Bunky CAL27 - cielený pohľad na rakovinu hlavy a krku pomocou buniek CAL27
CAL27 je jednou z najčastejšie používaných bunkových línií spinocelulárneho karcinómu ústnej dutiny v biomedicínskom výskume. Je cenným nástrojom na štúdium zložitých aspektov skvamocelulárnych karcinómov vrátane rastu a vývoja nádorov a základných bunkových a molekulárnych mechanizmov. Okrem toho uľahčuje aj skríning a testovanie liekov na vývoj protinádorových liekov.
Tento článok vám ponúkne cenné poznatky o bunkovej línii CAL27 a bude sa zaoberať nasledujúcimi témami:
- Pôvod a všeobecné charakteristiky buniek CAL27
- Informácie o kultivácii bunkovej línie CAL27
- Bunková línia CAL27: Výhody a nevýhody
- Použitie buniek CAL27 vo výskume
- Publikácie s bunkovou líniou CAL27
- Zdroje pre bunkovú líniu CAL27: Protokoly, videá a ďalšie zdroje informácií o CAL27
1. Pôvod a všeobecné vlastnosti buniek CAL27
Prvá vec, ktorú potrebujete vedieť o bunkovej línii, je jej pôvod a všeobecné charakteristiky, ktoré ju odlišujú od iných bunkových línií. Táto časť článku zahŕňa základné informácie o bunkách CAL27. Dozviete sa: Čo je model buniek CAL27? Čo je CAL27 HPV? Aký je stav CAL27 HER2? Aký je pôvod bunkovej línie CAL27? Aká je morfológia buniek CAL27? Aká je veľkosť buniek CAL27?
- Bunková línia CAL27, ktorá vznikla z tkaniva jazyka 56-ročného muža bielej pleti s ochorením skvamózneho karcinómu jazyka. Túto bunkovú líniu vytvoril v roku 1982 Gioanni so svojimi kolegami [1].
- Rakovinové bunky CAL27 vykazujú morfológiu podobnú epitelovým bunkám.
- Tieto bunky majú aneuploidný karyotyp. Ich modálne číslo chromozómov je 43.
2.informácie o kultivácii bunkovej línie CAL27
Pre jednoduchú a uskutočniteľnú údržbu bunkovej línie musíte poznať jej kľúčové požiadavky na kultiváciu buniek. Táto časť obsahuje dôležité pojmy týkajúce sa kultivácie bunkovej línie CAL27. Mali by ste vedieť: Aký je čas zdvojenia bunkovej línie CAL27? Čo je bunkové médium CAL27? Aký je subkultivačný pomer bunkovej línie CAL27? Aké sú podmienky kultivácie línie CAL27? Ako sa kultivujú bunky CAL27?
Kľúčové body pre kultiváciu buniek CAL27
|
Čas zdvojnásobenia: |
Bunky CAL27 vykazujú miernu rýchlosť rastu s časom zdvojnásobenia populácie približne 45 hodín. |
|
Adherentné alebo v suspenzii: |
Tieto polygonálne bunky CAL27 priľnú k povrchu kultivačnej nádoby a rastú do monovrstvy. |
|
Pomer rozdelenia: |
Bunky CAL27 sa subkultivujú v pomere 1:2 až 1:4. Pri subkultivácii sa adherované bunky premyjú fyziologickým roztokom s fosfátovým pufrom bez obsahu horčíka a vápnika (1x). Potom sa bunky inkubujú s Accutase (pasážovací roztok) pri teplote okolia počas 8 až 10 minút. Odpojené bunky sa doplnia čerstvým médiom a odstredia sa. Odobratý pelet sa potom opatrne resuspenduje a preleje do nových baniek obsahujúcich rastové médium. |
|
Rastové médium: |
Na kultiváciu bunkovej línie CAL27 sa používa médium DMEM doplnené 10 % FBS, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-glutamínu, 1,5 g/l NaHCO3 a 1,0 mM pyruvátu sodného. Médium by sa malo vymieňať 2 až 3-krát týždenne. |
|
Rastové podmienky: |
