Клітинна лінія BEWO
BeWo - це клітинна лінія, отримана з хоріокарциноми людини, яка широко використовується в біомедичних дослідженнях. Вона слугує цінною моделлю in vitro для вивчення складного процесу розвитку плаценти та синцитіалізації людських трофобластів. Дослідники також використовують ці клітини для вивчення поведінки клітин трофобласту, вироблення гормонів і транспорту речовин через плаценту. Крім того, клітини BeWo також застосовуються в токсикології, вивченні інфекцій та передачі захворювань.
Ця стаття містить фундаментальні знання про клітини BeWo, які можуть допомогти вам працювати з ними у ваших дослідженнях. Вона включатиме в себе
- Загальні характеристики та походження клітин BeWo
- Клітинна лінія BeWo: Інформація про культивування
- Переваги та недоліки клітинної лінії BeWo
- Дослідницькі застосування клітин BeWo
- Наукові публікації за участю клітин BeWo
- Ресурси для клітинної лінії BeWo: Протоколи, відео та інше
1. Загальні характеристики та походження клітин BeWo
Попередні знання про походження та загальні характеристики клітинної лінії мають вирішальне значення для її використання у ваших дослідженнях. У цій частині статті розглядається походження клітинної лінії BeWo, її характерні особливості та багато іншого. Тут ви дізнаєтесь Що таке клітинні лінії хоріокарциноми BeWo? Що таке синцитіалізація BeWo? Звідки беруться клітини BeWo? Яка морфологія клітин BeWo? Яка плоїдність BeWo?
- Плацентарна клітинна лінія BeWo походить від злоякісної гестаційної хоріокарциноми плаценти плода чоловічої статі в 1968 році [1]. Таким чином, вона слугує безцінною моделлю для дослідження плаценти.
- Клітини BeWo мають епітеліоподібну морфологію.
- Клітини BeWo відносно невеликі, в межах від 20 до 30 мкМ [2].
- Клітини BeWo мають стабільний каріотип. Їх номер стовбурової лінії гіпо-тетраплоїдний. Модальне число хромосом у клітинах BeWo становить 86. Воно може варіювати від 71 до 178.
- Клітини BeWo продукують кілька гормонів, а саме хоріонічний соматомамотропін людини, хоріонічний гонадотропін людини (ХГЛ) і стероїдні гормони.
- Клітини BeWo експресують молекулярні маркери, включаючи CK 7, E-кадгерин і VE-кадгерин.
Сублінія B30
B30 - це сублінія клітин BeWo. Її використовують для дослідження поглинання і транспорту поживних речовин. Це пов'язано з їх активним ростом на пористих мембранах.
BeWo та JEG-3
Клітинні лінії BeWo JEG-3 отримані з хоріокарцином і використовуються в дослідженнях плаценти. Клітини BeWo продукують гормони на нижчих рівнях, ніж JEG-3, такі як хоріонічний гонадотропін людини (ХГЛ) та естрадіол.
2. Клітинна лінія BeWo: Інформація про культивування
Підтримання культури клітин може бути складним завданням, якщо ви не знаєте ключових деталей. Такі як: Який час подвоєння BeWo? Що таке клітинне середовище BeWo? Як культивувати клітинну лінію BeWo і як заморожувати клітини BeWo?
