Bunková línia INS-1

INS-1 je dobre charakterizovaná bunková línia inzulinómu potkana, ktorá sa široko používa vo výskume cukrovky. Bunky INS-1 vylučujú inzulín po stimulácii glukózou, preto sa používajú na štúdium metabolizmu glukózy, fyziológie beta buniek a regulácie sekrécie inzulínu. Okrem toho sa tieto bunky využívajú aj pri skríningu, testovaní a vývoji potenciálnych terapeutík proti diabetes mellitus.

Tento článok vám poskytne všetky potrebné informácie o beta bunkách INS-1, ktoré potrebujete vedieť pred ich použitím vo vašom výskume. Dozviete sa najmä tieto informácie:

Všeobecné charakteristiky a pôvod buniek INS-1
Bunková línia INS-1: Informácie o kultivácii
Výhody a nevýhody bunkovej línie INS-1
Výskumné aplikácie INS-1 buniek inzulinómu potkanov
Výskumné publikácie s beta bunkami INS-1
Zdroje pre bunkovú líniu INS-1: Protokoly, videá a ďalšie zdroje

1. Všeobecná charakteristika a pôvod buniek INS-1

Poznanie všeobecných vlastností a pôvodu bunkovej línie vám môže výrazne pomôcť pri jej efektívnom a účinnom používaní vo vašom výskume. Táto časť článku vás bude informovať o pôvode a všeobecných vlastnostiach INS-1. Dozviete sa: Čo je to INS-1 bunková línia inzulinómu potkana? Aké sú všeobecné vlastnosti INS-1? Čo je bunková línia INS-1 832/3? Čo je INS-1E?

Bunky INS-1 boli pôvodne izolované zo 666-dňového potkana s transplantovateľným inzulinómom vyvolaným röntgenom.
Bunky INS-1 sú dvojhormonálne. Súčasne exprimujú proteíny inzulínu a proglukagónu. Tieto bunky sa považujú za nezrelé, pretože vykazujú nízke hladiny expresie transkripčného faktora Nkx6.1 a sú zbavené markerov alfa buniek [1].
Existujú dva podklony buniek INS-1, t. j. INS-1E a INS-1 832/3.
INS-1E sa líši od materskej bunkovej línie INS-1, pokiaľ ide o reakcie sekretov na glukózu a obsah inzulínu.
INS-1 832/3 alebo INS-1 832/13 je tiež subklon bunkovej línie INS-1. Je to neoceniteľný model na štúdium funkcie beta buniek pankreatických ostrovčekov a regulácie sekrécie inzulínu. Od materských buniek INS-1 sa líši aj v kontexte glukózou stimulovanej sekrécie inzulínu (GSIS).

3D modelovanie inzulínom sprostredkovaného príjmu glukózy.

2. Bunková línia INS-1: Informácie o kultivácii

Aby ste mohli účinne zaobchádzať s bunkovou líniou a udržiavať ju, musíte o nej poznať nasledujúce kultivačné informácie. Táto časť článku sa bude zaoberať všetkými kľúčovými bodmi kultivácie buniek INS-1: Ako sa kultivujú bunky INS-1 beta? Aký je protokol kultivácie buniek INS-1? Aký je čas zdvojnásobenia buniek INS-1? Aké je médium pre bunky INS-1 inzulinómu potkanov?

Kľúčové body pre kultiváciu buniek INS-1

Čas zdvojnásobenia:	Čas zdvojenia populácie buniek INS-1 je približne 44 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:	Bunky INS-1 rastú v suspenznej aj adherentnej forme.
Pomer subkultivácie:	Bunky INS-1 sa subkultivujú v pomere 1:3. V krátkosti sa odoberú suspendované bunky. Adherentné bunky sa opláchnu PBS a inkubujú sa s roztokom Accutase. Po oddelení sa bunky doplnia čerstvým médiom. Potom sa suspendované aj adherentné bunky odstredia a zozbierajú. Bunky sa opatrne resuspendujú a dávkujú do nových baniek na rast.
Rastové médium:	RPM1 1640 sa používa na kultiváciu bunkovej línie inzulinómu INS-1rat. Médium je doplnené 10 % tepelne inaktivovaným fetálnym bovinným sérom, 2,1 mM stabilným glutamínom, 10 mM HEPES, 2,0 g/l NaHCO3 a 1 mM pyruvátom sodným.
Rastové podmienky:	Bunky INS-1 sa uchovávajú vo zvlhčenom inkubátore pri teplote 37 °C a s nepretržitým prívodom 5 % CO2.
Skladovanie:	Bunky INS-1 beta sa môžu dlhodobo skladovať v parnej fáze tekutého dusíka alebo pri teplote nižšej ako -150 °C v elektrickej mrazničke.
Proces zmrazovania a médium:	Na zmrazenie buniek INS-1 sa používajú médiá CM-1 alebo CM-ACF prostredníctvom pomalého procesu zmrazovania. Umožňuje pokles teploty len o 1 °C za minútu, aby sa ochránila životaschopnosť buniek.
Proces rozmrazovania:	Zmrazené bunky INS-1 sa rozmrazujú vo vodnom kúpeli nastavenom na teplotu 37 °C počas 40 až 60 sekúnd. Po rozmrazení sa bunky doplnia čerstvým médiom a priamo sa nalejú do novej banky na rast. Po 24 hodinách sa médium vymení, aby sa odstránili zložky zmrazeného média.
Úroveň biologickej bezpečnosti:	Na kultiváciu buniek INS-1 inzulinómu potkana sa vyžaduje laboratórium s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.

