Bunková línia MG-63: Podrobný sprievodca bunkami MG-63 vo výskume osteosarkómu
Bunky MG-63 sú fibroblastom podobné ľudské osteosarkómové bunky, ktoré ponúkajú širokú škálu výskumných aplikácií v biomedicínskej oblasti. Môže to zahŕňať štúdium procesov súvisiacich s kosťami, ako je vývoj kostí, diferenciácia atď. Okrem toho bunková línia MG-63 slúži ako vhodný in vitro model na štúdium životaschopnosti, proliferácie a adhézie kostných buniek.
Všeobecné charakteristiky a pôvod bunkovej línie MG-63
Táto časť článku sa zaoberá pôvodom a všeobecnými charakteristikami bunkovej línie MG-63. Dozviete sa: Čo je bunková línia MG-63? Aký je pôvod bunkovej línie MG63? Aká je morfológia buniek MG-63? Aká je veľkosť buniek MG-63?
- MG-63 je typ bunkovej línie osteoblastov pochádzajúcich z kostí 14-ročného mužského pacienta s osteosarkómom (kaukazského pôvodu). A. Billiau a jeho kolegovia uložili túto bunkovú líniu v roku 1977.
- Bunková línia MG-63 má morfológiu podobnú fibroblastovým bunkám.
- Bunky ľudského osteosarkómu (MG-63) vykazujú hypo-triploidiu. Modálny počet chromozómov týchto buniek je 66, čo sa vyskytuje približne u 44 % bunkovej populácie. Vyššia ploidia sa uvádza aj u takmer 2 % bunkovej populácie. Okrem toho sa vo všetkých bunkách hojne vyskytuje 18 - 19 markerových chromozómov.
Informácie o kultivácii bunkovej línie MG-63
Dôležité informácie o požiadavkách na kultiváciu bunkovej línie vám môžu uľahčiť prácu. V tejto časti článku sú uvedené všetky kľúčové body, ktoré sú rozhodujúce pre kultiváciu a udržiavanie buniek MG-63. Dozviete sa tu: Aký je čas zdvojenia buniek MG-63? Aké rastové médiá sa používajú pre bunky MG-63? Aká je hustota výsevu buniek MG-63?
Kľúčové body pre kultiváciu buniek MG-63
|
Čas zdvojnásobenia |
Čas zdvojnásobenia populácie buniek MG-63 sa pohybuje v rozmedzí 28-38 hodín v závislosti od podmienok kultivácie. |
|
Rastové vlastnosti |
MG-63 je adherentná bunková línia. |
|
Hustota výsevu |
prebunky MG-63 sa odporúča hustota 1 x104 buniek/cm2. Adherentné bunky sa premývajú 1 x fosfátovým tlmivým roztokom (PBS) bez horčíka a vápnika. Tieto bunky sa potom inkubujú s disociačným roztokom (Accutase), pridajú sa s čerstvým médiom a odstredia sa. Odobratý bunkový pelet sa resuspenduje v čerstvom médiu a dávkuje sa do novej banky na rast. |
|
Rastové médium |
Na kultiváciu buniek MG-63 sa používa médium DMEM alebo Ham's F12. Tieto médiá sa môžu pre optimálny rast buniek rozšíriť o 5 % fetálneho hovädzieho séra (FBS), 3,0 g/l glukózy, 2,5 mM L-glutamínu a 1,2 g/l NaHCO3. Médium by sa malo vymieňať 2 - 3-krát týždenne. |
|
Podmienky rastu |
Na kultiváciu buniek MG-63 je potrebný zvlhčený inkubátor pri teplote 37 °C a 5 % prívod CO2. |
|
Skladovanie |
Tieto bunky podobné osteoblastom sa môžu skladovať v parnej fáze tekutého dusíka alebo pri teplote nižšej ako -150 °C, aby sa zachovala životaschopnosť buniek. |
|
Proces zmrazovania a médium |
Na zmrazovanie buniek MG-63 sa používajú médiá CM-1 alebo CM-ACF. Vo všeobecnosti sa odporúča pomalý proces zmrazovania, aby sa zabránilo šoku buniek a chránila sa ich životaschopnosť. |
|
Proces rozmrazovania |
Zmrazené bunky sa inkubujú 40 až 60 sekúnd vo vopred zohriatom vodnom kúpeli (37 °C). Bunky sa resuspendujú v čerstvom rastovom médiu a prelejú sa do novej banky. Po 24 hodinách inkubácie sa médium vymení, aby sa odstránili zložky zmrazovacieho média. |
|
Úroveň biologickej bezpečnosti |
Na manipuláciu s kultúrami MG-63 a ich udržiavanie je potrebné laboratórne prostredie na úrovni biologickej bezpečnosti 1. |
Bunková línia MG-63: Výhody a nevýhody
MG-63 je široko používaná bunková línia osteoblastov. Má niekoľko výhod a nevýhod. V tomto texte uvedieme niekoľko hlavných výhod a nevýhod bunkovej línie MG-63.
