấm nhanh trong bể nước 37 °C, sau đó ly tâm để loại bỏ môi trường đông lạnh, rồi tái huyền phù trong môi trường nuôi cấy.
Mức độ an toàn sinh học: Việc nuôi cấy yêu cầu môi trường an toàn sinh học cấp 1.
Con chuột bạch tạng Thụy Sĩ trong phòng thí nghiệm.
Ưu và nhược điểm của việc sử dụng tế bào NIH 3T3
Ưu điểm
Hiệu suất chuyển gen: Được biết đến với tỷ lệ chuyển gen cao, tế bào NIH-3T3 rất phù hợp cho cả các nghiên cứu biểu hiện gen tạm thời và ổn định, đồng thời tương thích với nhiều kỹ thuật chuyển gen khác nhau.
Tính hữu dụng của lớp tế bào hỗ trợ: Các tế bào này thường đóng vai trò là lớp tế bào hỗ trợ cho việc nuôi cấy chung với các tế bào như tế bào sừng và tế bào gốc, nhờ vào việc giải phóng các yếu tố tăng trưởng giúp thúc đẩy sự phát triển của các tế bào được nuôi cấy chung.
Nghiên cứu tế bào gốc: Tế bào NIH-3T3 là lựa chọn ưu tiên trong nghiên cứu tế bào gốc để kích thích tính đa năng mà không cần biến đổi gen và cung cấp môi trường thuận lợi cho sự biệt hóa của tế bào gốc.
Độ ổn định nuôi cấy: Tế bào NIH-3T3 được biết đến với độ ổn định cao và tần suất biến đổi tự phát thấp. Tuy nhiên, trong một số điều kiện nhất định hoặc sau khi tiếp xúc với các gen gây ung thư hoặc chất gây đột biến cụ thể, tế bào NIH-3T3 có thể trải qua quá trình biến đổi tự phát. Quá trình biến đổi này có thể dẫn đến việc tế bào có được các đặc tính ung thư như tăng trưởng không kiểm soát, mất khả năng ức chế tiếp xúc và khả năng hình thành khối u khi được tiêm vào vật chủ dễ bị ảnh hưởng.
Nhược điểm
Kích thước tế bào không đồng nhất: Hình thái kéo dài, giống trục chính của tế bào NIH-3T3 có thể thay đổi, gây phức tạp cho việc phân tích hình ảnh trong các thử nghiệm.
Dễ bị nhiễm trùng: Các tế bào này dễ bị nhiễm vi khuẩn và mycoplasma nếu không được duy trì trong điều kiện vô trùng nghiêm ngặt, có thể ảnh hưởng đến tính toàn vẹn của thí nghiệm.
Ứng dụng nghiên cứu của tế bào NIH-3T3
Nghiên cứu chuyển gen DNA: Tính bền bỉ của tế bào NIH-3T3 khiến chúng trở thành lựa chọn lý tưởng để đưa vào và nghiên cứu chức năng của các gen khác nhau, được chứng minh trong các nghiên cứu về các protein như NAB2-STAT6 và vai trò của chúng trong các quá trình tế bào.
Các thử nghiệm dựa trên tế bào: Độ tin cậy của chúng mở rộng sang các thử nghiệm khác nhau, bao gồm thử nghiệm khả năng sống, apoptosis và hình thành tiêu điểm, cung cấp thông tin chi tiết về các phản ứng tế bào trong các điều kiện thí nghiệm khác nhau.
Nghiên cứu chu kỳ tế bào: Việc điều chỉnh chu kỳ tế bào của dòng tế bào này một cách đơn giản thông qua nồng độ huyết thanh khiến nó trở thành một mô hình hiệu quả để nghiên cứu sự điều hòa chu kỳ tế bào và các bất thường của nó trong bối cảnh bệnh lý.
Nâng tầm nghiên cứu của bạn với tế bào NIH-3T3
Giới thiệu các nghiên cứu quan trọng liên quan đến dòng tế bào nguyên bào sợi NIH 3T3
Dòng tế bào NIH-3T3 đã đóng vai trò then chốt trong nhiều dự án nghiên cứu, bao quát các khía cạnh khác nhau của sinh học tế bào. Dưới đây là một số nghiên cứu quan trọng sử dụng các tế bào này:
- Khám phá protein hợp nhất NAB2-STAT6: Được công bố trên tạp chí Biochemical and Biophysical Research Communications, nghiên cứu này đi sâu vào việc protein hợp nhất NAB2-STAT6 tác động như thế nào đến các tế bào NIH-3T3, cụ thể là vai trò của nó trong việc tăng cường sự phát triển và di chuyển của tế bào thông qua điều hòa EGR-1.
- Nghiên cứu về APOBEC3 và virus bạch cầu chuột: Nghiên cứu này trên tạp chí Virology xem xét hiện tượng đột biến quá mức của virus bạch cầu chuột AKV trong các tế bào NIH-3T3 biểu hiện gen APOBEC3 của chuột.