Bunky INS-1 rastúce v ostrovčekoch pri 10-násobnom a 20-násobnom zväčšení.

3. výhody a nevýhody bunkovej línie INS-1

Podobne ako iné bunkové línie, aj INS-1 má niektoré odlišné vlastnosti spojené s určitými výhodami a nevýhodami. Tu sme uviedli niekoľko významných.

Výhody

Hlavné výhody bunkovej línie INS-1 sú:

Dobre charakterizovaná
INS-1 je dobre zavedená a dobre charakterizovaná bunková línia. Bola použitá v mnohých výskumných štúdiách. Dlhodobo si zachováva svoje fenotypové charakteristiky a schopnosť vylučovať inzulín, čím poskytuje spoľahlivé a konzistentné experimentálne výsledky.
Model beta buniek
Bunky INS-1 sa používajú na štúdium funkcie beta buniek pankreatických ostrovčekov, ktoré vylučujú inzulín a reagujú na výkyvy hladiny glukózy.

nevýhody

Nevýhody buniek INS-1 sú:

Nie sú ľudského pôvodu
INS-1 beta bunky nie sú ľudského pôvodu. Boli odvodené z inzulinómu potkana. To môže spôsobiť druhovo špecifické rozdiely a obmedziť priamy prenos experimentálnych výsledkov na ľudskú fyziológiu.

4. Výskumné aplikácie INS-1 buniek inzulinómu potkana

Beta bunky INS-1 sa vo veľkej miere používajú vo výskume cukrovky. Tu sa uvádza niekoľko sľubných aplikácií tejto bunkovej línie.

Štúdie sekrécie inzulínu: Bunky INS-1 majú schopnosť vylučovať inzulín, a preto sa vo veľkej miere využívajú na štúdium základných bunkových mechanizmov sekrécie inzulínu. Výskumníci skúmajú základné faktory, ktoré sa podieľajú na uvoľňovaní inzulínu, vrátane metabolizmu glukózy, signálnych dráh, hormónov a farmakologických látok. Štúdia zistila, že dráha závislá od K + ATP iónového kanála reguluje sekréciu inzulínu v beta bunkách INS-1 [2]. Okrem toho štúdie odhalili, že na sekrécii inzulínu v bunkách INS-1 inzulinómu potkanov sa podieľajú aj dráhy GLP-1R a AKT/PDX1 [3].
Štúdie funkcie beta buniek: Bunky INS-1 majú vlastnosti podobné beta-bunkám pankreatických ostrovčekov, ako je reakcia na metabolizmus glukózy a sekrécia inzulínu. Preto sa používajú na štúdium fyziologických procesov a funkcií beta buniek. V štúdii uskutočnenej v roku 2022 sa použili bunky INS-1 a vytvoril sa model dysfunkcie beta buniek prostredníctvom _H2O2 Skúmala sa životaschopnosť buniek, sekrécia inzulínu a markery súvisiace s oxidačným stresom v týchto bunkách v reakcii na liečbu prírodnými zlúčeninami [4].
Objavovanie a vývoj liekov: Inzulinómové bunky potkanov INS-1 sa široko používajú na skríning a testovanie antidiabetických zlúčenín alebo liečiv. Môžu sa použiť na štúdium potenciálnych účinkov terapeutických látok na sekréciu inzulínu a iné relevantné parametre. V štúdii sa zistilo, že loganín, zložka čínskej bylinnej receptúry, chráni funkciu buniek INS-1 vylučujúcich inzulín a má potenciálne antidiabetické účinky. Táto zložka sprostredkovala tieto priaznivé účinky inhibíciou jadrovej translokácie génu FOXO1 prostredníctvom dráhy PI3K/AKT [5].