Výhody
Výhody buniek MG-63 sú:
-
Vlastnosti podobné osteoblastom
Bunková línia MG-63 vykazuje vlastnosti podobné osteoblastom, vďaka čomu je vhodná na štúdium procesov a chorôb súvisiacich s kosťami. Môže sa použiť aj na skúmanie adhézie, proliferácie a životaschopnosti buniek na titánových povrchoch [1].
-
Možnosť transfekcie
Bunky MG-63 sa vo veľkej miere používajú na transfekčné štúdie, ktoré umožňujú výskum expresie génov, funkcie a bunkových procesov.
-
Vysoká úroveň produkcie interferónu
Bunky MG-63 sú schopné produkovať interferón na vysokej úrovni. Pri indukcii cykloheximidom, kyselinou polyinozínovou, kyselinou polycytidylovou a aktinomycínom môžu poskytnúť 3,7-krát vyšší výťažok interferónu na cm² ako diploidné fibroblasty [2].
Nevýhody
Nevýhody spojené s MG-63 B bunkami sú:
-
Heterogenita
Bunky MG-63 vykazujú heterogenitu v rámci bunkovej populácie, čo môže ovplyvniť reprodukovateľnosť.
-
Línia nádorových buniek
MG-63 je nádorová bunková línia a nemusí plne reprezentovať normálne správanie a fyziológiu buniek, čo obmedzuje jej použitie v určitých laboratórnych experimentoch.
Objednajte si bunky MG-63 ešte dnes
Použitie buniek MG-63
Bunky MG-63 sú vynikajúcim výskumným nástrojom. Ponúkajú mnoho sľubných aplikácií v oblasti výskumu. Tu je uvedených niekoľko hlavných výskumných aplikácií buniek MG-63.
- Štúdium procesov/ochorení súvisiacich s kosťami: Bunky MG-63 sú bunky podobné osteoblastom (tvoriace kosti). Preto sa tieto bunky vo veľkej miere používajú na štúdium kostných ochorení a bunkových procesov vrátane vývoja, diferenciácie a mineralizácie. Okrem toho sa tieto bunky vo veľkej miere používajú na skríning terapeutických liekov na podporu hojenia kostí. Vo výskume sa použili bunky MG-63 na štúdium terapeutického potenciálu zelených syntetizovaných nanočastíc oxidu zinočnatého zo Scutellaria baicalensis na proliferáciu, mineralizáciu a diferenciáciu kostných buniek [3].
- Výskum rakoviny: Bunky MG-63 sa široko používajú vo výskume rakoviny. Vo viacerých štúdiách sa tieto osteosarkómové bunky použili na pochopenie signálnych dráh rakoviny a na hodnotenie cytotoxického a terapeutického potenciálu liečiv. V štúdii uskutočnenej v roku 2019 sa skúmali protinádorové vlastnosti prírodnej zlúčeniny tomentosínu s použitím buniek MG-63. Výsledky ukázali, že tomentosín vykazuje protinádorové účinky tým, že spúšťa vnútrobunkovú produkciu reaktívnych foriem kyslíka (ROS) [4].