- Đánh giá tiềm năng chống di căn của các thuốc tác động lên biểu sinh: Trên tạp chí *Oncotargets and Therapy*, nghiên cứu này đánh giá tác dụng chống di căn của hydralazine và acid valproic trên các tế bào NIH-3T3 bị biến đổi bởi RAS.
- Tác động của Baicalein đối với sự tăng sinh của tế bào NIH-3T3 và tổng hợp collagen: Nghiên cứu này sử dụng tế bào NIH-3T3 để khám phá cách Baicalein ảnh hưởng đến sự tăng sinh tế bào và sản xuất collagen thông qua việc điều chỉnh trục miR-9/yếu tố tăng trưởng giống insulin-1.
- Nghiên cứu sự suy giảm riboflavin và quá trình hình thành khối u: Nghiên cứu này trình bày các phát hiện về cách thiếu hụt riboflavin trong các tế bào NIH-3T3 góp phần vào quá trình hình thành khối u bằng cách thúc đẩy sự tăng sinh tế bào và làm rối loạn các gen chu kỳ tế bào.
Các tài nguyên thiết yếu cho nghiên cứu tế bào NIH-3T3
Đối với các nhà nghiên cứu quan tâm đến việc làm việc với tế bào NIH-3T3, có nhiều tài nguyên sẵn có để hướng dẫn quy trình nuôi cấy và thực nghiệm:
- Hình thành khối cầu trong tế bào NIH-3T3: Video này cung cấp hướng dẫn chi tiết về việc hình thành khối cầu, một kỹ thuật nuôi cấy tế bào 3D giúp tập hợp các tế bào NIH-3T3 thành các cụm, mang lại mô hình nghiên cứu phù hợp hơn với điều kiện sinh lý.
- Theo dõi sự phát triển của tế bào NIH-3T3: Thông qua hệ thống hình ảnh tế bào sống JuLI Br, video này ghi lại quá trình phát triển của tế bào NIH-3T3 trong vòng 65 giờ, thể hiện sự nhân lên của tế bào theo thời gian thực.
Các tài nguyên này nhằm hỗ trợ các nỗ lực nghiên cứu của bạn với tế bào NIH-3T3, tạo nền tảng cho các thí nghiệm và khám phá thành công.
Câu hỏi thường gặp về tế bào NIH-3T3
Tài liệu tham khảo
- Rahimi, A.M., M. Cai và S. Hoyer-Fender, “Sự không đồng nhất của dòng tế bào sợi NIH3T3”. Tạp chí Cells, 2022. 11(17): tr. 2677.
- Leibiger, C., và cộng sự, Phân tích đặc điểm tế bào di truyền phân tử độ phân giải cao đầu tiên của dòng tế bào NIH 3T3 bằng phương pháp nhuộm đa màu trên chuột. Tạp chí Histochemistry & Cytochemistry, 2013. 61(4): tr. 306-312.
- Wang, H.-X., và cộng sự, Phân tích so sánh các lớp tế bào hỗ trợ khác nhau với tế bào sợi 3T3 để nuôi cấy tế bào gốc limbal của thỏ. Tạp chí Quốc tế về Nhãn khoa, 2017. 10(7): tr. 1021.
- Wang, Z., và cộng sự, Sự biệt hóa của tế bào thần kinh từ tế bào sợi NIH/3T3 trong điều kiện được xác định rõ. Phát triển, tăng trưởng & biệt hóa, 2011. 53(3): tr. 357-365.
- Park, Y.-S., và cộng sự., Protein hợp nhất NAB2-STAT6 điều hòa sự tăng sinh tế bào và tiến triển ung thư thông qua điều hòa EGR-1. Tạp chí Nghiên cứu Sinh hóa và Sinh lý học, 2020. 526(2): tr. 287-292.
- Mattsson, M., Biểu hiện của Sloppymerase™ trong tế bào NIH/3T3: Khám phá tính linh hoạt của một polymerase hợp nhất dễ mắc lỗi. 2021.
- Sahinturk, V., và cộng sự, Acrylamide gây độc tế bào trong các tế bào sợi NIH/3T3 thông qua quá trình apoptosis. Tạp chí Độc học và Sức khỏe Công nghiệp, 2018. 34(7): tr. 481-489.
- Lusi, E.A. và F. Caicci, Phát hiện virus Retro-Giant đầu tiên ở người: Mô tả hình thái, kinase retrovirus và khả năng gây u ở chuột. bioRxiv, 2019: tr. 851063.
- Endo, M., và cộng sự, Con đường tín hiệu E2F1-Ror2 điều hòa sự điều tiết phiên mã phối hợp để thúc đẩy quá trình chuyển đổi giai đoạn G1/S trong các tế bào sợi NIH/3T3 được kích thích bởi bFGF. Tạp chí FASEB, 2020. 34(2): tr. 3413-3428.
- Long, L., et al., Sự cạn kiệt riboflavin thúc đẩy quá trình hình thành khối u trong các tế bào HEK293T và NIH3T3 bằng cách duy trì sự tăng sinh tế bào và điều chỉnh quá trình phiên mã gen liên quan đến chu kỳ tế bào. Tạp chí Dinh dưỡng, 2018. 148(6): tr. 834-843.