Bunková línia BEWO

BeWo je bunková línia odvodená od ľudského choriokarcinómu, ktorá sa široko používa v biomedicínskom výskume. Slúži ako cenný in vitro model na skúmanie zložitého procesu vývoja placenty a syncytializácie ľudského trofoblastu. Výskumníci využívajú tieto bunky aj na štúdium správania trofoblastových buniek, produkcie hormónov a transportu látok cez placentu. Okrem toho sa bunky BeWo dajú využiť aj v toxikológii, pri štúdiu infekcií a prenosu chorôb.

Tento článok zahŕňa základné poznatky o bunkách BeWo, ktoré vám môžu pomôcť zaoberať sa nimi vo vašom výskume. Zahŕňa:

Všeobecnú charakteristiku a pôvod BeWo buniek
Bunkovú líniu BeWo: Informácie o kultivácii
Výhody a nevýhody bunkovej línie BeWo
Výskumné aplikácie buniek BeWo
Výskumné publikácie s bunkami BeWo
Zdroje pre bunkovú líniu BeWo: Protokoly, videá a ďalšie informácie

1. Všeobecná charakteristika a pôvod buniek BeWo

Predchádzajúce znalosti o pôvode bunkovej línie a jej všeobecných vlastnostiach sú rozhodujúce pre jej použitie vo vašom výskume. Táto časť článku sa zaoberá pôvodom bunkovej línie BeWo, jej charakteristickými vlastnosťami a mnohým ďalším. Dozviete sa tu: Čo je to bunková línia choriokarcinómu BeWo? Čo je to syncytializácia BeWo? Odkiaľ pochádzajú bunky BeWo? Aká je morfológia buniek BeWo? Aká je ploidia buniek BeWo?

Placentárna bunková línia BeWo vznikla z malígneho gestačného choriokarcinómu mužskej fetálnej placenty v roku 1968 [1]. Slúži teda ako neoceniteľný model pre placentárny výskum.
Bunky BeWo vykazujú morfológiu podobnú epitelu.
Bunky BeWo sú relatívne malé, s veľkosťou od 20 do 30 µM [2].
Bunky BeWo vykazujú stabilný karyotyp. Ich kmeňová línia je hypo-tetraploidná. Modálny počet chromozómov buniek BeWo je 86. Môže sa pohybovať od 71 do 178.
Bunky BeWo produkujú niekoľko hormónov, t. j. ľudský choriový somatomamotropín, ľudský choriový gonadotropín (hCG) a steroidné hormóny.
Bunky BeWo exprimujú molekulárne markery vrátane CK 7, E-kadherínu a VE-kadherínu.

Podlínia B30

B30 je sublínia buniek BeWo. Používa sa na skúmanie príjmu a transportu živín. Pripisuje sa to ich energickému rastu na poréznych membránach.

BeWo a JEG-3

Bunkové línie BeWo JEG-3 sú odvodené z choriokarcinómov a používajú sa pri výskume placenty. Bunky BeWo produkujú hormóny v nižších hladinách ako JEG-3, ako napríklad ľudský choriový gonadotropín (hCG) a estradiol.

Časozberná vizualizácia oplodnenia ľudského vajíčka, znázorňujúca štádiá tvorby blastocysty, pozorované pod mikroskopom.

2. Bunková línia BeWo: Informácie o kultivácii

Udržiavanie bunkovej kultúry môže byť zložité, ak nepoznáte kľúčové detaily. Ako napríklad: Aký je čas zdvojnásobenia BeWo? Čo je bunkové médium BeWo? Ako kultivujete bunkovú líniu BeWo? a Ako zmrazíte bunky BeWo?