Výskumné publikácie s bunkami MG-63
Nižšie sú uvedené niektoré výskumné publikácie, v ktorých sa uvádza bunková línia MG-63 podobná osteoblastom.
miR-192 zvyšuje citlivosť liečiva metotrexátu na rakovinové bunky osteosarkómu MG-63
Tento článok bol uverejnený v časopise Pathology - Research and Practice v roku 2020. V tomto výskume sa použili bunky MG-63 na štúdium molekulárnych mechanizmov podieľajúcich sa na rezistencii na lieky v bunkách rakoviny osteosarkómu (MG-63). Výsledky odhalili, že miRNA-192 by mohla byť užitočným cieľom pri prekonávaní rezistencie osteosarkómu na lieky metotrexát.
Tento výskum bol uverejnený v časopise Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2020). Štúdia uvádza protinádorový potenciál zelených syntetizovaných nanočastíc oxidu zinočnatého (ZnONP) z Rehmanniae Radix proti bunkám rakoviny kostí (MG-63).
Tento výskumný článok bol uverejnený v roku 2021 v časopise Materials Science and Engineering. Táto štúdia navrhla hojivé vlastnosti kostí biosyntetizovaných nanočastíc oxidu zinočnatého z rastliny Scutellaria baicalensis s použitím bunkovej línie MG-63.
Táto štúdia bola uverejnená v časopise Onco Targets and Therapy v roku 2021. Výskum navrhol protinádorové vlastnosti zlúčeniny kurkumínu proti bunkám osteosarkómu. Zlúčenina tieto terapeutické účinky vyvolala inaktiváciou signálnej dráhy p-JAK2/p-STAT3 rakoviny.
Tento výskum bol uverejnený v roku 2018 v časopise International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science. Štúdia zistila, že vitamín D3 ošetrený energiou biopola pozitívne ovplyvňuje proliferáciu, dozrievanie a diferenciáciu kostných buniek a zlepšuje parametre zdravia kostí.
Zdroje pre bunkovú líniu MG-63: Riešenia: protokoly, videá a ďalšie zdroje
K dispozícii je niekoľko zdrojov o bunkovej línii MG-63, ktoré objasňujú jej protokoly kultivácie a transfekcie buniek.
- Transfekcia buniek MG-63: Toto video komplexne vysvetľuje protokol transfekcie buniek MG-63.
- Pasážovanie adherentných buniek: Toto video poskytuje návod na subkultiváciu alebo pasážovanie adherentných bunkových línií. Pomôže vám naučiť sa základné protokoly kultivácie buniek.
Nasledujúci odkaz vám poskytne kultivačný protokol pre bunky MG-63.
- Kultivácia buniek MG-63: Táto webová stránka poskytuje jednoduchý a podrobný protokol na subkultiváciu alebo delenie bunkovej línie MG-63.
Často kladené otázky o bunkách MG-63
Odkazy
- Wandiyanto, J.V., et al., The Fate of Osteoblast-Like MG-63 Cells on Pre-Infected Bactericidal Nanostructured Titanium Surfaces. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A., et al., Human interferon: mass production in a newly established cell line, MG-63 (Ľudský interferón: masová produkcia v novo vytvorenej bunkovej línii MG-63 ). Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): p. 11-5.
- Tang, Y., et al., Osteogenic differentiation and mineralization potential of zinc oxide nanoparticles from Scutellaria baicalensis on human osteoblast-like MG-63 cells (Osteogénna diferenciácia a mineralizačný potenciál nanočastíc oxidu zinočnatého zo Scutellaria baicalensis na ľudských bunkách podobných osteoblastom MG-63). Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: p. 111656.
- Lee, C.M., a i., Tomentosín vykazuje antikarcinogénny účinok v ľudských bunkách osteosarkómu MG-63 prostredníctvom indukcie vnútrobunkových reaktívnych foriem kyslíka. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): p. 1508.