550,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300471

5. Výskumné publikácie obsahujúce beta bunky INS-1

Tu je niekoľko významných výskumných publikácií, v ktorých je použitá bunková línia INS-1 inzulinómu potkana.

Alfa-mangostín zlepšuje sekréciu inzulínu a chráni bunky INS-1 pred poškodením vyvolaným streptozotocínom

Táto štúdia bola uverejnená v časopise Internation Journal of Molecular Sciences v roku 2018. Štúdia navrhla, že žltá kryštalická prírodná zlúčenina, alfa-mangostín, podporuje sekréciu inzulínu v beta bunkách INS-1 a chráni ich pred poškodením vyvolaným toxínom beta buniek streptozotocínom.

Potenciacia glukózou stimulovanej sekrécie inzulínu v bunkách INS-1 epikatechínom nezávisí od jeho antioxidačnej aktivity

Tento výskum bol uverejnený v časopise acta pharmacologica sinica v roku 2018. Výsledky štúdie odhalili, že zlúčenina epikatechínu podporuje glukózou stimulovanú sekréciu inzulínu v beta bunkách INS-1 s nasýtenými mastnými kyselinami prostredníctvom aktivácie dráhy CaMKII.

Novoobjavený fenyletanoidný glykozid zo stévie rebaudiany Bertoni ovplyvňuje sekréciu inzulínu v bunkách krysích ostrovčekov INS-1

V tomto článku v časopise Molecules (2019) sa navrhuje, že nová prírodná zlúčenina fenyletanoidný glykozid ovplyvňuje sekréciu inzulínu v INS-1 inzulinómových bunkách potkanov, a tým má antidiabetický potenciál.

Loureirin B podporuje sekréciu inzulínu prostredníctvom dráh GLP-1R a AKT/PDX1

Tento výskum bol uverejnený v časopise European Journal of Pharmacology (2022). Štúdia navrhla, že Loureirin B, prírodný produkt, zvyšuje sekréciu inzulínu v beta bunkách pankreatických ostrovčekov INS-1 prostredníctvom modulácie dráh AKT/PDX1 a GLP-1R.

Protinádorová aktivita Withania coagulans in vitro proti rakovinovým bunkám HeLa, MCF-7, RD, RG2 a INS-1 a fytochemická analýza

V tomto článku Integrative Medicine Research (2018) sa hodnotil protinádorový potenciál extraktu Withania coagulans s použitím rakovinových buniek INS-1.

6. Zdroje pre bunkovú líniu INS-1: Protokoly, videá a ďalšie zdroje pre INS INS INS: zdroje pre INS INS INS: protokoly, videá a ďalšie zdroje

Tu nájdete niekoľko online zdrojov, v ktorých sú uvedené bunky INS-1:

Subkultivácia suspenzných buniek: Toto video je komplexným sprievodcom subkultiváciou buniek rastúcich v suspenzných kultúrach.
Subkultivácia adherentných buniek: Toto video vám pomôže naučiť sa všeobecný protokol na pasážovanie adherentných buniek.

Nasledujúci odkaz obsahuje protokol kultivácie buniek INS-1:

INS-1: Táto webová stránka obsahuje všetky informácie o bunkovej kultúre INS-1. Obsahuje informácie o bunkovej kultúre INS-1 a zmrazovacích médiách, protokoly pre subkultiváciu a manipuláciu s kryokonzervovanými a proliferačnými kultúrami INS-1.

Odkazy

Acosta-Montalvo, A., et al., Proglucagon-Derived Peptides Expression and Secretion in Rat Insulinoma INS-1 Cells. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
Park, J.E. and J.S. Han, A Portulaca oleracea L. extract promotes insulin secretion via a K+ ATP channel dependent pathway in INS-1 pancreatic β-cells (Extrakt z Portulaca oleracea L. podporuje sekréciu inzulínu prostredníctvom K+ ATP kanála v pankreatických β-bunkách ). Výskum a prax v oblasti výživy, 2018. 12(3): p. 183.
Fang, H., et al, Loureirin B podporuje sekréciu inzulínu prostredníctvom dráh GLP-1R a AKT/PDX1. European Journal of Pharmacology, 2022. 936: p. 175377.
Duan, J., et al., Swietenine and swietenolide from Swietenia macrophylla king improve insulin secretion and attenuate apoptosis in H2O2 induced INS-1 cells. Environmental Toxicology, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
Mo, F.-F., a i., Antidiabetický účinok loganínu inhibíciou jadrovej translokácie FOXO1 prostredníctvom PI3K/Akt signálnej dráhy v INS-1 bunke. Iranian Journal of Basic Medical Sciences, 2019. 22(3): p. 262.