Kľúčové body pre kultiváciu buniek BeWo

Čas zdvojnásobenia:	Čas zdvojnásobenia populácie buniek BeWo je približne 30 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:	BeWo je adherentná bunková línia.
Hustota výsevu buniek:	Odporúčaná hustota výsevu pre bunky BeWo je 1 x¹⁰⁴ ^buniek/cm2. Pri výseve sa z buniek odstráni staré médium a bunky sa opláchnu 1 x PBS. Potom sa pridá Accutase (pasážovací roztok) a bunky sa inkubujú 8 až 10 minút pri teplote okolia. Potom sa oddelené bunky doplnia kultivačným médiom a odstredia sa. Zozbierané bunky sa potom resuspendujú a prelejú do novej banky.
Rastové médium:	Na pestovanie buniek BeWo sa používa médium Ham's F12K obsahujúce 10 % FBS, 2,0 mM L-Glutamín, 2,0 mM pyruvát sodný a 2,5 g/l NaHCO3. Médium pre bunky BeWo by sa malo vymieňať 2 až 3-krát týždenne.
Rastové podmienky:	Bunky BeWo sa udržiavajú vo zvlhčenom inkubátore pri teplote 37 °C a s prívodom 5 % CO2.
Skladovanie:	Zmrazené bunky BeWo sa skladujú pri teplote nižšej ako -150 °C v elektrickej mrazničke s veľmi nízkou teplotou alebo v parnej fáze tekutého dusíka.
Proces zmrazovania a médium:	Bunky BeWo sa odporúča zmrazovať v zmrazovacom médiu CM-1 alebo CM-ACF. Bunky sa zmrazujú metódou pomalého zmrazovania. Táto metóda umožňuje pokles teploty len o 1 stupeň za minútu, čím sa zabráni akémukoľvek šoku buniek a chráni sa ich životaschopnosť.
Proces rozmrazovania:	Zmrazené bunky sa rozmrazujú ponorením do vopred nastaveného vodného kúpeľa s teplotou 37 °C na 40 až 60 sekúnd, kým nezostane malý ľadový chumáč. Potom sa pridá čerstvé rastové médium a bunky sa odstredia, aby sa odstránili zložky zmrazovacieho média. Odobratá peleta buniek sa resuspenduje a dávkuje sa do kultivačnej banky na rast.
Úroveň biologickej bezpečnosti:	Na manipuláciu a udržiavanie bunkových kultúr BeWo je potrebné laboratórium na úrovni biologickej bezpečnosti 1.

Zachytenie epitelovej, polygonálnej morfológie a ostrovčekovitého rastu bunkovej línie ľudského choriokarcinómu BEWO pri 10-násobnom a 20-násobnom zväčšení pod mikroskopom.

3. Výhody a nevýhody bunkovej línie BeWo

Bunky BeWo vykazujú jedinečné vlastnosti a majú špecifické výhody a nevýhody. V tejto časti sa budeme venovať niektorým z nich.

Výhody

Hlavné výhody bunkovej línie choriokarcinómu BeWo sú:

In vitro model placentárnych buniek
Bunky BeWo poskytujú in vitro model na štúdium správania sa trofoblastových buniek a syncytializácie placenty, ktorý kopíruje procesy náročné na pozorovanie in vivo.
Produkcia hormónov
Bunky BeWo vylučujú hormóny, ako napríklad hCG a placentárny laktogén, vďaka čomu sú cenné pre štúdie hormonálnej regulácie a výskum reprodukčnej biológie.

Nevýhody

Nevýhody trofoblastových buniek BeWo sú:

Rakovinová bunková línia
Bunky BeWo boli odvodené z choriokarcinómu, čo je nádor placenty. Tento pôvod nemusí plne reprezentovať normálnu funkciu placentárnych buniek.

4. Výskumné aplikácie buniek BeWo

Bunková línia BeWo sa vo veľkej miere používa vo výskume placenty. Tu je uvedených niekoľko špecifických aplikácií tejto bunkovej línie:

Placenta a výskum súvisiaci s tehotenstvom: Bunky BeWo sú kľúčové pre výskum placenty a tehotenstva. Výskumníci využívajú tieto bunky na štúdium prenosu látok vrátane liečiv, živín a toxínov cez placentárnu bariéru. Okrem toho skúmajú aj produkciu a reguláciu hormónov vrátane ľudského choriového gonadotropínu (hCG), placentárneho laktogénu a steroidných hormónov. To je dôležité pre pochopenie hormonálnych zmien počas tehotenstva. Výskum realizovaný v roku 2018 skúmal vplyv brómovaných spomaľovačov horenia (BFR) na aktivitu sulfotransferázy v ľudskej trofoblastickej bunkovej línii (BeWo). Tento enzým sa podieľa na regulácii vnútrobunkových hladín hormónov štítnej žľazy [3].
Výskum infekcií a chorôb: Bunky BeWo sa používajú aj na skúmanie interakcie medzi patogénmi a placentárnymi bunkami. Tento výskum je cenný pre pochopenie chorôb, ktoré sa môžu prenášať z matky na plod, a pre vývoj stratégií na ochranu zdravia plodu. Okrem toho táto bunková línia pomáha výskumníkom skúmať komplikácie, ktoré vznikajú počas tehotenstva, ako je napríklad preeklampsia. Napríklad štúdia, ktorú v roku 2023 uskutočnila Michalina Bralewska, využila model trofoblastových buniek BeWo a zistila, že chromogranín A (CgA) aj peptid z neho odvodený, katestatín (CST), môžu zohrávať úlohu v zložitom procese patogenézy preeklampsie (PE) [4]. V ďalšej štúdii sa skúmal protinádorový potenciál trichosantínu s použitím bunkovej línie choriokarcinómu BeWo. Výskum vynaložil aj dodatočné úsilie na objavenie biomarkerov vykonaním porovnávacej proteomickej analýzy pred a po experimente [5].

