Bunková línia Neuro-2a

Neuro-2a je línia myších neurónových buniek, ktorá sa široko používa v neurovedeckom výskume. Tieto bunky sa využívajú najmä na štúdium nervového vývoja, diferenciácie, neurotoxicity, bunkových signálnych dráh a axonálneho rastu. Okrem toho sa používajú na účely vývoja a skríningu liekov.

Tento článok sa zameriava na dôležité aspekty neuroblastómových buniek Neuro-2a, ktoré by vám mohli pomôcť pred začatím práce s nimi. Bude sa týkať najmä:

Všeobecné vlastnosti a pôvod buniek Neuro-2a
Informácie o kultivácii bunkovej línie Neuro-2a
Výhody a nevýhody bunkovej línie Neuro-2a
Výskumné aplikácie bunkovej línie Neuro-2a
Výskumné publikácie s bunkami Neuro-2a
Zdroje pre bunky Neuro-2a: Protokoly, videá a ďalšie zdroje

1. Všeobecné vlastnosti a pôvod buniek Neuro-2a

Táto časť článku sa bude zaoberať pozadím a základnými charakteristikami bunkovej línie Neuro-2a, ktoré je nevyhnutné poznať pred prácou s ňou. Dozviete sa tu: Čo je to bunková línia Neuro-2a? Aký je pôvod bunkovej línie Neuro-2a? Čo je to diferenciácia buniek Neuro-2a? Aká je veľkosť bunky Neuro-2a? Aká je morfológia buniek Neuro-2a?

Bunky Neuro-2a pochádzajú zo spontánneho nádoru (neuroblastómu) albinotickej myši (kmeň A). Túto bunkovú líniu vytvorili R. J. Klebe a F. H. Ruddle.
Neuroblastómové bunky Neuro-2a vykazujú morfológiu neuronálnych a améboidných kmeňových buniek.
Veľkosť buniek Neuro-2a je 12 mikrometrov [1].
Počet chromozómov buniek Neuro-2a sa môže pohybovať od 59 do 193 s modálnym počtom 95. Karyotyp týchto neuroblastómových buniek je nestabilný v rozsahu 94 až 98 chromozómov.

Ilustrovaná neuronálna signalizácia: 3D znázornenie uvoľňovania neurotransmiterov v synaptickej štrbine presynaptickým neurónom, ktoré je vyvolané prítokom Ca2+ a vedie k aktivácii iónových kanálov a prítoku Na+ v postsynaptickom neuróne.

2. Informácie o kultivácii bunkovej línie Neuro-2a

Bunky Neuro-2a sa široko používajú vo výskumných laboratóriách v oblasti neurovedy. Pred prácou s týmito bunkami by ste si mali osvojiť nevyhnutné informácie o kultivácii buniek uvedené nižšie. Môže vám to pomôcť pri ich ľahšej práci. Budete vedieť: Čo je to médium na kultiváciu buniek Neuro-2a? Ako sa kultivujú bunky Neuro-2a? Aký je čas zdvojenia buniek Neuro-2a? Aká je hustota výsevu buniek Neuro-2a ? Aký je protokol kultivácie buniek Neuro-2a? Aké je médium pre bunky Neuro-2a?

