Frequently asked questions

23 листопада 2023 року компанія CLS Cell Lines Service змінила назву на Cytion, і з того часу перехід був завершений в обох юридичних особах. Зараз ми працюємо як Cytion GmbH у Гейдельберзі, Німеччина, та Cytion LLC у Су-Фолс, Південна Дакота. Зміна бренду відображає наше розширення за межі класичного банківського зберігання клітин до ширшого портфеля продуктів та послуг для досліджень на основі клітин.

Так. Номери каталогу з часів CLS відповідають тим самим аутентифікованим клітинним лініям і залишаються визнаними в системі замовлень. Існуючі сертифікати аналізу та паспорти безпеки залишаються дійсними як історичні документи щодо партій. Нові сертифікати аналізу, паспорти безпеки та рахунки-фактури видаються під назвою Cytion, а в публікаціях приймаються посилання як на CLS, так і на Cytion.

Cytion GmbH (Гейдельберг, Німеччина) обробляє замовлення та надає підтримку клієнтам у всій Європі та на більшості міжнародних ринків. Cytion LLC (Су-Фолс, Південна Дакота), заснована в 2024 році, є окремою американською організацією, яка обробляє замовлення, угоди про передачу матеріалів (MTA) та надає підтримку клієнтам у Північній Америці. Обидві організації мають однаковий портфель аутентифікованих клітинних ліній та працюють за однією системою якості ISO 9001:2015.

Каталог налічує понад 1000 аутентифікованих клітинних ліній, що охоплюють лінії пухлин людини та тварин, імморталізовані нормальні лінії, репортерні та стабільно трансфіковані похідні, індуковані плюрипотентні стовбурові клітини (iPSCs) та мезенхімальні стромальні клітини (MSCs). Первинні клітини, культуральні середовища, середовище для заморожування (CM-1), реагенти для відриву клітин та PBS доповнюють асортимент.

Стандартний об’єм зазвичай становить 3 × 10⁶ клітин на флакон для адгезивних ліній та 5 × 10⁶ клітин на флакон для суспензійних ліній, кріоконсервованих у визначеному середовищі для заморожування. Точна кількість життєздатних клітин у партії, яку ви отримуєте, задокументована у сертифікаті аналізу для конкретної партії.

Cytion може постачати клітинні лінії через наукові партнерства, програми депонування та угоди про передачу технологій. Зверніться до нашої наукової команди, вказавши назву лінії та передбачуване застосування — ми повідомимо про наявність, терміни виконання та умови ліцензування.

Так. Наша програма передачі технологій приймає депозити клітинних ліній від науковців та дослідників з промисловості та охоплює аутентифікацію, створення мастер-банків та робочих банків, постійний контроль якості та глобальну дистрибуцію. Зверніться до нас, щоб отримати угоду про депозит та інформацію щодо процедури подання.

Замовлення можна розміщувати безпосередньо через інтернет-магазин на сайті cytion.com або електронною поштою чи телефоном у вашу регіональну службу підтримки. Під час оформлення замовлення можна вказати номер замовлення на закупівлю, також підтримується виставлення рахунків на ім’я установи. Для оптових, повторюваних або індивідуальних замовлень зверніться до відділу продажів за офіційним кошторисом.

Усі ціни на сайті cytion.com вказані без ПДВ. Відповідний ПДВ, вартість доставки та будь-які митні збори додаються під час оформлення замовлення залежно від країни доставки та вашого статусу платника ПДВ. Клієнти з ЄС, які мають дійсний ідентифікаційний номер платника ПДВ, отримують рахунок-фактуру без ПДВ за механізмом зворотного оподаткування.

Стандартні способи включають кредитні картки (Visa, Mastercard, American Express) та банківський переказ SEPA для європейських клієнтів. Для оплати за рахунком-фактурою на підставі замовлення на поставку можна створити інституційні рахунки. Клієнтів з Північної Америки обслуговує Cytion USA з використанням місцевих способів оплати.

