Bunky SW-620 - vplyv na výskum a experimenty s rakovinou hrubého čreva

BunkySW-620 predstavujú ľudskú bunkovú líniu kolorektálneho karcinómu Dukesovho štádia C. Majú vysoký tumorigénny a metastatický potenciál. Preto sa vo veľkej miere využívajú v onkologických a toxikologických štúdiách. Tento článok sa zaoberá základnými aspektmi bunkovej línie rakoviny hrubého čreva SW-620.

Pôvod a všeobecné charakteristiky buniek SW-620

Pôvod a všeobecné charakteristiky sú základnými informáciami o bunkovej línii. Ich predbežná znalosť je nevyhnutná pre výskumníkov, ktorí zvažujú jej zapojenie do svojej výskumnej štúdie. Táto časť článku vysvetľuje kľúčové vlastnosti a pôvod bunkovej línie SW-620. Dozviete sa najmä: Čo je bunková línia SW-620? Aké sú vlastnosti bunkovej línie SW620? Aký je pôvod línie SW620? Aká je veľkosť buniek SW-640? A aký je rozdiel medzi SW620 a SW480?

  • Bunková línia kolorektálneho karcinómu SW-620 pochádza z medializovanej lézie lymfatických uzlín 51-ročného muža kaukazskej rasy s adenokarcinómom hrubého čreva [1]. Túto bunkovú líniu uložil A. Leibovitz so spolupracovníkmi.
  • Bunky SW-620 majú epitelovú morfológiu. Taktiež pozostáva z malých okrúhlych a bipolárnych buniek, ktoré sa zhodujú s mikroklkovami.
  • Veľkosť buniek SW-620 je 14,4 ± 0,3 μm v priemere.
  • Tieto bunky rakoviny hrubého čreva majú hyperdiploidný karyotyp. Modálne číslo chromozómov pre bunky SW-620 je 50, ktoré sa môže pohybovať od 45 do 53.

SW-480 vs SW-620

SW480 a SW620 sú bunkové línie kolorektálneho karcinómu. SW-480 bola odvodená z primárneho nádoru, zatiaľ čo SW-620 bola vytvorená z metastáz lymfatickej uzliny. Okrem toho sa xenografty vyvinuté z týchto bunkových línií navzájom líšia. Xenotransplantáty SW620 vytvárajú nádorové bunkové vrstvy, zatiaľ čo xenotransplantáty SW480 vytvárajú štruktúry podobné žľazám [2]. Obe bunkové línie majú identické mutačné profily.

Polyp identifikovaný a odstránený počas vyšetrenia hrubého čreva alebo konečníka, charakterizovaný mäsitým výrastkom z vnútornej sliznice.

Bunky SW-620: Informácie o kultivácii

Pochopenie základnej koncepcie kultivácie bunkovej línie je nevyhnutné, pretože môže viesť k vhodnému zaobchádzaniu a údržbe. V tejto časti sú uvedené niektoré kľúčové body pre kultiváciu SW-620, ktoré vám môžu pomôcť: Čo je médium SW-620? Aký je čas zdvojenia SW-620? Ako sa kultivujú bunky SW-620?

Kľúčové body pre kultiváciu buniek SW-620

Čas zdvojenia:

Čas zdvojenia SW-620 sa pohybuje od 20 do 26 hodín.

Adherentné alebo v suspenzii:

Bunková línia SW-620 je adherentná. Bunky tvoria monovrstvy na povrchu kultivačnej nádoby.

Pomer subkultivácie:

Adherentné bunky sa oplachujú fosfátovým soľným roztokom (1X) bez horčíka a vápnika. Potom sa pridá pasážovací roztok, Accutase, a bunky sa inkubujú pri teplote okolia 8 až 10 minút. Pridá sa čerstvé médium a bunky sa odstredia. Potom sa zozbierané bunky opatrne resuspendujú v rastovom médiu a dávkujú sa do nových baniek na rast.

Rastové médium:

Na ideálny rast buniek SW-620 sa používa médium DMEM doplnené 10 % fetálneho hovädzieho séra, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-glutamínu, 1,5 g/l NaHCO3 a 1,0 mM pyruvátu sodného. Médium by sa malo obnovovať dvakrát týždenne.

Rastové podmienky:

Bunky karcinómu hrubého čreva SW-620 sa kultivujú vo zvlhčenom inkubátore pri teplote 37 °C a 5 %CO2.

Skladovanie:

Po zmrazení sa bunky SW-620 skladujú pri teplote nižšej ako -150 °C v mrazničkách s veľmi nízkou teplotou alebo v parnej fáze tekutého dusíka.