Kľúčové body pre kultiváciu buniek Neuro-2a

Čas zdvojnásobenia:	Čas zdvojenia buniek Neuro-2a je približne 70 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:	Neuro-2a je adherentná bunková línia.
Hustota výsevu:	Optimalizovaná hustota výsevu buniek pre bunkovú líniu Neuro-2a je 1 x¹⁰⁴ ^buniek/cm2. Pri výseve sa bunky premyjú fyziologickým roztokom bez fosfátového pufra s obsahom horčíka a vápnika (1x). Neskôr sa pridá pasážovací roztok (Accutase) a bunky sa inkubujú 8 až 10 minút pri teplote okolia. Po disociácii buniek sa pridá čerstvé médium a bunky sa odstredia. Zozbieraný bunkový pelet sa opatrne resuspenduje a bunky sa prelejú do kultivačnej nádoby na rast.
Rastové médium:	Na kultiváciu buniek Neuro-2a sa používa EMEM. Obsahuje 10 % FBS, 2 mM L-glutamín, 1,5 g/l NaHCO3, EBSS, 1 mM pyruvát sodný a NEAA pre ideálny rast buniek. Médium by sa malo vymieňať 1 až 2-krát týždenne.
Rastové podmienky:	Neuro-2a kultúry sa udržiavajú vo zvlhčenom inkubátore s teplotou 37 °C, ktorý je napojený na prívod 5 % CO2.
Skladovanie:	Bunky by sa mali dlhodobo skladovať pri teplote nižšej ako -150 °C v elektrickej mrazničke s veľmi nízkou teplotou alebo v parnej fáze tekutého dusíka.
Proces zmrazovania a médium:	Na zmrazenie buniek Neuro-2a sa používa médium CM-1 alebo CM-ACF. Bunky sa zmrazujú pomalým zmrazovacím procesom, ktorý umožňuje pokles teploty len o 1 °C za minútu. To chráni bunky pred šokom a zachováva ich životaschopnosť.
Proces rozmrazovania:	Na rozmrazenie zmrazených kultúr sa nádobka umiestni do vodného kúpeľa s teplotou 37 °C na 40 až 60 sekúnd, kým nezostane len malá hrudka ľadu. Potom sa pridá kultivačné médium a bunky sa podrobia centrifugácii. Tento krok pomáha odstrániť zložky zmrazovacieho média. Pelet buniek sa potom resuspenduje a bunky sa prenesú do novej banky naplnenej kultivačným médiom. Potom sa bunky umiestnia do inkubátora pri teplote 37 °C na minimálne 24 hodín.
Úroveň biologickej bezpečnosti:	Na manipuláciu s kultúrami Neuro-2a a ich udržiavanie je potrebné laboratórium s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.

Mikroskopický obraz včasnej pasáže adherentných neuroblastómových buniek Neuro 2a zobrazujúci ich morfológiu pri 10-násobnom a 20-násobnom zväčšení.

3. Výhody a nevýhody bunkovej línie Neuro-2a

Bunky Neuro-2a majú niektoré výhody a nevýhody, ktoré ich odlišujú od iných neuronálnych bunkových línií. Niektoré významné výhody a nevýhody týchto buniek sú uvedené tu.

Výhody

Výhody bunkovej línie myšieho neuroblastómu Neuro-2a sú:

Jednoduchá údržba
Bunková línia Neuro-2a nie je spojená s komplexnými alebo zložitými postupmi kultivácie buniek. Ľahko sa kultivuje a udržiava vo výskumných laboratóriách.
Model neuronálnych buniek in vitro
Neuro-2a je vhodným modelom neurónových buniek, ktorý výskumníci široko využívajú pri štúdiu vývoja a diferenciácie neurónov.

Nevýhody

Nevýhody buniek Neuro-2a sú:

Murínsky pôvod
Neuro-2a sú myšieho pôvodu a výskumníci by mali byť opatrní pri extrapolácii výsledkov zo štúdií na myšiach na ľudské zdravie a choroby, pretože myšia a ľudská biológia sa môžu výrazne líšiť.

4. Výskumné aplikácie bunkovej línie Neuro-2a

Bunky Neuro-2a ponúkajú mnoho aplikácií v oblasti výskumu neurovied. Tu sa uvádza niekoľko sľubných využití tejto bunkovej línie:

Vývoj neurónov: Neuro-2a je in vitro model neurónových buniek, ktorý sa široko používa na štúdium vývoja neurónov a súvisiacich procesov, ako je diferenciácia, rast axónov a tvorba synáps. V štúdii uskutočnenej v roku 2020 sa použili bunky Neuro-2a na skúmanie úlohy mikroRNA-124 pri diferenciácii neurónových buniek indukovanej kyselinou retinovou [2]. V ďalšej štúdii sa skúmala expresia receptora gama kyseliny retinovej (RARG) Neuro 2a a miRNA-124 v bunkovej línii neuroblastómu (N2A). Táto štúdia navrhla, že RARG je cielený miR-124 a potláča rast neuritov [3].
Neurotoxicita: Neuro-2a sa používa aj na hodnotenie toxických účinkov liekov, chemických látok alebo faktorov životného prostredia na nervové bunky. Napríklad štúdia, ktorú uskutočnil Zhihong Yin a spolupracovníci, skúmala neurotoxicitu bisfenolu A (BPA), environmentálnej chemikálie, pomocou buniek Neuro-2a. Pozorovali, že BPA potláča diferenciáciu a proliferáciu neurónových buniek narušením ich bunkovej a synaptickej integrity [4].
Skríning liečiv: Neuro-2a bunky sa používajú aj na hodnotenie terapeutických aktivít viacerých liečiv, zlúčenín a prírodných produktov. V štúdii sa napríklad použili bunky Neuro-2a a skúmal sa antioxidačný potenciál extraktu z rastliny Gingko biloba. Okrem toho výskum navrhol, že spôsobuje pokles agregácie Aβ a môže byť potenciálnou liečbou Alzheimerovej choroby [5].