CAL27 bunkové kultúry sa uchovávajú pri teplote 37 °C vo zvlhčenom inkubátore s prívodom 5 % CO2. |
|
Skladovanie: |
Zmrazené bunky CAL27 sa dlhšie uchovávajú buď v parnej fáze tekutého dusíka, alebo pri teplote nižšej ako -150 °C v mrazničke s veľmi nízkou teplotou. |
|
Proces zmrazovania a médium: |
Na zmrazovanie buniek CAL27 sa odporúča zmrazovacie médium CM-1 alebo CM-ACF. Na tento účel sa odporúča pomalý proces zmrazovania, ktorý umožňuje pokles teploty len o 1 °C za minútu, aby sa ochránila životaschopnosť buniek. |
|
Postup rozmrazovania: |
Zmrazené fľaštičky s bunkami sa vložia do vodného kúpeľa nastaveného na 37 °C na 40 - 60 sekúnd, kým nezostane malý ľadový chumáč. Bunky sa doplnia čerstvým médiom a odstredia sa. Potom sa zmrazovacie médium odstráni a bunkový granulát sa pridá s čerstvým rastovým médiom a opatrne sa resuspenduje. Bunky sa potom dávkujú do nových baniek na rast. |
|
Úroveň biologickej bezpečnosti: |
Na manipuláciu s bunkovými kultúrami CAL27 a ich údržbu je potrebné laboratórne prostredie na úrovni biologickej bezpečnosti 1. |
3.bunková línia CAL27: Výhody a nevýhody
CAL27 je široko používaná bunková línia skvamózneho karcinómu ústnej dutiny. V tejto časti sa zdôraznia niektoré významné výhody a nevýhody týkajúce sa týchto rakovinových buniek.
Výhody
Hlavné výhody bunkovej línie CAL27 sú:
|
Tumorigénnosť |
Bunková línia CAL27 má nádorový potenciál. Z týchto buniek sa môžu vyvinúť nádory, keď sa injikujú do nahých alebo imunokompromitovaných myší. To môže výskumníkom pomôcť do hĺbky pochopiť biológiu nádorov a mikroprostredie. |
|
Genetické mutácie |
V bunkách CAL27 sa nachádzajú špecifické genomické zmeny, ako napríklad CAL27 P53, ktoré sa bežne vyskytujú pri spinocelulárnom karcinóme ústnej dutiny. Použitie CAL27 tak môže byť výhodné pre výskumníkov, ktorí skúmajú vplyv týchto mutácií na rast, vývoj a progresiu rakoviny. |
|
Jednoduchá kultivácia |
Línia orálnych skvamóznych buniek CAL27 nemá žiadne náročné požiadavky na kultiváciu buniek. Preto sa ľahko kultivuje a udržiava vo výskumných laboratóriách. |
Nevýhody
Nevýhody spojené s bunkovou líniou CAL27 sú:
|
Model in vitro |
Bunky CAL27 slúžia ako in vitro model spinocelulárneho karcinómu ústnej dutiny. Je však dôležité poznamenať, že nemusia presne odrážať vlastnosti a zložitosť pôvodných skvamocelulárnych nádorov. |
4.použitie buniek CAL27 vo výskume
Bunková línia CAL27 má širokú škálu aplikácií v biomedicínskom výskume. Niektoré z dôležitých využití vo výskume sú uvedené tu.
- Biológia rakoviny: Bunky CAL27 sa vo veľkej miere používajú na skúmanie molekulárnych a bunkových mechanizmov, ktoré sú základom vývoja a progresie karcinómu z dlaždicových buniek ústnej dutiny (OSCC). Výskumníci tiež skúmajú genetické mutácie, signálne dráhy a dôležité biomarkery súvisiace s dlaždicobunkovými nádormi. V štúdii uskutočnenej v roku 2021 sa využili bunky CAL27 a skúmala sa úloha CD147 pri vzniku skvamózneho karcinómu ústnej dutiny. Výsledky štúdie ukázali, že knockdown CD147 spôsobil inhibíciu proliferácie, migrácie a invázie buniek CAL27. Okrem toho jeho downregulácia bráni aj rozvoju rezistencie rakovinových buniek na lieky [2].