Ключові моменти для культивування клітин BeWo
|
Час подвоєння: |
Час подвоєння популяції клітин BeWo становить приблизно 30 годин. |
|
Прихильник або в підвішеному стані: |
BeWo є адгезивною клітинною лінією. |
|
Щільність посіву клітин: |
Рекомендована щільність посіву клітин BeWo становить 1 x104 клітин/см2. Для посіву з клітин видаляють старе середовище і промивають клітини 1 х PBS. Після цього додають аккутазу (пасажний розчин) і інкубують клітини протягом 8-10 хвилин при кімнатній температурі. Потім до відокремлених клітин додають культуральне середовище і центрифугують. Зібрані клітини ресуспендують і переливають у нову колбу. |
|
Поживне середовище: |
Для вирощування клітин BeWo використовується середовище Ham's F12K, що містить 10% FBS, 2,0 мМ L-глутаміну, 2,0 мМ пірувату натрію та 2,5 г/л NaHCO3. Поживне середовище для клітин BeWo слід замінювати 2-3 рази на тиждень. |
|
Умови вирощування: |
Клітини BeWo підтримують у зволоженому інкубаторі при температурі 37 градусів за Цельсієм і 5% подачі CO2. |
|
Зберігання: |
Заморожені клітини BeWo зберігають при температурі нижче -150°C в електричному наднизькотемпературному морозильнику або в паровій фазі рідкого азоту. |
|
Процес заморожування і середовище: |
Клітини BeWo рекомендується заморожувати в середовищі CM-1 або CM-ACF. Клітини заморожують методом повільного заморожування. Цей метод дозволяє знижувати температуру лише на 1 градус за хвилину, таким чином запобігаючи шоковому впливу на клітини і захищаючи їх життєздатність. |
|
Процес розморожування: |
Заморожені клітини розморожують, занурюючи їх у попередньо встановлену водяну баню з температурою 37°C на 40-60 секунд, поки не залишиться невелика крижана грудка. Потім додають свіже живильне середовище, і клітини центрифугують, щоб видалити компоненти заморожувального середовища. Зібрані клітинні гранули ресуспендують і вносять у культуральну колбу для вирощування. |
|
Рівень біобезпеки: |
Для роботи з культурами клітин BeWo необхідна лабораторія з рівнем біобезпеки 1. |
3. Переваги та недоліки клітинної лінії BeWo
Клітини лінії BeWo мають унікальні характеристики та певні переваги і недоліки. У цьому розділі ми розглянемо деякі з них.
Переваги
Основними перевагами клітинної лінії хоріокарциноми BeWo є наступні:
-
Клітинна модель плаценти in vitro
Клітини BeWo забезпечують модель in vitro для вивчення поведінки клітин трофобласта і синцитіалізації плаценти, відтворюючи процеси, які складно спостерігати в природних умовах.
-
Вироблення гормонів
Клітини BeWo секретують гормони, такі як хоріонічний гормон і плацентарний лактоген, що робить їх цінними для досліджень гормональної регуляції та репродуктивної біології.
Недоліки
До недоліків клітин трофобласту BeWo відносяться:
-
Ракова клітинна лінія
Клітини BeWo були отримані з хоріокарциноми, яка є пухлиною плаценти. Таке походження може не повністю відображати нормальну функцію клітин плаценти.
4. Застосування клітин BeWo в дослідженнях
Клітинна лінія BeWo широко використовується в дослідженнях плаценти. Нижче наведено кілька конкретних застосувань цієї лінії клітин:
- Дослідження плаценти та вагітності: Клітини BeWo відіграють ключову роль у дослідженнях плаценти та вагітності. Наприклад, дослідники використовують ці клітини для вивчення транспорту речовин, включаючи ліки, поживні речовини і токсини, через плацентарний бар'єр. Крім того, вони також досліджують вироблення і регуляцію гормонів, включаючи хоріонічний гонадотропін людини (ХГЛ), плацентарний лактоген і стероїдні гормони. Це важливо для розуміння гормональних змін під час вагітності. Дослідження, проведене у 2018 році, вивчало вплив бромованих антипіренів (BFR) на активність сульфотрансферази в лінії трофобластичних клітин людини (BeWo). Цей фермент бере участь у регуляції внутрішньоклітинного рівня гормону щитовидної залози [3].