Так. Для замовлення декількох флаконів, індивідуальної упаковки, багаторядкових замовлень або рамкових угод з науково-дослідними установами, подайте запит на офіційну пропозицію. У пропозиціях вказуються права використання для кожної клітинної лінії (виключно для досліджень або комерційні) безпосередньо у позиції, а також умови доставки та терміни виконання.

Європейський інтернет-магазин здійснює доставку по всьому світу з одним винятком: Америкою займається компанія Cytion USA у місті Су-Фолс, штат Південна Дакота. Клієнтам із США, Канади та деяких регіонів Латинської Америки слід робити замовлення через регіональне представництво, щоб скоротити терміни доставки, отримати регіональні угоди про передачу матеріалів (MTA) та місцеве виставлення рахунків.

Кріоконсервовані клітини доставляються замороженими на сухому льоді у сертифікованій ізольованій упаковці, що підтримує температуру вантажу приблизно на рівні −78 °C під час транспортування. Кожна партія супроводжується сертифікатом аналізу та інструкціями з поводження, а також відстежується кур'єрською службою на всьому шляху.

Орієнтовні терміни доставки з Гейдельберга:

• Німеччина: 1–2 робочі дні
• В межах ЄС: 2–4 робочі дні
• Міжнародні відправлення: зазвичай 3–7 робочих днів, залежно від митного оформлення

Замовлення відправляються з понеділка по середу, щоб уникнути транспортування у вихідні та забезпечити збереження сухого льоду до моменту прибуття.

Огляньте пакунок після отримання та переконайтеся, що кріовіали все ще глибоко заморожені, без ознак розморожування або помутніння. Негайно перенесіть їх до місця довгострокового зберігання у паровій фазі рідкого азоту (від −150 до −196 °C). Зафіксуйте дату та будь-які спостереження під час розпакування для відстеження.

Негайно зверніться до служби наукової підтримки та вкажіть номер замовлення, надайте фотографії упаковки та дані про відстеження кур'єрської доставки. Клітини, які прибули частково або повністю розмороженими, покриваються нашою 60-денною гарантією життєздатності — ми організуємо заміну, як тільки проблема буде задокументована.

Зберігайте у паровій фазі рідкого азоту при температурі −150 °C або нижче. Механічна морозильна камера з температурою −80 °C є прийнятною лише як короткочасний проміжний етап (дні, а не тижні) — життєздатність постійно погіршується при температурі вище −135 °C через рекристалізацію. Ведіть облік запасів із зазначенням партії, місця зберігання та дати заморожування.

Стандартне швидке розморожування:

• Розморожуйте кріопробірку у водяній бані при температурі 37 °C протягом 40–60 секунд, виймаючи її, як тільки залишиться невеликий кристал льоду
• Асептично перенесіть у 9–10 мл попередньо підігрітого повного живильного середовища
• Центрифугуйте при 200 × g протягом 5 хвилин
• Ресуспендуйте осад у свіжому середовищі та висійте з рекомендованою щільністю

Умови відновлення для конкретної лінії (щільність висівання, формат чашки, перша заміна середовища) вказані на сторінці продукту.

Для рутинної кріоконсервації використовуйте повне живильне середовище, доповнене 10 % DMSO, або готове до використання заморожувальне середовище CM-1 від Cytion. Рекомендується контрольоване охолодження зі швидкістю приблизно −1 °C на хвилину (Mr. Frosty або програмована морозильна камера), після чого клітини переносять у рідкий азот для довгострокового зберігання.

На сторінці кожного продукту вказано склад культурального середовища, рекомендовану щільність висівання, коефіцієнт субкультури, частоту пасажування та умови відновлення після розморожування. Дані щодо конкретної партії — кількість життєздатних клітин, STR-профіль, статус мікоплазми — вказані в сертифікаті аналізу партії, який надсилається разом із вашим замовленням і доступний для завантаження на сторінці продукту.

