Tế bào NCI-H1299: Nghiên cứu và ý nghĩa lâm sàng của dòng tế bào ung thư phổi NCI-H1299

Thông tin về nuôi cấy

Việc duy trì nuôi cấy dòng tế bào không hề dễ dàng cho đến khi bạn nắm rõ tất cả các thông tin quan trọng về nó, bao gồm: Thời gian nhân đôi của NCI-H1299 là bao lâu? Mật độ gieo tế bào của NCI-H1299 là bao nhiêu? Môi trường nuôi cấy tế bào NCI-H1299 là gì? Làm thế nào để nuôi cấy dòng tế bào NCI-H1299? Phần này sẽ giúp bạn tìm hiểu câu trả lời cho tất cả các câu hỏi về nuôi cấy tế bào NCI-H1299.

Những điểm chính khi nuôi cấy tế bào NCI-H1299

Thời gian nhân đôi:

Thời gian nhân đôi của NCI-H1299 dao động từ 22 đến 30 giờ.

Dính hoặc lơ lửng:

NCI-H1299 là dòng tế bào bám dính.

Tỷ lệ nuôi cấy lại:

Tế bào NCI-H1299 được nuôi cấy lại theo tỷ lệ khuyến nghị từ 1:3 đến 1:6. Để gieo tế bào, các tế bào bám dính được rửa bằng dung dịch PBS 1x và ủ với dung dịch chuyển dòng Accutase trong 8 đến 10 phút ở nhiệt độ phòng. Các tế bào đã bong ra được thêm vào môi trường nuôi cấy mới và ly tâm. Sau đó, cặn tế bào được tái huyền phù và các tế bào được đổ vào các bình mới chứa môi trường sinh trưởng.

Môi trường nuôi cấy:

RPM1 1640 là môi trường nuôi cấy lý tưởng cho tế bào NCI-H1299. Nó được bổ sung 10% huyết thanh bò thai, 4500 mg/L glucose, 2,0 mM L-glutamine, 1 mM natri pyruvate, 1500 mg/L NaHCO3 và 10 mM HEPES. Nên thay môi trường nuôi cấy 2 đến 3 lần mỗi tuần.

Điều kiện nuôi cấy:

Các nuôi cấy tế bào ung thư phổi NCI-H1299 được duy trì trong tủ ấm có độ ẩm ở 37°C với nguồn cung cấp 5% CO₂.

Bảo quản:

Dòng tế bào NCI-H1299 có thể được bảo quản lâu dài trong pha hơi của nitơ lỏng hoặc trong tủ đông nhiệt độ cực thấp dưới -150°C.

Quy trình đông lạnh và môi trường:

CM-1 hoặc CM-ACF là môi trường đông lạnh cho tế bào NCI-H1299. Tế bào được đông lạnh bằng quy trình đông lạnh chậm, chỉ cho phép nhiệt độ giảm 1 độ mỗi phút để bảo vệ khả năng sống của tế bào.

Quy trình rã đông:

Tế bào NCI-H1299 đông lạnh được khuấy nhanh trong bể nước đã được làm nóng trước ở 37 độ C trong 40 đến 60 giây cho đến khi chỉ còn lại một mảnh băng nhỏ. Các tế bào đã rã đông được thêm vào môi trường nuôi cấy mới và có thể được nuôi cấy trực tiếp trong các bình mới hoặc được ly tâm. Trong trường hợp đầu tiên, môi trường nuôi cấy nên được thay thế sau 24 giờ ủ. Quá trình ly tâm giúp loại bỏ các thành phần của môi trường đông lạnh. Sau đó, các tế bào thu được được tái huyền phù trong môi trường nuôi cấy mới và được phân phối vào bình mới để nuôi cấy.

Cấp độ an toàn sinh học:

Cần có phòng thí nghiệm cấp độ an toàn sinh học 1 để xử lý nuôi cấy tế bào NCI-H1299.

Mua dòng tế bào NCI-H1299: Công cụ nghiên cứu chất lượng cao để tìm hiểu sinh học ung thư phổi

Ưu điểm và nhược điểm của dòng tế bào NCI-H1299

Giống như các dòng tế bào ung thư người khác, NCI-H1299 cũng sở hữu một số đặc điểm nổi bật đi kèm với những ưu và nhược điểm cụ thể. Trong bài viết này, chúng tôi đã tóm tắt một số điểm đáng chú ý.

Ưu điểm

Những ưu điểm chính của dòng tế bào ung thư phổi không tế bào nhỏ NCI-H1299 là:

• Mô hình ung thư phổi in vitro

  Các dòng tế bào NCI-H1299 được phát triển từ di căn hạch bạch huyết của ung thư phổi và do đó có các đặc tính tương đối giống nhau. Do đó, các tế bào này có thể đóng vai trò là mô hình in vitro để nghiên cứu sinh học ung thư phổi, cơ chế tế bào và phân tử, cũng như sàng lọc và thử nghiệm các phương pháp điều trị tiềm năng.

• Dễ nuôi cấy

  Các tế bào NCI-H1299 rất dễ nuôi cấy và duy trì trong phòng thí nghiệm nghiên cứu. Không có yêu cầu và quy trình nuôi cấy tế bào phức tạp.