- Vývoj liekov: Bunková línia CAL27 slúži ako cenný nástroj na skríning a testovanie protinádorových liekov. Výskumníci využívajú tieto bunky na testovanie účinnosti rôznych chemoterapeutík, cielených terapií a experimentálnych liekov pri inhibícii proliferácie, rastu a životaschopnosti rakovinových buniek ústnej dutiny. Okrem toho sa hodnotil aj modulačný účinok potenciálnych protinádorových látok na dysregulované signálne dráhy rakovinových buniek. To môže pomôcť pri vývoji účinnej a personalizovanej liečby v boji proti ochoreniu. V štúdii sa skúmal protinádorový potenciál nanočastíc oxidu zinočnatého s použitím buniek CAL27. Výsledky štúdie odhalili, že nanočastice oxidu zinočnatého vyvolali cytotoxické účinky a tiež indukovali mitofágiu sprostredkovanú dráhou PINK1/Parkin v bunkách rakoviny jazyka CAL27 [3]. Podobne výskumníci pozorovali protinádorový potenciál doxorubicínu a jeho nanoformy (Doxil) na CAL27 rakovine z dlaždicových buniek ústnej dutiny [4].
5.publikácie s bunkovou líniou CAL27
Táto časť článku sa bude zaoberať niekoľkými zaujímavými a najčastejšie citovanými publikáciami o rakovinových bunkách CAL27:
Tento výskum bol uverejnený v časopise Frontiers in Oncology (2020). V štúdii sa skúmali účinky vismodegibu alebo itrakonazolu proti rakovine ústnej dutiny s použitím buniek CAL27.
V tomto článku v časopise Frontiers in Genetics (2021) sa navrhuje, že proteín aktivátor plazminogénu, urokináza (PLAU), podporuje proliferáciu, migráciu a prechod buniek CAL27 z epitelu na mezenchým (EMT).
MikroRNA-145-5p zhoršuje apoptózu buniek a oxidačný stres pri skvamóznom karcinóme jazyka
V tomto článku v Experimental and Therapeutic Medicine (2021) sa zistilo, že miRNA-145-5p zhoršuje oxidačný stres a smrť buniek CAL27 a potláča signálnu dráhu PI3K/AKT.
Protinádorová aktivita rastlinného extraktu morínu v bunkách skvamózneho karcinómu jazyka
Táto štúdia v časopise Oncology Reports (2018) skúmala protinádorovú aktivitu bioflavonoidu nazývaného morín s využitím buniek CAL27.
V tomto článku v časopise Journal of Ethnopharmacology (2023) sa skúmal terapeutický potenciál extraktov Rosmarinus officinalis L. a Taraxacum officinale na bunky CAL27.
6.zdroje pre bunkovú líniu CAL27: Protokoly, videá a ďalšie zdroje
Dostupné zdroje o bunkovej línii CAL27 sú obmedzené. V tejto časti sme uviedli niekoľko všeobecných protokolov, ktoré vám môžu pomôcť aj pri práci s bunkami CAL27:
- Transfekcia buniek CAL27: Toto video vám pomôže naučiť sa všeobecný protokol transfekcie plazmidovej DNA.
- Subkultivácia adherentných buniek: Toto video vás komplexne oboznámi so subkultiváciou adherentných bunkových línií.
Nasledujúci odkaz obsahuje protokol kultivácie buniek CAL27.
- Bunková línia CAL27: Táto webová stránka obsahuje informácie o médiách CAL27, hustote výsevu, čase zdvojnásobenia atď. Okrem toho obsahuje protokol o subkultivácii a manipulácii s proliferujúcimi a kryokonzervovanými kultúrami.
Odkazy
- Liu, X., a i., LINC00472 potláča rast orálneho skvamózneho karcinómu cielením na os miR-455-3p/ELF3. Bioengineered, 2022. 13(1): p. 1162-1173.
- Pan, S., et al., Knockout CD147 inhibuje proliferáciu, inváziu a rezistenciu na lieky buniek ľudského karcinómu ústnej dutiny CAL27 in Vitro a in Vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: p. 378-389.
- Wang, J., et al. nanočastice oxidu zinočnatého indukujú toxicitu v bunkových líniách rakoviny ústnej dutiny CAL 27 aktiváciou mitofágie sprostredkovanej PINK1/Parkinom. International Journal of Nanomedicine, 2018: s. 3441-3450.
- Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen, and A.M.S. Eldeen, Liposome-coated nano doxorubicin induces apoptosis on oral squamous cell carcinoma CAL-27 cells. Archives of oral biology, 2019. 103: p. 47-54.