- Дослідження інфекцій та хвороб: Клітини BeWo також використовуються для вивчення взаємодії між патогенами та клітинами плаценти. Ці дослідження є цінними для розуміння захворювань, які можуть передаватися від матері до плоду, а також для розробки стратегій захисту здоров'я плоду. Крім того, ця клітинна лінія допомагає дослідникам вивчати ускладнення, що виникають під час вагітності, такі як прееклампсія. Наприклад, дослідження, проведене Міхаліною Бралевською у 2023 році з використанням клітинної моделі трофобласту BeWo, показало, що хромогранін А (CgA) та похідний від нього пептид катестатин (CST) можуть відігравати певну роль у складному процесі патогенезу прееклампсії (ПЕ) [4]. В іншому дослідженні вивчався протираковий потенціал трихозантину з використанням клітинної лінії хоріокарциноми BeWo. У дослідженні також докладено додаткових зусиль для виявлення біомаркерів шляхом проведення порівняльного протеомного аналізу до і після експерименту [5].
5. Наукові публікації за участю клітин BeWo
Нижче наведено кілька важливих наукових публікацій за участю клітин трофобласту BeWo.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі Frontiers in Bioscience-Landmark (2022), припускається, що сигналізація AMPK активує мітофагію в клітинах трофобласта BeWo через FUNDC1 і PRKN-фасилітовані шляхи мітофагії. В результаті мітофагія допомагає підтримувати виробництво АТФ і потенціал мітохондріальної мембрани.
Етилпарабен індукує апоптотичну загибель клітин BeWo плаценти людини через шлях Каспази-3
Стаття опублікована в журналі Animal Cells and Systems (2020). У дослідженні припускається, що етилпарабен опосередковує апоптоз клітин BeWo через регуляцію шляху каспази 3.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі Metabolism and Disposition (2023), використовували клітинні лінії плаценти, включаючи BeWo, JAR, JEG-3 і HTR-8/SVneo, для вивчення відкладення ксенобіотиків і стероїдів у клітинах.
У цій науковій статті в Міжнародному журналі молекулярної медицини (2020) висловлено припущення, що апелін, ліганд рецептора APJ, сприяє проліферації клітин BeWo через APJ та ERK1/2, stat3 та AMPK-сигналізацію. Таким чином, він може бути важливим адипокіном, що регулює розвиток плаценти.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі Epilepsia (2021), вивчався вплив поживних речовин плода та протисудомних препаратів на транспортери холіну в людській трофобластичній клітинній лінії BeWo.
6. Ресурси для клітинної лінії BeWo: Протоколи, відео та інше
Ось кілька онлайн-ресурсів, присвячених клітинам лінії BeWo:
- Трансфекція in vitro: Це відео допоможе вам вивчити протокол трансфекції плазмідної ДНК in vitro для адгезійних клітин.
Наступне посилання містить інформацію про культуру клітин для клітин BeWo:
- Клітини BeWo: Цей веб-сайт містить основну інформацію про культуру клітин лінії BeWo. Сюди входить інформація про клітинні середовища та умови культивування. Тут також є протоколи для субкультивування та поводження з кріоконсервованими і проліферуючими культурами.
Посилання на джерела
- Вебер М. та ін., Цитогеноміка шести трофобластичних клітинних ліній людини. Плацента, 2021. 103: p. 72-75.
- Колокольцова, Т. та ін., Характеристика трофобластів у довготривалому культивуванні. Вісник експериментальної біології і медицини, 2017. 164: p. 259-265.
- Леонетті К.П., Батт К.М., Степлтон Х.М., Порушення активності тиреоїдної гормональної сульфотрансферази бромованими антипіренами в клітинній лінії плаценти хоріокарциноми людини, BeWo. Хемосфера, 2018. 197: p. 81-88.
- Бралевська М., П'єтруха Т., Сакович А. Зниження рівня CgA-похідного білка CST у трофобластичних клітинних лініях HTR-8/SVneo та BeWo, спричинене преекламптичним середовищем. Міжнародний журнал молекулярних наук, 2023. 24(8): p. 7124.
- Ху, Ю. та ін., Порівняльний протеомний аналіз додавання трихозантину до клітинної лінії BeWo. Молекули, 2022. 27(5): p. 1603.