• Đột biến p53 và KRAS ở NCI-H1299

  Tế bào NCI-H1299 thiếu biểu hiện gen p53, điều này cho phép tế bào sinh sôi mạnh mẽ. Hơn nữa, chúng mang đột biến KRAS góp phần vào sự phát triển, sinh sôi, xâm lấn và di chuyển của tế bào. Xét đến những yếu tố này, các nhà nghiên cứu sử dụng tế bào H1299 để nghiên cứu các cơ chế phân tử liên quan đến đột biến KRAS và P53.

Nhược điểm

Những nhược điểm của tế bào NCI-H1299 là:

• Tính đặc hiệu mô

  NCI-H1299 có nguồn gốc từ mô phổi. Do đó, khả năng ứng dụng của nó chủ yếu giới hạn trong nghiên cứu ung thư phổi. Nó có thể không thể hiện đầy đủ tính không đồng nhất và các đặc điểm chung của các loại ung thư khác.

Các ứng dụng nghiên cứu của tế bào NCI-H1299

Dòng tế bào NCI-H1299 được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư phổi. Một số ứng dụng đầy hứa hẹn của dòng tế bào này được đề cập ở đây.

• Sinh học ung thư: Tế bào NCI-H1299 là công cụ nghiên cứu hữu ích để tìm hiểu sự phát triển, tiến triển của ung thư cũng như các cơ chế tế bào và phân tử liên quan. Các tế bào này mang một số đột biến nhất định, cho phép các nhà nghiên cứu khám phá các hành vi của tế bào ung thư, các con đường tín hiệu và hồ sơ biểu hiện gen liên quan. Một số nghiên cứu đã sử dụng dòng tế bào ung thư phổi không tế bào nhỏ NCI-H1299 để nghiên cứu sinh học ung thư phổi. Ví dụ, một nghiên cứu được thực hiện vào năm 2018 đã điều tra con đường tín hiệu liên quan đến quá trình apoptosis của tế bào ung thư phổi bằng cách sử dụng tế bào NCI-H1299. Các nhà nghiên cứu phát hiện ra rằng con đường PI3K/AKT góp phần vào sự tăng sinh tế bào, và việc ức chế con đường này có thể gây ra cái chết của tế bào ung thư [1]. Tương tự, một nghiên cứu khác đã điều tra các cơ chế liên quan đến quá trình chuyển đổi biểu mô-mô liên kết (EMT) ở dòng tế bào NCI-H1299. Nghiên cứu này đề xuất rằng protein ngoại bào SPARC (protein tiết ra có tính axit và giàu cystein) góp phần vào quá trình EMT và di chuyển của NCI-H1299, từ đó thúc đẩy quá trình hình thành khối u trong tế bào — protein SPARC đóng vai trò là chất trung gian của tín hiệu TGF-β1 [2]. 

• Phát hiện và sàng lọc thuốc: NCI-H1299, một dòng tế bào ung thư phổi ở người, được sử dụng rộng rãi để đánh giá độc tính và hiệu quả của các loại thuốc tiềm năng. Ngoài ra, dòng tế bào này còn được các nhà nghiên cứu sử dụng để tìm hiểu cơ chế tác dụng của các loại thuốc chống ung thư. Các nghiên cứu cũng đã sử dụng các tế bào này để xác định các mục tiêu thuốc tiềm năng và cơ chế kháng thuốc. Ví dụ, nghiên cứu do Xiao-Yun Shen và các đồng nghiệp thực hiện đã điều tra tiềm năng chống ung thư của hợp chất tự nhiên bruceine D (BD). Kết quả cho thấy BD ức chế đáng kể sự tăng sinh, xâm lấn và di chuyển của các tế bào NCI-H1299. Do đó, BD có thể được xem là một liệu pháp bổ trợ tiềm năng trong điều trị ung thư phổi tế bào không nhỏ [3]. Tương tự, một nghiên cứu đã đánh giá tác dụng gây độc tế bào của xanthohumol khi dùng đơn lẻ và kết hợp với thuốc hóa trị cisplatin trên các tế bào ung thư phổi NCI-H1299 [4].

Câu hỏi thường gặp về dòng tế bào NCI-H1299

Tài liệu tham khảo

1. Gu, J., và cộng sự, Nghiên cứu về quá trình apoptosis do EGCG gây ra trong tế bào ung thư phổi thông qua việc ức chế con đường tín hiệu PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): tr. 4557-4563.
2. Sun, W., et al., SPARC đóng vai trò là chất trung gian của TGF‐β1 trong việc thúc đẩy quá trình chuyển đổi biểu mô thành mô liên kết ở các tế bào ung thư phổi A549 và H1299. Biofactors, 2018. 44(5): tr. 453-464.
3. Shen, X.-Y., và cộng sự, Nghiên cứu về cơ chế tác dụng của bruceine D trong điều trị tế bào ung thư phổi không tế bào nhỏ H1299. Tạp chí Y học Cổ truyền Trung Quốc Toàn cầu, 2020. 6(4): tr. 500.
4. Long, B., và cộng sự, Tác dụng gây độc tế bào của xanthohumol và sự kết hợp của nó với cisplatin trên các tế bào ung thư phổi di căn H1299 ở người. Tạp chí Tiến bộ trong Y học và Nghiên cứu Y học, 2019. 30(9): tr. 1-15.