Proces zmrazovania a médium:

CM-1 alebo CM-ACF je ideálne zmrazovacie médium pre bunky SW-620. Na zmrazenie buniek SW-620 sa používa pomalý proces zmrazovania. Umožňuje zníženie teploty len o 1 °C za minútu, čím sa chráni životaschopnosť buniek.

Proces rozmrazovania:

Zmrazené bunky SW-620 sa rozmrazujú vo vodnom kúpeli nastavenom na 37 °C počas 40 až 60 sekúnd. Po rozmrazení sa pridá kultivačné médium a bunky sa odstredia, aby sa odstránili prvky zmrazovacieho média. Potom sa získaná bunková peleta resuspenduje v rastovom médiu a bunky sa prelejú do novej banky na rast.

Úroveň biologickej bezpečnosti:

Na manipuláciu s kultúrami SW-620 je potrebné laboratórium s úrovňou biologickej bezpečnosti 1 (BSL-1).

Vyvíjajúci sa sféroid vytvorený z buniek SW-620 pri 10x a 20x zväčšení.

Výhody buniek SW-620

Výhody

  • Modelovanie karcinómu hrubého čreva: bunky SW-620 slúžia ako kritický model karcinómu hrubého čreva, ktorý umožňuje dôkladné štúdium mechanizmov nádoru a metastázovania, najmä v xenotransplantačných modeloch.
  • Výskum a terapia rakoviny: Tieto bunky uľahčujú výskum biológie rakoviny, chemoterapeutickej účinnosti a mechanizmov bunkovej smrti vrátane anoikis.
  • Expresia CD133: Expresia CD133 v bunkách SW-620 umožňuje nahliadnuť do biológie rakovinových kmeňových buniek a jej dôsledkov pre nádorové bujnenie a rezistenciu na liečbu.
  • Aplikácie prietokovej cytometrie: Prietoková cytometria: Analýza týchto buniek umožňuje hodnotenie bunkových populácií, úrovne apoptózy a proliferácie.

Výskumné aplikácie bunkovej línie SW-620

Nižšie sú uvedené oblasti výskumu, v ktorých sú bunky SW-620 sľubne využiteľné:

  • Výskum rakoviny: SW-620 je neoceniteľný bunkový model na štúdium biológie kolorektálneho karcinómu. Výskumníci využívajú tento model in vitro na skúmanie molekulárnych mechanizmov, ktoré riadia rast, inváziu a migráciu rakovinových buniek. Okrem toho sa môže použiť na štúdium mutácií bunkovej línie SW620, t. j. p53, APC a KRAS. Výskum uskutočnený v roku 2021 skúmal vplyv mutácie KRAS bunkovej línie SW620 na citlivosť nového lieku FL118. Pozorovali, že nadmerná expresia KRAS zvyšuje apoptózu kolorektálnych buniek vyvolanú FL118, zatiaľ čo jej utlmenie ju znižuje. Tieto výsledky môžu pomôcť predpovedať použitie FL118 u pacientov s karcinómom hrubého čreva s mutáciou KRAS [3].
  • Skríning a vývoj liekov: Bunková línia SW-620 sa široko používa na skríning a testovanie potenciálnych kandidátov na lieky proti rakovine hrubého čreva. Výskumníci využívajú tieto bunky na hodnotenie cytotoxicity a účinnosti liekov, čo môže viesť k vývoju cielených liečebných prístupov. V jednej štúdii sa napríklad skúmala antikolorektálna aktivita jednotlivých zlúčenín esenciálnych olejov škorice a klinčekov s použitím bunkovej línie SW-620 [4].
  • Štúdie metastáz: Vzhľadom na vysoký metastatický potenciál sa bunky SW-620 môžu použiť na skúmanie molekulárnych dráh, ktoré sú základom metastázovania rakovinových buniek. Napríklad Zhou Yang a jeho kolegovia zistili úlohu génu Grainy-head-like 2 (GRHL2) pri progresii a metastázovaní rakoviny hrubého čreva. Navrhli, že expresia génu GRHL2 inhibuje progresiu a metastázovanie kolorektálneho karcinómu prostredníctvom potlačenia epitelovo-mezenchymálneho prechodu (EMT) [5].

Zabezpečenie bunkovej línie SW620

Bunky SW-620: Publikácie

V tejto časti nájdete niekoľko zaujímavých a najčastejšie citovaných výskumných publikácií o bunkách SW-620.