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300123

5. Výskumné publikácie s bunkami BeWo

Tu sú uvedené niektoré významné výskumné publikácie, v ktorých sú použité trofoblastové bunky BeWo.

Signalizácia AMPK reguluje mitofágiu a produkciu mitochondriálneho ATP v ľudskej trofoblastovej bunkovej línii BeWo

Táto štúdia v časopise Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) navrhla, že signalizácia AMPK aktivuje mitofágiu v trofoblastových bunkách BeWo prostredníctvom dráh mitofágie podporovaných FUNDC1 a PRKN. V dôsledku toho mitofágia pomáha udržiavať produkciu ATP a potenciál mitochondriálnej membrány.

Etylparabén indukuje apoptotickú bunkovú smrť v bunkách ľudskej placenty BeWo prostredníctvom dráhy kaspázy-3

Tento článok bol uverejnený v časopise Animal Cells and Systems (2020). V štúdii sa navrhuje, že etylparabén sprostredkúva apoptózu buniek BeWo prostredníctvom regulácie dráhy kaspázy 3.

Charakterizácia potenciálu ľudského placentárneho tkaniva a bunkových línií (BeWo, JEG-3, JAR a HTR-8/SVneo) na likvidáciu xenobiotík a steroidov pomocou kvantitatívnej proteomiky

V tejto štúdii v časopise Metabolizmus a dispozícia liečiv (2023) boli použité placentárne bunkové línie vrátane BeWo, JAR, JEG-3 a HTR-8/SVneo na skúmanie depozície xenobiotík a steroidov v bunkách.

Apelín a apelínový receptor v ľudskej placente: Expresia, signálna dráha a regulácia proliferácie a bunkového cyklu trofoblastových buniek JEG-3 a BeWo

Tento výskumný článok v časopise International Journal of Molecular Medicine (2020) navrhol, že apelín, ligand receptora APJ, podporuje proliferáciu buniek BeWo prostredníctvom signalizácie APJ a ERK1/2, stat3 a AMPK. Mohlo by teda ísť o zásadný adipokín regulujúci vývoj placenty.

Protidoštičkové lieky a živiny plodu: vplyv na cholínové transportéry v ľudskej placentárnej bunkovej línii

Táto štúdia v Epilepsia (2021) skúmala účinky fetálnych živín a antiseptických liekov na cholínové transportéry v ľudskej trofoblastickej bunkovej línii BeWo.

6. Zdroje pre bunkovú líniu BeWo: Riešenia: protokoly, videá a ďalšie materiály

Tu sú k dispozícii niektoré online zdroje o bunkách BeWo:

In vitro transfekcia: Toto video vám pomôže naučiť sa protokol in vitro transfekcie plazmidovej DNA pre adherentné bunky.

Nasledujúci odkaz obsahuje informácie o bunkových kultúrach pre bunky BeWo:

BeWo bunky: Táto webová stránka obsahuje základné informácie o bunkovej kultúre pre bunkovú líniu BeWo. Patria sem informácie týkajúce sa bunkových médií a podmienok kultivácie. Obsahuje aj protokoly pre subkultiváciu a manipuláciu s kryokonzervovanými a proliferačnými kultúrami.

Odkazy

Weber, M., et al., Cytogenomika šiestich ľudských trofoblastických bunkových línií. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
Kolokol'tsova, T., et al., Charakteristika trofoblastu v dlhodobej kultúre. Bulletin experimentálnej biológie a medicíny, 2017. 164: p. 259-265.
Leonetti, C.P., C.M. Butt a H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment (Zníženie hladiny proteínu CgA v trofoblastických bunkových líniách HTR-8/SVneo a BeWo spôsobené preeklamptickým prostredím ). International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
Hu, Y., et al. porovnávacia proteomická analýza prídavku liečiva trichosantínu do bunkovej línie BeWo. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.