Так. Клітинні лінії виробляються в Німеччині відповідно до нашої системи управління якістю, сертифікованої за стандартом ISO 9001:2015. Поточний обсяг та термін дії сертифіката задокументовані в розділі «Якість та гарантія» на веб-сайті; копію можна отримати за запитом.

Ідентичність підтверджується за допомогою профілювання коротких тандемних повторів (STR) за 16 маркерами (AMEL, CSF1PO, D3S1358, D5S818, D7S820, D8S1179, D13S317, D16S539, D18S51, D21S11, FGA, Penta_D, Penta_E, TH01, TPOX, vWA), що зіставляється з міжнародними еталонними базами даних (Cellosaurus, ATCC, DSMZ) із зазначенням відсотка збігу ідентичності для кожної партії.

З 2023 року профілювання STR виконується компанією IDEXX BioAnalytics як незалежною сторонньою лабораторією. STR повторюється для кожного нового основного та робочого банку.

Аутентифікація STR застосовується до клітинних ліній людини, мишей, щурів, хом’яків та собак.

Кожен клітинний банк перевіряється за допомогою ПЛР-тесту з використанням специфічних праймерів, спрямованих на ДНК мікоплазми. Окремий постпродакшн-тест на мікоплазму проводиться на кінцевій кріоконсервованій партії. Результати записуються як «пройшов/не пройшов» у сертифікаті аналізу для конкретної партії.

Стерильність встановлюється шляхом прямого посіву на 8 культуральних середовищ з 10-денною інкубацією, після чого проводиться ідентифікація мікроорганізмів методом MALDI-TOF MS у випадках, де спостерігається ріст. У відповідних випадках проводиться анаеробне культивування. Партія випускається тільки тоді, коли не виявлено росту аеробних мікроорганізмів; окремий тест на стерильність після виробництва підтверджує відсутність росту бактерій та грибків на кріоконсервованому флаконі.

У разі необхідності для кожної партії проводиться скринінг на наявність вірусів конкретних видів. Для ліній клітин людини панель охоплює:

• Віруси гепатиту А, В та С (HAV, HBV, HCV)
• Вірус імунодефіциту людини типів 1 та 2 (ВІЛ-1, ВІЛ-2)
• Вірус Т-лімфотропний людини типів 1 та 2 (HTLV-1, HTLV-2)

Випробування на наявність специфічних для виду патогенів доступне для клітинних ліній людини, миші, щура, хом’яка, великої рогатої худоби та свині. Точний перелік, застосований до вашої партії, вказано у сертифікаті аналізу.

Кожна партія перевіряється на міжвидове забруднення на тлі мишей, щурів, людей, китайських хом'яків та африканських зелених мавп. Позитивний/негативний статус для кожного виду вказується у сертифікаті аналізу. Цей аналіз виконується компанією IDEXX BioAnalytics разом із тестами STR та на вірусні патогени.

Життєздатність після заморожування вимірюється на Vi-CELL BLU (Beckman Coulter) шляхом аналізу 100 зображень на зразок із 200 мкл клітинної суспензії. Критерієм випуску є життєздатність після розморожування ≥70%; фактичне значення для вашої партії вказано у Сертифікаті аналізу. Відновлення перевіряється шляхом культивування еталонної пробірки та підтвердження >80% конфлюентності протягом очікуваного періоду відновлення, а також перевірки очікуваних властивостей росту (адгезивні, суспензійні або напівадгезивні).

Cytion гарантує, що автентифіковані кріоконсервовані клітинні лінії є життєздатними при дотриманні рекомендованого протоколу протягом 60 днів з дати відправлення. Якщо ви не змогли відновити клітини після задокументованого стандартного розморожування протягом цього періоду, зверніться до наукової служби підтримки для отримання заміни флакона.