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 400394

5. Výskumné publikácie s bunkami Neuro-2a

Tu je niekoľko zaujímavých výskumných prác, v ktorých je použitá bunková línia Neuro-2a.

Alkamidy podobné piperínu z Piper nigrum indukujú promótor BDNF a podporujú rast neuritov v bunkách Neuro-2a

Táto štúdia v časopise Journal of Natural Medicines, 2018 skúmala terapeutické účinky alkamidov izolovaných z bieleho korenia (P. nigrum) na neurónové bunky Neuro-2a.

Downregulácia Nkx2. 1 sa podieľa na abnormalitách mozgu vyvolaných nadbytkom kyseliny retinovej

Tento výskum v Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020 navrhol, že gén Nkx2.1 zohráva dôležitú úlohu vo vývoji mozgu myší reguláciou signálnej kaskády Shh.

Expozícia bisfenolu A vyvoláva neurotoxicitu spojenú so synaptickou a cytoskeletálnou dysfunkciou v bunkách neuro-2a

Tento článok bol uverejnený v časopise Toxicology and Industrial Health (2023) a navrhuje, že environmentálna chemikália bisfenol A, vyvoláva neurotoxicitu v bunkách neuro-2a a narúša ich synaptickú a cytoskeletálnu dysfunkciu.

Modulácia dráh MAPK a PI3K/Akt hexarelínom v bunkách Neuro-2A inhibuje apoptotickú toxicitu vyvolanú peroxidom vodíka

V tomto článku v časopise Pharmaceuticals (2021) sa navrhuje, aby liečivo, hexarelín, modulovalo kaskádu PI3K/AKT a MAPK v bunkách neuroblastómu (Neuro-2a) a inhibovalo apoptózu vyvolanú peroxidom vodíka v bunkách neuro-2a.

Etanolový extrakt z plodov Emblica officinalis potláča neurozápal v mikrogliach a podporuje rast neuritov v bunkách Neuro2a

V tejto výskumnej práci v časopise Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) sa navrhuje, že extrakt z plodov Emblica officinalis potláča neurozápal v bunkách Neuro-2a, a tak môže byť prospešný pri neurozápalových ochoreniach.

6. Zdroje pre bunky Neuro-2a: Protokoly, videá a ďalšie zdroje: zdroje pre systém Neuro-2a-2

Nižšie sú uvedené dostupné online zdroje o bunkách Neuro-2a. Zahŕňajú protokol o kultivácii a transfekcii buniek Neuro-2a.

Protokol transfekcie buniek Neuro-2a: Neuro-2a je vhodným hostiteľom na transfekciu. Tento odkaz vám poskytne návod týkajúci sa transfekčného protokolu bunkovej línie. Účinnosť transfekcie Neuro 2a sa líši od činidla k činidlu.

Nasledujúci odkaz obsahuje protokol bunkovej kultúry Neuro-2a.

Protokol bunkovej kultúry Neuro-2a: Tento odkaz vám pomôže dozvedieť sa o protokole subkultivácie buniek Neuro 2a.
Neuro-2a bunky: Táto webová stránka obsahuje komplexné poznatky o médiách pre bunky Neuro-2a, hustote výsevu a protokoloch pre subkultiváciu a manipuláciu s kryokonzervovanými a proliferačnými kultúrami.

Odkazy

Lulevich, V., et al., Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neuronal cell interactions (Mechanika jednej bunky poskytuje citlivý a kvantitatívny prostriedok na skúmanie interakcií amyloid-beta peptidu a neurónových buniek ). Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
You, Q., et al., Úloha miR-124 v regulácii diferenciácie buniek Neuro-2A indukovanej kyselinou retinovou. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
Su, X., et al., Retinoic acid receptor gamma is targeted by microRNA-124 and inhibits neurite outgrowth (Receptor gama kyseliny retinovej je cielený mikroRNA-124 a inhibuje rast neurónov). Neuropharmacology, 2020. 163: p. 107657.
Yin, Z., et al., Bisphenol-A exposure induced neurotoxicity and associated with synapse and cytoskeleton in Neuro-2a cells (Expozícia bisfenolu-A vyvolala neurotoxicitu a súvisí so synapsiou a cytoskeletom v bunkách Neuro-2a ). Toxicology in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
Chen, L., et al., Gingko biloba extract (EGb) inhibuje oxidačný stres v bunkách neuro 2A nadmerne exprimujúcich APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.