Metabolit elagitanínov, urolitín A, indukuje autofágiu a inhibuje metastázovanie v ľudských bunkách kolorektálneho karcinómu sw620

V tejto štúdii uverejnenej v časopise Molecular Carcinogenesis (2017) sa navrhuje, aby liečba polyfenolom, urolitínom A, indukovala autofágiu v bunkovej línii kolorektálneho karcinómu SW620. Taktiež potláčala metastázovanie rakovinových buniek.

Tetrandrín potláča adhéziu, migráciu a inváziu ľudských buniek rakoviny hrubého čreva SW620 prostredníctvom inhibície signálnych dráh nukleárneho faktora-κB, matrixovej metaloproteinázy-2 a matrixovej metaloproteinázy-9

Tento článok v časopise Oncology Letters (2018) skúmal antimetastatický potenciál tetrandrínu, bis-benzylizochinolínového alkaloidu, s použitím buniek SW-620.

CDCA3 podporuje proliferáciu buniek aktiváciou signálnej dráhy NF-κB/cyklín D1 pri kolorektálnom karcinóme

Tento článok je uverejnený v časopise Biochemical and Biophysical Research Communications (2018). Navrhuje, že gén CDCA3 (Cell division cycle associated 3) je regulovaný v bunkách kolorektálneho karcinómu a podporuje ich proliferáciu prostredníctvom aktivácie signalizácie NF-κB.

ABL001, bispecifická protilátka zameraná proti VEGF a DLL4, s chemoterapiou synergicky inhibuje progresiu nádoru v xenograftických modeloch

V štúdii International Journal of Molecular Sciences (2021) sa skúmal synergický účinok bispecifickej protilátky (ABL001) a chemoterapeutických liekov na progresiu nádoru v xenografe SW620.

Purifikovaný extrakt z liečivej rastliny Bacopa monnieri, bakopasid II, inhibuje rast buniek rakoviny hrubého čreva in vitro indukovaním zastavenia bunkového cyklu a apoptózy

Tento článok je publikovaný v časopise Cells (2018). V tomto článku sa skúmala protinádorová aktivita extraktu Bacopa monnieri, Bacopaside II, v bunkách SW-620 a iných bunkách kolorektálneho karcinómu.

Zdroje pre bunkovú líniu SW-620: Protokoly, videá a ďalšie zdroje: zdroje pre systém 6-620: protokoly, videá a ďalšie

Nasleduje niekoľko online zdrojov, ktoré obsahujú bunky karcinómu hrubého čreva SW-620.

  • Transfekcia SW-620: Tento článok stručne opisuje protokol stabilnej transfekcie bunkovej línie SW-620.

Nasledujúci odkaz obsahuje protokol o kultivácii buniek SW620.

  • Protokol o kultivácii buniek SW-620: Tento odkaz poskytuje základné informácie o bunkovej línii SW-620. Pomôže vám tiež pri osvojení si protokolu subkultivácie buniek SW-620 a manipulácii s kryokonzervovanými a proliferujúcimi kultúrami SW620.
  • Protokoly bunkových kultúr: Toto video je skvelým zdrojom informácií o protokoloch pasážovania, zmrazovania a rozmrazovania adherentných buniek.

Často kladené otázky o bunkách SW620

Odkazy

  1. Siekmann, W., et al., Účinok lidokaínu a ropivakaínu na primárne (SW480) a metastatické (SW620) bunkové línie rakoviny hrubého čreva. Oncol Lett, 2019. 18(1): p. 395-401.
  2. Hewitt, R.E., et al. validácia modelu progresie rakoviny hrubého čreva. J Pathol, 2000. 192(4): p. 446-54.
  3. Thangaiyan, R., et al., Kras mutation subtypes distinctly affect colorectal cancer cell sensitivity to FL118, a novel inhibitor of survivin, Mcl-1, XIAP, cIAP2 and MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): p. 7458.
  4. Petrocelli, G., et al. molekuly prítomné v rastlinných esenciálnych olejoch na prevenciu a liečbu kolorektálneho karcinómu (CRC). Molekuly, 2021. 26(4): p. 885.
  5. Yang, Z., et al., GRHL2 inhibuje progresiu a metastázovanie kolorektálneho karcinómu prostredníctvom potlačenia epiteliálno-mezenchymálneho prechodu. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): p. 1195-1205.

Zistili sme, že sa nachádzate v inej krajine alebo používate iný jazyk prehliadača, ako je aktuálne zvolený. Chcete prijať navrhované nastavenia?

Zatvoriť