Сертифікат аналізу (CoA) для конкретної партії надсилається з кожним замовленням і його можна завантажити зі сторінки продукту, використовуючи номер партії, надрукований на етикетці кріопробірки. Кожен CoA містить інформацію про номер пасажу, кількість життєздатних клітин, життєздатність після розморожування, стерильність, статус мікоплазми, повний профіль STR з ідентифікацією, міжвидове забруднення та панель патогенів, специфічних для даного виду. Якщо ви не можете знайти CoA для старішої партії, зверніться до наукової служби підтримки, вказавши номер каталогу та ідентифікатор партії, і ми надішлемо його повторно.

На сторінці кожного продукту вказано рекомендований рівень біобезпеки (зазвичай BSL-1 або BSL-2) та будь-які особливості, пов’язані з конкретним видом або патогеном. Деякі лінії — наприклад, похідні HEK293, що містять вірусні елементи — класифікуються як генетично модифіковані організми; у Німеччині це зазвичай GMO-S1. Класифікація ГМО може відрізнятися залежно від країни, тому перед імпортом зверніться до місцевого регуляторного органу.

MTA — це угода про використання в дослідницьких цілях, що охоплює передачу, використання та подальшу передачу конкретної клітинної лінії для внутрішніх досліджень в одному місці. Лінії, що вимагають MTA, позначені на сторінці продукту. Угоду необхідно підписати до того, як клітини будуть відправлені.

Тільки ті, на сторінці яких розміщено повідомлення про MTA. У повідомленні вказано умови депозитарія та будь-які обмеження щодо сфери використання, характерні для цієї лінії. Лінії без позначки MTA підпадають під стандартні умови використання в дослідницьких цілях компанії Cytion.

Ні. Клієнтів у США та Канаді обслуговує Cytion USA, яка використовує регіональні MTA та умови ліцензування. Для Китаю та Тайваню застосовуються окремі угоди, специфічні для цих регіонів. Зверніться до вашої регіональної команди, і ми видамо угоду, що відповідає вашій юрисдикції.

За замовчуванням клітинні лінії постачаються виключно для дослідницьких цілей. Комерційне використання — робота за плату, контрактні дослідження, тестування якості продукції, розробка ліків для зовнішніх клієнтів, діагностичні набори та подання документів до регуляторних органів — вимагає індивідуальної ліцензії. Заповніть форму «Призначення використання» на сторінці продукту або зв’яжіться з нами безпосередньо, щоб розпочати процес укладення угоди.

Тестування на мікоплазму методом ПЛР на клітинних культурах, наданих клієнтом, з використанням того самого валідованого тесту, який ми застосовуємо до кожної партії Cytion. Зразки подаються у вигляді супернатанту або клітинного осаду відповідно до інструкцій щодо послуги; підписаний звіт надсилається у зазначений термін. Корисно для скринінгу вхідних ліній, періодичних аудитів та контролю якості перед публікацією.

Профілювання STR осаду або зразка ДНК, наданого клієнтом, за допомогою панелі з 16 маркерів, з порівнянням з міжнародними еталонними базами даних (Cellosaurus, ATCC, DSMZ) та підписаним звітом про автентифікацію, що включає відсоток збігу ідентичності. Використовується для підтвердження ідентичності, виявлення перехресного забруднення та виконання вимог журналів щодо автентифікації. Доступно для ліній людини, миші, щура, хом'яка та собаки.

Виробництво великих партій готових до використання клітин, розфасованих у флакони, для високопродуктивного скринінгу та розробки тестів. Кожен флакон у партії відповідає однаковим критеріям життєздатності та продуктивності, що зменшує міжекспериментальну варіабельність та прискорює терміни проведення кампаній.

Так. Розширення клітинної культури (збільшення до визначеної кількості клітин, осаду або кількості ДНК/РНК), створення основного та робочого банків клітин, а також постійне зберігання зразків доступні як проекти на платній основі. Кожна співпраця починається з короткої телефонної розмови для підтвердження специфікацій, результатів та термінів.